猪带绦虫TSOL18基因重组乳球菌疫苗的稳定性分析

目的 研究猪带绦虫TSOL18基因重组乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)疫苗的人工传代稳定性。方法 将重组质粒pMG36e-TSOL18、pMG36e-SP-TSOL18电转入L.lactis,经PCR鉴定阳性菌株pMG36e-TSOL18/L.lactis、pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis,在无红霉素抗性和含红霉素抗性条件下,连续人工传代20次,通过测定质粒遗传稳定率和双酶切鉴定,分析质粒pMG36e-TSOL18、pMG36e-SP-TSOL18在L.lactis中的稳定性情况。结果 质粒pMG36e-TSOL18、pMG36e-SP-TSOL18在L.lactis中连续传代20代后,在无红霉素抗性条件下,质粒稳定率均为100%,在含红霉素抗性条件下,质粒稳定率均为99%。将各代次的质粒采用限制性内切酶SacI/HindIII进行双酶切鉴定,琼脂糖凝胶电泳显示大小正确,连续传至20代时,与原代质粒相符。结论 提示质粒pMG36e-TSOL18、pMG36e-SP-TSOL18在L.lactis中连续传代20代时,均有较好的遗传稳定性,为猪带绦虫TSOL18基因重组乳球菌疫苗的进一步研究奠定了基础。     

猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18在乳球菌中的表达

目的观察猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中的表达情况。方法将胞内型表达载体pMG36e-TSOL18和分泌型表达载体pMG36e-SP-TSOL18电穿孔转化至L.lactis MG1363,PCR鉴定阳性克隆,经热诱导后采用SDS-PAGE和Western blot分析表达情况。结果 PCR鉴定重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18成功转入L.lactis MG1363。SDS-PAGE检测重组质粒pMG36eTSOL18转化菌仅在胞内表达相对分子质量(Mr)约为15×103的TSOL18目的蛋白,pMG36e-SP--TSOL18转化菌胞内和胞外均表达相应的TSOL18目的蛋白,其相对分子质量(Mr)为15×10~3,与预期相符;Western blot分析重组pMG36e-TSOL18/L.lactis胞内表达的TSOL18重组蛋白以及pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis胞内和胞外表达的TSOL18重组蛋白均能被相应兔抗血清识别。结论猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18转化L.lactis MG1363后仅在胞内表达TSOL18蛋白,pMG36e-SP-TSOL18转化L.lactis MG1363后胞内胞外均有TSOL18蛋白表达,但产量较低,表达的重组蛋白均具有免疫反应性。     

生肌象皮膏治疗慢性难愈性溃疡临床疗效及初步机制

目的观察生肌象皮膏治疗慢性难愈性溃疡的临床效果,并分析其初步机制。方法将处于生肌收口期的慢性难愈性溃疡患者62例随机分为2组,治疗组(32例)采用生肌象皮膏换药,对照组(30例)采用凡士林纱条换药,治疗4周。观察愈合率、创面缩小情况及创面分泌物中血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果2组痊愈率、总有效率比较,差异有统计学有意义(P＜0.05)。治疗2周时,治疗组创面平均缩小82.31%,对照组为66.32%;治疗4周时,治疗组创面平均缩小90.35%,对照组为78.7%。2组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。换药1、2、3周时,治疗组分泌物中 VEGF 含量与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论生肌象皮膏能促进慢性难愈性创面愈合,可能与其增加创面VEGF表达而促进创面修复有关。     

菠萝蛋白酶在创面修复中的作用

对于创面处理的过程需要很多方法的协作,包括清创、控制感染、足够的血管形成、减轻负担、适量营养摄入、血糖控制等[1]。但是,对于急性创面和慢性创面的愈合,其变迁过程是不同的。急性创面的愈合表现为一系列有序的、可以预测的事件的串联过程,都是时限性的,预后较好;慢性创面往往不     

化腐再生法治疗糖尿病足肌腱坏死的初步机制

目的:观察化腐再生法对糖尿病足坏死肌腱的化除及对伤口的愈合的初步机制。方法:107例糖尿病足患者,随机分为化腐再生组35例,化腐组36例,再生组36例,针对其创面情况适时行蚕食清创,而后分别采用不同药物换药治疗,在治疗0、3、7、14天分别提取伤口分泌物进行各项生化指标及pH值检测,并对化腐再生组分泌物行扫描电镜检测,观察三种换药方法对糖尿病足肌腱坏死创面康复的影响,并分析其初步机制。结果:8周后观察化腐再生组坏死肌腱治疗后较其他两组脱落明显;创面分泌物中的总蛋白、总氨基酸、总DNA、总一氧化氮(NO)及溶菌酶含量随时间延长显著增加,其中各项指标化腐再生组均高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05);化腐再生组各阶段分泌物pH值更加符合伤口愈合pH值曲线;分泌物电镜观察显示化腐再生法处理过的伤口分泌物逐渐浓稠,白细胞活性增强。结论:应用化腐再生法治疗能够明显调动起有益于伤口修复的活性因子,并顺应伤口愈合规律,提供适宜伤口修复的外环境,从而促进糖尿病肌腱坏死伤口愈合。     

化腐再生法治疗糖尿病足肌腱坏死

目的: 观察化腐再生法对糖尿病足坏死肌腱的化除及对伤口愈合的影响。 方法: 107例糖尿病足患者,随机分为化腐再生组35例,化腐组36例,再生组36例,针对其创面情况适时行蚕食清创,而后分别采用不同药物换药治疗,观察8周后坏死肌腱脱落、伤口愈合状况以及治疗前后血常规分析中白细胞、C反应蛋白等炎性指标的变化。同时在治疗0,3,7,14 d分别提取伤口分泌物进行病理涂片以及肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白介素-6 (IL-6)检测,观察3种换药方法对糖尿病创面愈合的影响,并加以分析。 结果: 化腐再生组坏死肌腱治疗后较其他两组脱落明显;3组白细胞及C反应蛋白均呈下降趋势,化腐再生组下降迅速,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05);分泌物病理涂片化腐再生组及化腐组炎细胞较再生组明显减少;3组分泌物TNF-α均呈上升趋势,化腐再生组较其他3组升高,差异有统计学意义(P＜0.05);3组分泌物IL-6在早期均呈先升后降趋势,化腐再生组分泌物IL-6值较其他组上升时间及回落时间较其他组迅速,差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 应用化腐再生法换药,能够尽早液化坏死肌腱及坏死组织,促进创面的愈合,其机制可能与菠萝蛋白酶在象皮生肌膏联合作用下使创面引流通畅,激活并增强机体持久的抗炎免疫机制,从而利于控制糖尿病足感染,促进创面的愈合有关。     

从阴阳辨证分期论治下肢丹毒

丹毒是一种临床常见的急性感染性疾病,好发于颜面及小腿。临证中,下肢丹毒病因总由血热火毒为患,辨证多以局部辨证为主,治疗以清热解毒、凉血利湿化瘀为要,用药多苦寒。但是,辨证中容易忽视阴阳辨证和阴阳的转化,造成下肢丹毒易诊易治但复发率却较高的现状。     

生肌象皮膏对难愈性创面点状植皮后伤口分泌物炎症因子的影响

目的评价生肌象皮膏联合点状植皮治疗难愈性创面的临床疗效并探讨其可能机制。方法选择难愈性创面患者48例,随机分为生肌象皮膏组和凡士林组各24例。患者创面床准备充分后即可行点状植皮,然后生肌象皮膏组以单层生肌象皮膏纱条覆盖,凡士林组敷以凡士林纱布覆盖,再以无菌干纱布稍加压包扎。以后隔日更换生肌象皮膏纱条或凡士林纱布直至完全愈合。观察皮片成活率及愈合时间,同时在植皮后0、2、4、6、8天分别收集伤口分泌物,检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、转化生长因子β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果生肌象皮膏组皮片成活率为(93.78±4.87)%,凡士林组皮片成活率为(82.37±3.19)%,两组皮片存活率比较差异有统计学意义(P0.05)。与本组0天时比较,两组在4、6天时TNF-α、IL-1β、TGF-β1和VEGF含量均明显升高(P0.05)。与凡士林组同时间比较,生肌象皮膏组在6、8天时TNF-α、IL-1β含量降低,在4、6、8天时TGF-β1、VEGF含量高于凡士林组(P0.05)。结论生肌象皮膏联合点状植皮治疗难愈性创面可提高皮片成活率,其机制可能是通过减少植皮术后炎症反应,促进新生毛细血管及新生上皮形成。     

基于因腐致痛理论探讨止痛生肌法治疗风疽临床疗效

目的观察止痛生肌法治疗风疽的临床疗效。方法回顾2012～2017年采用止痛生肌法治疗的26例风疽患者,比较治疗前后疼痛程度、疼痛持续时间,疮面愈合时间,每日疼痛持续时间及睡眠时间。结果采用止痛生肌法后2天(2.15±0.79)左右疮面疼痛减轻,5天(5.43±3.36)左右仅换药时轻度疼痛,治疗后静息性疼痛与换药时疼痛与治疗前差异具有统计学意义(P0.01)。治疗前每日疼痛持续时间15(15.37±4.51)小时左右,每日睡眠时间仅为5小时(4.63±1.19)左右;治疗5天后每日疼痛持续时间减少到3小时(3.27±1.49)左右,每日睡眠时间仅为8小时(8.35±1.76)左右。治疗前每日疼痛持续时间、每日睡眠时间与治疗5天后相比,差别有统计学意义(P0.01)。且观察到不同于常规的"离心性与向心性"生长同步进行的愈合方式,使创面愈合加速。结论止痛生肌法治疗风疽可去腐止痛、生肌长皮,在止痛提高患者生活质量的同时,加速疮面愈合。