和胃降逆方对卵清蛋白联合酸灌注诱导非糜烂性反流病大鼠食管黏膜中PAR2、SP、CGRP蛋白表达的影响

目的观察和胃降逆方对卵清蛋白联合酸灌注诱导的非糜烂性反流病大鼠食管黏膜中特异性激活蛋白激酶2(specific activated protein kinase 2,PAR2)、P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)等相关蛋白表达的影响。方法雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白对照组5只和实验组25只。实验组采用腹腔注射卵清蛋白致敏剂诱导内脏高敏感,24小时后随机分为5组,模型组、和胃降逆方(高、中、低)剂量组、奥美拉唑组,每组5只。和胃降逆方(高、中、低)剂量组及奥美拉唑组分别给予相应的和胃降逆方水溶液及奥美拉唑水溶液灌胃,空白对照组、模型组均予等体积蒸馏水灌胃。干预2周后,悬尾实验评价大鼠内脏高敏感。验证成模后,联合弱酸灌注诱导非糜烂性反流病大鼠模型,通过透射电镜观察大鼠食管黏膜病理学变化,Western blotting方法检测大鼠食管黏膜PAR2、SP、CGRP蛋白表达,免疫荧光双标技术观察食管黏膜中与PAR2、SP、CGRP激活相关的肥大细胞(mast cell,MC)及辣椒素受体1(transient receptor potential V1,TRPV1)蛋白的共表达。结果 (1)悬尾实验不动时间比较:与空白对照组相比,模型组大鼠不动时间显著减少(P0.01);与模型组相比,和胃降逆方中剂量组、奥美拉唑组大鼠不动时间明显增多(P0.01),和胃降逆方低剂量组大鼠不动时间增多(P0.05)。(2) Western blotting方法检测PAR2、SP、CGRP表达比较:与空白对照组相比,模型组大鼠食管黏膜的PAR2、CGRP蛋白表达显著升高(P 0. 01),SP蛋白表达升高明显(P 0. 05);与模型组相比,各用药组PAR2的蛋白表达显著下降(P0.01),各用药组SP的蛋白表达下降明显(P0.05),各用药组CGRP的蛋白表达显著下降(P0.01)。(3) MC与TRPV1共表达比较:与空白对照组相比,模型组大鼠食管黏膜的MC与TRPV1的共表达有一定程度的增多;与模型组相比,各用药组MC与TRPV1的共表达均不明显。结论和胃降逆方可通过降低PAR2、SP、CGRP的表达,改善非糜烂反流病大鼠的病理变化及内脏高敏感状态。     

从湿论治功能性便秘临证探讨

功能性便秘是常见的慢性肠道疾病,近年来发病率逐年上升。随着饮食结构和生活习惯的改变,湿秘日益增多,临床从湿论治功能性便秘疗效显著。笔者认为湿秘的产生与脾胃气机升降失司密切相关,湿邪秽浊,阻遏脾胃气机,津液转输、布散失常,浊邪壅滞,肠道传导失司,致糟粕内停而成秘;湿性黏腻,秽浊蕴结不泄而成湿秘。基于湿邪的特点,建立了以湿为中心的的便秘分型,分为湿浊便秘、湿热便秘、脾虚湿秘和阳衰湿秘四型,并强调治疗湿秘重在祛湿和调畅气机。     

清肠温中方治疗急性溃疡性结肠炎大鼠的拆方研究

目的 从细胞骨架破坏、炎症反应和缺氧环境角度开展清肠温中方的拆方研究,阐明该方在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)治疗中,针对不同病机更加有效的药物组成单元,为其药物配伍和临床应用提供科学依据。方法 79只SD大鼠随机分10组,其中空白组7只,模型组、温中健脾组、清热燥湿组、凉血化瘀组、温中健脾合清热燥湿组、温中健脾合凉血化瘀组、清热燥湿合凉血化瘀组、全方组和美沙拉秦组,每组8只。除空白组外,其余大鼠连续7天自由饮用4%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)溶液以建立急性UC模型。随后7天按不同分组灌胃给药,与此同时,除空白组外的所有大鼠,仍继续饮用1%DSS溶液以维持小剂量刺激引起的病变。通过组织学病变评分、结肠低氧诱导因子?1α(hypoxia inducible factor?1α,HIF?1α)蛋白电泳、波形蛋白(vimentin,VIM)和角蛋白8(cytokeratin 8,K8)免疫组化染色、血清干扰素γ诱导蛋白10(interferon?γ?inducible protein 10,IP10)、趋化因子受体3(chemokine receptor 3,CXCR3)Elisa检测,开展清肠温中方拆方的拆方研究。结果 与模型组相比,清热燥湿、温中健脾合清热燥湿、温中健脾合凉血化/K8蛋白表达比值,其中以温中健脾合凉血化瘀组效果更明显(P0.05)。全方及拆方各组均能减少血清中IP10含量,温中健脾合凉血化瘀和温中健脾合清热燥湿组效果更为明显(P0.05);除凉血化瘀组外各组均能降低血清CXCR3含量,其中以清热燥湿合凉血化瘀和温中健脾合凉血化瘀组降低更多,且联合组疗效优于美沙拉秦(P0.05)。全方及拆方各组均能减少结肠中HIF?1α表达,以温中健脾合凉血化瘀、温中健脾合清热燥湿和全方组的下降趋势更明显,但各组间不存在统计学差异。结论 清肠温中方全方的作用优于温中健脾合凉血化瘀和温中健脾合清热燥湿组,而两组又比单用温中健脾、清热燥湿或凉血化瘀有更明显的调控作用。进一步证实了在UC的治疗中,清热燥湿或凉血化瘀的祛邪治法,只有在联合了温中健脾的扶正药物后,才能更好地发挥修复细胞骨架、减轻炎症反应和改善缺氧环境的作用。提示在UC的临床治疗中,需要重视顾护正气,即温中健脾,才能取得更好的疗效。     

青黛对急性溃疡性结肠炎小鼠模型结肠黏膜中性粒细胞迁移浸润的作用影响

目的 探讨青黛从抑制中性粒细胞迁移浸润结肠的角度,治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制.方法 选取C57BL/6小鼠40只,分为空白组、模型组、青黛组和阳性药组,每组各10只.用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠UC急性模型.造模7d后给药,再连续给药7d后麻醉处死.记录疾病活动指数评分、组织病理学观察结肠黏膜病理变化及中性...     

桥本氏甲状腺炎实验模型构建研究进展

桥本氏甲状腺炎是一种自身免疫性疾病,临床检查以血清中甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和甲状腺球蛋白抗体(TgAb)滴度显著升高,病理主要表现为淋巴细胞浸润、正常的甲状腺滤泡变小萎缩、间质纤维化。桥本氏甲状腺炎的实验模型构建是进行相关实验研究的基础,本文主要从构建实验性桥本氏甲状腺炎的动物选择、动物模型构建方式、细胞实验反向验证方面进行相关综述。