基于中医辨证保健理论探索辅助降血糖功能评价方法

目的：通过建立“气阴两虚型胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱动物模型”,探索符合中医辨证特点且适用于保健食品功能评价的证候模型,以期为研发辅助降血糖辨证保健产品提供方法学参考。方法：选取45只雄性SD大鼠,根据基础血糖值分为空白组、模型组、阳性组[十味消渴胶囊1.32 g（kg·d）,相当于人7.92 g/d]。采用力竭游泳、甲状腺素（T4）皮下注射、连续高脂饲料合并链脲佐菌素（STZ）注射复合因素造模。实验第一天开始给药,连续灌胃33 d。结果：模型组大鼠出现懒动无力、毛发枯黄、情绪躁动等气阴两虚的证候表证;饮水量、进食量、排尿量显著增加、体质量显著降低;空腹血糖（FBG）、血糖曲线下面积（AUC）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显著升高,HOMA-β、胰岛素敏感指数（Insulin Sensitivity Index,ISI）显著降低,血清总胆固醇(TC)、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）显著升高,高密度脂蛋白（HDL）显著降低,三碘甲状腺原氨酸（T3）、T4显著升高,环磷酸腺苷（cAMP）显著升高、环磷酸鸟苷（cGMP）显著降低、cAMP/cGMP显著升高,力竭游泳时间显著降低,脾脏指数、胸腺指数显著降低。十味消渴胶囊能显著增加模型大鼠体质量,降低空腹血糖,改善糖耐量,延长力竭游泳时间,降低T3、T4的水平,降低cAMP/cGMP比值,改善胰岛素抵抗。结论：采用力竭游泳、T4注射、高脂喂养结合STZ注射复合因素建立“气阴两虚型胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱动物模型”,造模设计在思路和方法上符合中医基本理论,可以用于益气养阴类中药保健食品降血糖功能的评价。     

金昭胶囊对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用

目的：研究金昭胶囊对急性酒精性肝损伤的保护作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法：将美国癌症研究所（ICR）小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、金昭胶囊低、中、高剂量组,每组10只,持续给药4周后,用50%乙醇灌胃制备小鼠急性酒精性肝损伤模型。观察各组小鼠状态,测定醉酒状态、血清转氨酶活性,肝组织乙醇及脂肪代谢过程相关酶活性、抗氧化酶活性、胃组织抗氧化酶活性并取肝脏进行苏木精-伊红（HE）染色病理切片检查。结果：与模型组比较,金昭胶囊各剂量组小鼠血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性显著降低(P<0.01,P<0.05);肝组织中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、丙二醛(MDA)活性显著降低(P<0.01,P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)活性显著升高(P<0.01,P<0.05),肝细胞坏死程度降低;胃组织丙二醛(MDA)活性显著降低(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)活性显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论：金昭胶囊具有保护急性酒精性肝损伤的功效,其作用机制可能与增强体内肝组织中乙醇代谢关键酶及抗氧化酶活性,减少脂质过氧化物的产生,保护肝细胞膜完整性,减少转氨酶的释放相关。同时金昭胶囊还能通过调节胃组织过氧化物酶活性,达到保护胃黏膜的作用。     

中成药治疗2型糖尿病用药规律及作用靶点分析

目的:通过运用中医传承辅助系统(V2.5)对现有治疗2型糖尿病的中成药处方进行组方用药规律总结,同时分析中药降糖的作用靶点分布规律,以期在此基础上为新药研发及临床应用提供参考。方法:搜集药融云中国药品批文数据库中治疗2型糖尿病的中成药处方,通过中医传承辅助平台软件集成的数据挖掘方法,对筛选出中成药处方进行组方规律分析。通过检索国家知识基础设施数据库（CNKI）和中国学术期刊数据库（CSPD）对高频药物的降糖作用机制进行分析,明确作用靶点。结果:通过搜集、分析整理得到138首方剂的主治证型与220种药物的使用频次、核心药物组合及新药物组合。并对高频药物的降糖作用靶点进行归纳总结。通过统计可发现,现有治疗2型糖尿病中成药的主治证型以气阴两虚证和阴虚内热证为主,高频次使用药物主要为补气药、养阴药、清热药。通过运用平台分析软件,发现中成药组方中甘味(80次)、苦味(69次)药物频次较高,四气中以寒性(97次)的使用频次最高,热性(2次)药物的使用频次最低,药物归经出现最多的为肝经(94次)。通过软件集成的熵层次聚类方法得到的新药物组合中,出现了疏散风热药牛蒡子、清肝降火药青葙子,活血化瘀药水蛭等。现有中成药处方的药物作用靶点主要集中在抑制糖原异生、促进糖原合成;促进胰岛素分泌;防止胰岛细胞凋亡3个环节。结论:2型糖尿病的证候以气阴两虚和阴虚内热为主,其用药多以药性甘、苦、寒,归肝经为主,多使用补气、养阴、清热药,临床诊治过程中可以适当运用疏散风热、清肝降火、活血化瘀药等治疗兼证以增强疗效;作用靶点主要与抑制糖原异生、促进糖原合成,促进胰岛素分泌,防止胰岛细胞凋亡有关。     

青钱柳对阴虚型2型糖尿病大鼠内分泌-免疫-环核苷酸系统的影响

目的:探讨青钱柳对阴虚型2型糖尿病大鼠内分泌、免疫功能及环核苷酸的影响。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为空白组7只和造模组53只。其中空白组给予普通饲料,造模组给予高脂饲料喂养8周。第9周,以0.2mg/kg的剂量皮下注射甲状腺素溶液1周。第10周,以30mg/kg的剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素,并于72h后选择空腹血糖>11.1mmol/L的成模大鼠随机分为模型组,知柏地黄丸组,CPE低、中、高剂量组,每组7只;空白组和模型组给予无菌水,知柏地黄丸组给予知柏地黄丸混悬液(0.3g/kg),CPE低、中、高剂量组分别给予青钱柳叶水提取物(CPE)0.25、0.5、1g/kg。连续给药4周,给药期间检测空腹血糖(FBG),给药结束后,检测糖环磷酸腺苷、内分泌免疫等代谢指标。结果:与模型组比较,CPE低、高剂量组大鼠T3、T4含量显著下降(P<0.01,P<0.05);CPE低、中剂量组大鼠C4含量显著升高(P<0.01);CPE高剂量组大鼠T、C3含量显著升高(P<0.01,P<0.05);CPE中、高剂量组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α、E2含量显著下降(P<0.05,P<0.01),IgG、IgM含量显著升高(P<0.05,P<0.01);CPE低、中、高剂量组大鼠COR含量显著升高(P<0.01,P<0.05),rT3、TP、ALB、UA、cAMP、cGMP的含量显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论:CPE可调节阴虚型2型糖尿病大鼠的能量代谢异常,缓解内分泌激素紊乱,调节免疫物质的分泌和环核苷酸代谢。     

沙苑子苷A对脂肪变L02细胞中三酰甘油水解及炎症介质的影响

目的：研究沙苑子苷A对脂肪变L02细胞的降脂效果和作用机制。方法：采用游离脂肪酸（FFA）诱导肝L02细胞脂肪变性,分为对照组、模型组、沙苑子苷A低剂量、中剂量、高剂量组（1 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L）,流式细胞仪检测细胞凋亡和脂肪堆积,按照试剂盒检测三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的水平,实时荧光定量PCR（qPCR）检测三酰甘油水解酶（ATGL）、过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR-α）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA的表达,蛋白质印迹法（Western Blotting）检测ATGL、PPAR-α、PPARγ、TNF-α、IL-6蛋白的表达。结果：沙苑子苷A能显著减少脂肪堆积,降低TG、TC、MDA含量,增加SOD活性,降低细胞凋亡率,减轻脂毒性造成的肝细胞损伤,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);沙苑子苷A能升高ATGL、PPAR-α、PPARγmRNA和蛋白的表达,同时降低TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论：沙苑子苷A可能通过上调PPARα、PPARγ的表达,使ATGL表达增加,促进肝脏TG的水解,减少肝脏脂肪的沉积,缓解氧化应激,抑制TNF-α和IL-６的分泌,减轻炎症反应,从而恢复肝细胞的正常功能。     

白芍多糖对化学性肝损伤肝阴虚证病证结合模型的影响和作用机制

目的：在建立肝阴虚证病证结合实验模型的基础上,研究白芍多糖对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证候模型的影响和作用机制。方法：将40只无特定病原体（Specific Pathogen Free,SPF）级雄性SD大鼠,按体质量随机区组法分为空白组、模型组、阳性药组、白芍多糖组。除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射浓度20%CCl4橄榄油溶液,后期给予附子、干姜、肉桂温热中药复方灌胃,同时给药,连续6周。6周后观察大鼠体质量,易激惹程度,毛发光泽度,小便颜色,大便颜色质地,肛温。测定血清及肝组织转氨酶活性、细胞因子水平、脂肪代谢相关酶活性、抗氧化酶活性并取肝脏进行HE病理切片检查。结果：与模型组比较,多糖组可改善大鼠大便的干燥程度（P<0.05）,血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、Ⅳ型胶原(C Ⅳ)、层粘连蛋白(LN)水平显著降低（P<0.05）,丙二醛水平显著下降（P<0.05）,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著升高（P<0.05）,病理切片有所改善。白芍多糖组大鼠TNF-α、IL-6水平显著下降（P<0.05）,磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT)mRNA表达量显著下降（P<0.05）。结论：白芍提取物白芍多糖具有保护化学性肝损伤肝阴虚证的功效,其作用机制可能与抗肝纤维化、减轻氧化应激水平、调节细胞因子平衡有关。     

参附强心丸联合化学药常规治疗用于慢性心力衰竭有效性与安全性的Meta分析

目的:系统评价参附强心丸联合化学药常规治疗用于慢性心力衰竭的有效性和安全性,为临床用药提供循证参考。方法:计算机检索中国知网、万方数据、维普网、谷歌学术、PubMed、Cochrane图书馆、Embase等数据库,收集参附强心丸联合化学药常规治疗(试验组)对比化学药常规治疗(对照组)的随机对照试验(RCT),检索时限均为各数据库建库起至2020年5月12日。筛选文献、提取数据后,采用Cochrane系统评价员手册推荐的5.1.0偏倚风险评估工具对纳入文献质量进行评价。采用Stata 14.0软件进行Meta分析、敏感性分析。结果:共纳入7项RCT,共计596例患者。Meta分析结果显示,试验组患者的总有效率显著高于对照组[OR=4.14,95%CI(2.15,7.97),P<0.00001];按疗效判定标准不同进行的亚组分析结果显示,试验组患者以Lee式积分法、心功能分级法判定的总有效率均显著高于对照组(P<0.05)。试验组患者治疗后N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平显著低于对照组[SMD=-1.33,95%CI(-1.55,-1.11),P<0.00001];按心力衰竭类型不同进行的亚组分析结果显示,试验组慢性心力衰竭患者治疗后NT-proBNP水平均显著低于对照组(P<0.001)。试验组患者治疗后左心室射血分数(LVEF)水平[WMD=5.76,95%CI(5.05,6.47),P<0.00001]显著高于对照组,治疗后B型利钠肽水平[SMD=-1.61,95%CI(-2.58,-0.54),P<0.00001]、左心室舒张末期内径(LVEDD)水平[WMD=-6.06,95%CI(-6.84,-5.27),P<0.00001]、左心室收缩末期内径水平[WMD=-5.02,95%CI(-5.70,-4.33),P<0.00001]均显著低于对照组。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。敏感性分析结果显示,以治疗后NT-proBNP、LVEF水平、LVEDD水平为指标时,剔除异质性来源后的分析结果与剔除前比较无显著性差异。结论:参附强心丸联合化学药常规治疗慢性心力衰竭的疗效与安全性均较好。     

白芍总苷对大鼠化学性肝损伤与肝阴虚证结合模型的影响和机制研究

目的研究白芍总苷对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证候模型的影响和作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠适应性喂养后,随机分为对照组、模型组、一贯煎组和白芍总苷组。除对照组外,其余各组大鼠ip 20%CCl_4橄榄油溶液,后期ig给予附子、干姜、肉桂温热中药复方制备化学性肝损伤肝阴虚证模型。一贯煎组、白芍总苷组造模同时给药,1次/d,连续6周。6周后测定大鼠体质量、肛温,观察其一般状态;测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α))、血浆血栓素B_2(TXB_2)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)水平及肝组织白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测肝脏磷脂酰肌醇激酶(PI3k)mRNA、蛋白激酶B(Akt)m RNA和蛋白表达水平,并取肝脏进行HE病理切片检查。结果与模型组比较,白芍总苷组大鼠体征评分有明显改善(P0.05),体质量显著升高(P0.05),血清ALT、AST水平显著降低(P0.01、0.001),cAMP/cGMP显著升高(P0.01),LN、HA水平均显著降低(P0.05、0.001),肝组织TNF-α、IL-6水平显著降低(P0.001),Akt蛋白表达水平显著降低(P0.05),PI3K、Akt mRNA表达水平显著降低(P0.05、0.001),同时肝脏病理损伤有所改善。结论白芍总苷具有保护化学性肝损伤肝阴虚证的功效,可能是白芍养肝阴的物质基础,其作用机制可能与抗炎、减轻微循环障碍、通过抑制PI3K-Akt通路来调节细胞因子IL-6和IL-10平衡有关。     

达原饮在新冠肺炎中的应用及其治疗发热临床效果的系统分析

目的〓总结达原饮在新冠肺炎中的应用,并系统评价达原饮治疗发热的有效性。方法 检索PubMed、The Cochrane Library、EMbase、CNKI、WANFANG、VIP,筛选达原饮治疗发热的随机临床对照试验文献,时间为自建库起至2020年4月4日。由2名评价者进行数据提取,使用Review Manager 5.3对文献进行敏感性评价。同时梳理新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案第三至八版,分析推荐处方中达原饮的加减方案并进行归纳总结。结果 共纳入RCT文献12篇,总计病例2 398个。系统分析结果显示治疗组有效率明显高于对照组（[RR=1.11,95%CI(1.06,1.16),P=0.00]。治疗组在体温恢复时间、症状积分方面优于对照组,分析结果均具有统计学意义。连续变量数据临床异质性过大仅作描述性分析。结论 达原饮联合疗法治疗发热的疗效确切且治疗效果优于常规疗法。