双氢青蒿素诱导肿瘤细胞铁死亡及其机制研究

目的阐明双氢青蒿素(DHA)诱导肿瘤细胞铁死亡的作用及其机制。方法利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)检测DHA与FeSO_4体外芬顿样(Fenton)反应生成氧自由基(·OH)的能力;MTT法检测DHA对人肝癌HepG2细胞的毒性(包括FeSO_4与去铁胺预处理组)。MTT法考察谷胱甘肽(GSH)与铁死亡抑制剂(Fer-1)对DHA细胞毒性的影响;采用DCFH-DA染料考察DHA(包括FeSO_4预处理组)诱导的细胞内活性氧的生成能力;采用C11-BODIPY581/591与DiO分别考察DHA(包括FeSO_4预处理组)对细胞内脂质过氧化物生成能力以及细胞膜结构的影响;利用谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)试剂盒测定DHA(包括FeSO_4预处理组)对HepG2细胞内GPX-4活性的影响。结果 Fe~(2+)能够催化DHA发生芬顿样反应并生成·OH;DHA的半数抑制浓度(IC_(50))为(39.96±8.78)μmol/L,FeSO_4与去铁胺分别能够增加或者降低DHA的细胞毒性;DHA处理后细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量升高,细胞形态变大,细胞膜呈散点状分布并呈现解离状态。FeSO_4预处理组与DHA组相比较进一步增加细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量,并且细胞膜形态完全破坏。FeSO_4能够增强DHA对GPX-4活性的抑制作用。结论 DHA通过芬顿样反应升高细胞内活性氧而最终诱导肿瘤细胞铁死亡。另外,外源性铁可以加速DHA发生芬顿样反应进而加速肿瘤细胞铁死亡的发生与发展。     

复方环丙沙星栓剂的制备及其含量测定

目的 制备环丙沙星-奥硝唑复方栓剂并建立其含量测定方法.方法 以PEG400,PEG6000为基质,熔融法制备环丙沙星-奥硝唑复方栓剂,采用高效液相色谱法进行含量测定.结果 制备得到水溶性基质的环丙沙星-奥硝唑复方栓剂;环丙沙星在41.6～416 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率为(98.45±0.51%)%;奥硝唑在43～430 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为(98.70±0.49)%.结论 该制备工艺简单,含量测定方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于复方环丙沙星栓剂的质量控制.     

LC-MS／MS法测定人血浆中米格列醇

目的:建立测定人血浆中米格列醇的 LC-MS/MS 法。方法:以盐酸格拉司琼为内标,以 Kromasil CN 柱(2.1 mm×150mm,3.0μm)为分析柱;采用0.05%三氟乙酸乙腈溶液-0.05%三氟乙酸水溶液(80:20)为流动相;流速0.2 mL·min~(-1);柱温45℃。质谱条件为电喷雾电离源(ESI~ ),以选择反应离子监测(SRM)方式进行检测,用于定量分析的反应离子分别为 m/z208.1→146.1(米格列醇),m/z 313.1→138.0(盐酸格拉司琼)。结果:米格列醇在0.01～4.0μg·mL~(-1)浓度范围内线性良好;最低检测限为2.0 ng·mL~(-1)(S/N=4);日内、日间精密度(RSD)均小于7%;低、中、高3个浓度的方法回收率均大于90%。结论:本法专属性强,灵敏度高,样品处理简单,可用于米格列醇临床药物动力学研究。     

2种单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒制剂的体内组织分布及药动学研究

目的:研究单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒(MSLN)和经聚乙二醇2000(PEG2000)修饰后的MSLN(PEG-MSLN)在小鼠体内的组织分布及其在大鼠体内的药动学,考察PEG2000修饰对MSLN体内组织分布及药动学的影响。方法:采用溶剂扩散法制备MSLN,测定其粒径和Zeta电位;以罗丹明B为荧光标记物,测定和计算2种MSLN制剂经鼠尾静脉注射后的体内组织分布及药动学参数。结果:2种MSLN制剂粒径分布相似,Zeta电位约为—20mV;经鼠尾静脉注射后,MSLN靶向肝脏,且经PEG2000修饰后的纳米粒体循环时间可显著延长至2·2倍。结论:MSLN经PEG2000修饰后可改善体循环,其可作为肝脏靶向的药物载体。     

2002~2004年杭州地区抗高血压药用药分析

目的考察杭州地区2002~2004年抗高血压药使用情况及趋势。方法采用购药金额排序法,对临床常用的几类抗高血压药在杭州地区的使用情况进行分析。结果近三年来,杭州地区抗高血压药的用药金额呈上升趋势,用量前十位的抗高血压药物金额在抗高血压药总金额中的比例也逐年增加;其中2004年钙通道拮抗剂的用药金额占总金额的50%左右,血管紧张素转换酶抑制药约占16%,血管紧张素Ⅱ受体拮抗药约占19%。结论钙通道阻滞药、血管紧张素转换酶抑制药和血管紧张素Ⅱ受体拮抗药成为临床用药金额最大的3类抗高血压药,血管紧张素Ⅱ受体拮抗药的临床使用正日益广泛。     

反相高效液相色谱法测定人卵泡液中异丙酚的药物浓度

 目的建立人卵泡液中异丙酚的反相高效液相荧光检测方法。方法采用Agilent1100高效液相色谱仪,色谱柱为AgilentExtend-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm);以甲醇-水(77∶23)为流动相,流速1.0mL·min^-1;荧光检测,激发波长为276nm,发射波长为310nm,以百里酚作为内标。结果卵泡液中异丙酚与内标百里酚得到较好的分离,卵泡液中内源性杂质不干扰测定。卵泡液中异丙酚的线性范围为0.108~5.4mg·L^-1,标准曲线为A=0.2074ρ-0.0012（r=0.9993）,检测限为54μg·L^-1,定量限为108μg·L^-1。低、中、高3个质量浓度的方法回收率分别为117.9%、101.7%、99.4%;日内RSD分别为4.10%、1.28%、0.20%（n=5）;日间RSD分别为4.34%、2.33%、0.61%（n=5）。结论本方法简单、准确;专属性强,灵敏度高,可用于临床药动学研究。     

取卵术患者异丙酚麻醉时卵泡液异丙酚浓度的变化

异丙酚静脉麻醉是经阴道B超引导下穿刺取卵术的主要麻醉方法[1-3].实验研究显示,大鼠卵母细胞在含高浓度异丙酚(10μg/ml)中孵育30 min时,成熟率降低[4];在含异丙酚浓度≥0.4 μg/ml的培养液中孵育60 min后,卵母细胞受精融合率降低[5].本研究拟观察取卵术患者异丙酚静脉麻醉时卵泡液异丙酚浓度的变化,为异丙酚用于经阴道穿刺取卵术静脉麻醉的安全性研究提供依据.     

硫酸镁联合硝苯地平治疗子痫前期重度的临床分析

目的探讨硫酸镁联合硝苯地平治疗子痫前期重度的疗效及安全性。方法选择我院于2003~2004年,诊断为子痫前期重度并采用硫酸镁联合硝苯地平治疗方案的患者78例。考察治疗前后血压变化,水肿、蛋白尿及自觉症状的疗效评价,统计母婴出现不良反应情况。结果经治疗,78例患者的血压均有效的控制到了安全范围,水肿及自觉症状治愈缓解有效率大于70%,蛋白尿症状治愈缓解有效率约为25%,母婴未见明显的毒副反应。结论硫酸镁联合硝苯地平治疗子痫前期重度可以有效的缓解病情,引起毒副反应不明显,是一种相对安全有效的治疗方案。     

壳寡糖嫁接硬脂酸阳离子聚合物胶团的制备及其理化性质

目的考察阳离子型壳寡糖硬脂酸嫁接物胶团的理化性质及载药胶团的体外药物释放。方法以碳二亚胺为交联偶合剂制备壳寡糖硬脂酸嫁接物；芘荧光法测定该聚合物的临界聚集浓度，微粒粒度及电泳分析仪测定聚合物胶团的粒径和表面电位；以甲氨蝶呤为模型药物，考察胶团作为药物载体的可行性。结果嫁接物的临界聚集浓度为0.05 g·L^-1；去离子水中的胶团粒径为26.7 nm，表面电位为(55.9±0.1) mV；三聚磷酸钠修饰可使胶团粒径增加、表面电位降低、药物包封率增加；降低胶团溶液的pH值，可使胶团的粒径和表面电位上升，药物包封率下降，体外释药速度加快。 结论壳寡糖硬脂酸嫁接物胶团是一种良好的药物载体，其体外释药具有一定的pH依赖性。