蛛网膜下腔出血后血管平滑肌细胞凋亡的microRNA芯片检测及分析

目的：采用microRNA芯片技术筛选蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）凋亡中起重要作用的microRNA。方法：首先建立SAH后VSMC凋亡模型。然后采用microRNA芯片筛选差异表达microRNA。最后采用qRT-PCR方法对筛选出来的microRNA145进行验证,并通过生物信息数据库预测其可能的靶基因。结果：通过200 μmol/L氧合血红蛋白（oxyhemoglobin,OxyHb）作用24 h,成功建立SAH后VSMC凋亡模型。MTT检测显示200 μmol/L OxyHb组作用24 h后吸光度（absorbance,A）值为0.197±0.131,流式细胞仪检测凋亡率为30.233±7.231,与其他组相比差异明显（P<0.05）。然后通过microRNA芯片检测,获得差异表达microRNA 22个,其中显著上调的16个,显著下调的6个。其中microRNA145差异变化最大。经qRT-PCR验证,SAH后VSMC中microRNA145异常高表达。预测结果显示,Bcl-2/腺病毒E１B19０００相互作用蛋白３（Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3,BNIP3）为其可能的靶基因。结论：microRNA145可能是调控SAH后VSMC凋亡的分子靶点。microRNA145可能通过BNIP3相关信号途径,导致了SAH后VSMC凋亡,诱发并加重了脑血管痉挛。     

高职高专院校教学质量监控评估体系的建立与实践——以昆明卫生职业学院教学督导工作为例

对高职高专教育教学的现状,质量监控评估系统的构建思想、组成部分,教学督导的作用以及质量监控评估体系的成果进行阐述。     

604份学生评教问卷调查分析——高职高专教师教学质量评价

学生评教作为教学质量监控评估体系中的重要组成部分,在教学过程中发挥着积极的作用.现将高职高专604份学生评教问卷调查结果进行分析,并提出意见及建议.     

昆明某高校医学生新冠肺炎疫情期间线上学习效果评价

  目的   探讨新冠肺炎疫情期间线上学习效果,为后疫情时代线上线下混合式教学提供理论依据。  方法   用分层整群抽样方法选取昆明某高校医学院917名学生为调查对象,设计问卷用问卷星进行调查。对学习资源、教师授课情况、学生学习过程及学习成绩进行调研,提出线上教学研究的结论和建议。  结果  研究发现线上学习中手机占比较高,区域网络状态与学习效果具有显著性差异（P < 0.05）;教师无论采用哪种授课方式,学习效果均认为一般,教师监督程度与学习效果相关,差异具有统计学意义（P < 0.05）;学生自律性、教师授课方式、学科兴趣及教师监督程度成为线上学习效果的4大主要影响因素;比较2019.3-7下学期与2020.3-7下学期各专业学生成绩总平均分,差异无统计学意义（P > 0.05）。  结论   线上教学应考虑影响学习效果的多种因素,需要结合课程特点优化组合教学资源,加强线上教学的监督管理,以进一步提高学习效果。针对疫情前和疫情期间线下和线上学习成绩比对,尚不能认为疫情期间线上学习对成绩有影响,可能与疫情后期集中式学习等有关。     

人参皂苷Rg1对人神经干细胞功能表达的膜片钳研究

目的:观察人参皂苷Rg1诱导人神经干细胞(neural stem cells of human,hNSCs)的功能表达.方法:采用全细胞膜片钳技术分析人参皂苷Rg1诱导hNSCs分化7d时,神经元样细胞的膜电生理特性以及钠、钾离子通道的功能表达.结果:人参皂苷Rg1(20 mg·L-1)诱导hNSCs分化7d时,神经元样细胞的膜静息电位为(-45.70 ±2.63)mV,膜电容为(26.89±1.91) pF,膜输入阻抗为(877.51±20.44) MΩ(与对照组相比均P＜0.05);电压依赖性的快速激活、快速失活的内向Na+电流,检出率50％,平均峰值为(711.48±158.03) pA(与对照组相比P＜0.05);外向K+电流的主要成分是快速激活快速失活的瞬时外向K+电流和延迟整流外向K+电流,其平均峰值为(1 070.42±177.18) pA(与对照组相比P＜0.05).结论:人参皂苷Rg1可以促进hNSCs功能表达和成熟.     

构建芯片技术探讨人参皂苷Rg1促进人神经干细胞分化的机制

目的:采用基因芯片技术筛选出人参皂苷Rg1促进NSCs分化的主要分子靶点。方法:通过基因芯片技术,观察Rg1诱导人神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化7 d时靶基因表达,通过数据演算筛选出Rg1促进NSCs分化的最主要的靶基因和信号转导途径,然后采用Western blot和免疫组化的方法对其中的ERK信号分子进行验证。结果:在Rg1诱导NSCs分化第7天时,获得差异基因675个,其中显著上调的基因255个,显著下调的基因420个;MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)通路中的ERK1/2(细胞外信号调节蛋白激酶)信号分子与NSCs分化直接相关。经Western blot和免疫组化证实,在Rg1诱导NSCs分化中,ERK1/2蛋白明显上调,磷酸化水平也明显增强,此作用能够被PD98059(ERK1/2阻断剂)所阻断,同时PD98059也可以明显阻断NSCs的分化。结论:ERK1/2是人参皂苷Rg1促进NSCs分化的重要分子靶点。基因芯片筛选出的差异表达基因可能为研究Rg1促进NSCs分化的分子机制提供线索。     

基因芯片技术筛选人参皂苷Rg1促进人神经干细胞增殖的分子靶点研究

目的: 采用基因芯片技术筛选出人参皂苷Rg₁促进人神经干细胞(neural stem cells, NSCs)增殖的主要分子靶点。方法: 首先通过MTT法筛选出Rg₁促进NSCs增殖的最佳作用质量浓度为120 mg·L^-1。然后通过基因芯片技术,观察Rg₁促其增殖7 d时靶基因表达,通过数据演算筛选出Rg₁促进NSCs增殖的最主要的靶基因和信号转导途径。结果: 在Rg₁促进NSCs增殖第7天时,获得差异基因440个,其中显著上调的基因266个,显著下调的基因174个;HES1基因和CAMP(环磷酸腺苷)-PKA(蛋白激酶A),PI3K(磷脂酰肌醇-3激酶)-AKT信号传导通路与Rg₁促进人NSCs增殖密切相关。结论: 基因芯片筛选出的差异表达基因可能为研究Rg₁促进NSCs增殖的分子机制研究提供线索。