滋补肝肾通络解毒中药对帕金森病大鼠旋转行为的影响

目的：阐明滋补肝肾通络解毒中药治疗帕金森病的作用机制。方法：采用6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧帕金森病(Parkinson’s disease，PD)模型，并用滋补肝肾通络解毒中药进行治疗，同时设立正常对照组、假手术组，观察中药对PD大鼠旋转行为的影响。结果：正常对照组、假手术组在治疗前后均未发现动物有旋转行为。而模型组和中药组在治疗前两组的旋转圈数分别为269&;#177;99和253&;#177;50，差异无显著性意义(t=0．649，P&;gt;0．05)；治疗后两组的旋转圈数分别为263&;#177;87和164&;#177;35，差异有显著性意义(t=4．748,P&;lt;0．01)。其中，与模型组比较，中药组的旋转圈数明显减少(t=9．544,P&;lt;0.01)。     

中西药合用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药与美多巴台用对帕金森病大鼠神经细胞凋亡的影响。 方法：实验于2003一03／200406在上海中医药大学科研实验中心完成。①选用雄性Wistar大鼠58只。7-8周龄。将其中40只大鼠用于制备帕金森病模型（以6-羟基多巴胺注射于大鼠脑右侧黑质，10d后腹腔注射阿朴吗啡0．5ms／kg诱发大鼠向一侧旋转，以开始旋转至30min内旋转圈数平均每分钟超过7次者为合格帕金森病模型），造模成功18只，随机分为2组：模型组、中西药治疗组，每组9只；另纳入9其正常大鼠为正常对照组（只固定大鼠，不进行任何处理），9只大鼠注射含0．2g／L抗坏血酸的等量生理盐水（其余条件与造模手术相同大鼠）为假手术组。②然后，正常对照组、假手术组、模型组：灌胃生理盐水2mL。中西药治疗组：灌胃中西药混悬液2mL[滋补肝肾、通络解毒巾药：汤药内含熟地、桑寄生、拘杞予、天麻、钩藤、僵蚕、丹参、莪术、白芍、生南星，按既定工艺煎煮成汤药，每毫升含原药材2．961g，由上海中医药大学附属龙华医院制剂室制备；蝎蜈胶囊内音全蝎、蜈蚣，0．3S／粒．由上海中医药大学附属龙华医院提供，批号；010813。按比例将胶囊混匀于汤药中，使浓度为3．006S／mL；含美多巴（上海罗氏制药公司产品，批号：052000，250mg／片）135mg／kg），1次／d，共45d。③实验结束后，每组取6只大鼠，处死，取出中脑组织，甲醛固定，梯度脱水，常规白蜡包埋，冠状切片，每块脑组织5张切片；每组取3只大鼠进行心脏灌注同定，后分离中脑黑质，制作电镜标本。用原位末端标记法染色和透射电镜（&;#215;9000）的方法观察中西药合用对神经细胞凋亡的影响。④组间比较采用方差分析。 结果：造模失败22只，由于造模失败脱失22只，进入结果分析36只。每组9只。①模型组标本中均能检测到原位末端标记法染色阳性细胞核，细胞核呈棕褐色。但主要集中在损毁侧黑质区内，细胞核体积缩小。或明显皱缩，形态呈圆形或不规整。模型组神经细胞凋亡数明显多于正常对照组、假手术组和中西药治疗组[（37．83&;#177;6．46），（1．67&;#177;1．9），（1．83&;#177;1．92），（1．28&;#177;4．75）个，P〈0.01]。中西药治疗组也能检测到凋亡细胞核，但与模型组比较，凋亡细胞数较少，单个散在分布。②电镜检查结果显示中西药合用组神经细胞病理变化明显比模型组轻，细胞膜稍有皱缩，细胞体积略缩小，线粒体等细胞器形态正常，细胞核稍呈皱缩状态，染色质有轻度凝聚成块并有边聚倾向，核膜基本完整。 结论：中西药合用对帕金森病犬鼠神经元细胞凋亡有明显抑制作用。     

活性氧参与益母草水苏碱抗AngⅡ诱导心肌细胞肥大的影响

目的利用新生大鼠心肌细胞，观察益母草水苏碱对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大和活性氧（ROS）含量的影响。方法培养新生大鼠心肌细胞，利用AngⅡ诱导心肌细胞肥大，观察不同浓度的益母草水苏碱对细胞肥大的影响（细胞数目、蛋白以及DNA含量），同时用H2DCFDA荧光探针标记、流式细胞仪检测ROS含量。结果①AngⅡ（10^-6mol／L）使心肌细胞蛋白含量明显增高（P〈0．05），对细胞数目和DNA含量无影响（P〉0．05）；②10^-7mol／L～10^-4mol／L浓度的益母草水苏碱呈剂量依赖性关系对抗AngⅡ导致的蛋白含量的增高（P〈0．05）；③AngⅡ可诱导心肌细胞内ROS含量增加，加入益母草水苏碱抑制了AngⅡ的这一作用。结论益母草水苏碱可抑制AngⅡ诱导的新生大鼠心肌细胞肥大，抑制ROS含量增加可能是其作用机制之一。     

4种不同中医治法干预异丙肾上腺素致大鼠心肌肥大的研究

目的 :研究4种不同中医治法对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥大的影响。 方法 :以异丙肾上腺素连续3 d以20,10,5 mg ·kg^-1递减sc,3 mg ·kg^-1维持7 d制备大鼠心肌肥大模型,造模成功后分别给予金匮肾气丸、补阳还五汤、生脉饮及真武汤10周干预,观察大鼠血流动力学指标、心输出量、心脏质量指数、左心室质量指数以及血清心房利钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)含量的变化。 结果 :金匮肾气丸、补阳还五汤能够有效提高左室收缩峰压(LVSP)、左室内压最大收缩率(+dp/dt_max)及心输出量( P <0.05),降低心脏指数、左心室指数及ANP,BNP水平( P <0.05)。生脉饮和真武汤对于心输出量、心肌舒缩功能、心脏指数、左心室指数及血清ANP,BNP含量均无明显作用。 结论 :益气活血法和温补肾阳法可以显著改善大鼠心肌收缩功能,增加心输出量,抑制心肌肥大,降低神经体液因子水平。     

大承气汤治疗大鼠内毒素性ARDS的疗效分析及免疫调节机制研究

目的： 探讨大承气汤对内毒素“二次打击”致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的防治作用,为中西医结合防治呼吸道疾病提供有效依据。方法: 48只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组:生理盐水对照组、ARDS模型组、大承气汤治疗组、地塞米松治疗组,每组12只。采用大肠杆菌脂多糖(LPS) “二次打击”建立大鼠ARDS动物模型,结合动脉血气分析、肺湿/干重(W／D)比值及肺组织病理学观察和评分,评价大承气汤的药理作用;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆与支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、IL-10水平,探讨大承气汤的药理作用和免疫调节机制。结果: (1)大承气汤可以显著提高ARDS大鼠动脉血氧分压,增加血氧饱和度,降低肺湿/干重比值和肺病理损伤,减轻肺水肿和肺部炎症反应,因而具有改善肺通气、抑制肺部炎症反应、减轻肺损伤功能。(2)大承气汤可使血浆促炎细胞因子（TNF-α、IL-1）和抗炎细胞因子（IL-10）水平同时降低,使BALF中TNF-α、IL-1水平降低同时IL-10水平却升高,因而表现出对全身炎症反应和局部炎症反应不同的免疫调节机能。结论: 大承气汤抑制肺部炎症反应除与下调全身炎症反应水平有关,同时还与促进肺部抗炎介质产生、调节肺部促炎介质/抗炎介质的平衡有关。     

内毒素“二次打击”顽固性低氧血症大鼠ARDS模型建立与评价

目的： 研究经内毒素“一次打击”和“二次打击”后致急性肺损伤(ALI)大鼠,建立稳定和可靠的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）动物模型,并探讨其意义和理论依据。方法: 大肠杆菌脂多糖(LPS) 较大剂量（10 mg/kg）静脉注射或气管滴入致伤大鼠,复制“一次打击”ARDS模型;LPS小剂量（1 mg/kg）腹腔注射致伤大鼠后,再予中等剂量LPS（5 mg/kg）气管滴入,建立“二次打击”ARDS模型。连续3 d动脉血气分析,结合肺湿重/干重比值(W／D)及肺组织病理观察,评价3种ALI/ARDS模型异同。测定血浆与支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1、IL-10水平,探讨LPS二次打击法可能致病机制。结果: (1)单次LPS打击（无论是静脉注射或气管滴入）仅引发大鼠ALI和一过性低氧血症, LPS二次打击法可以引发大鼠更为持久的低氧血症和特异性肺损伤,是较为理想的ARDS的动物模型。(2)LPS二次打击法引发的ARDS发病机制与全身失控性炎症反应与肺的特异性损伤有关。结论: LPS二次打击法可建立更为稳定可靠的符合诊断指标的大鼠ARDS模型,并能更好地反映肺损伤的病理变化。     

羚蝎胶囊对局灶性缺血再灌注大鼠脑组织病理形态学的影响

目的:探讨羚蝎胶囊防治大鼠急性缺血性中风的作用机制。方法:将54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、羚蝎胶囊组。采用穿线法行大脑中动脉栓塞术复制大鼠脑缺血再灌注模型,术前第7天至术后24 h分别给予相应的干预措施。术后24 h检测各组大鼠患侧脑组织含水量,并观察患侧脑组织形态学变化。结果:造模后24 h,羚蝎胶囊组和模型组大鼠患侧脑含水量较假手术组显著升高(P0.05,P0.01),羚蝎胶囊组较模型组明显下降(P0.05)。羚蝎胶囊组大鼠脑组织结构损伤明显较模型组减轻。结论:羚蝎胶囊能显著减轻脑缺血再灌注大鼠脑水肿及脑组织损伤。     

活血潜阳方对血瘀阳亢痰浊型SHR大鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号通路的影响

目的:探讨活血潜阳方治疗高血压和改善胰岛素抵抗可能的作用机制。方法:将自发性高血压大鼠(SHR)随机分为SHR对照组、血瘀阳亢痰浊模型组及活血潜阳方治疗组,另设雄性京都大鼠(WKY)为正常对照组。治疗组予灌胃活血潜阳方混悬液(15 ml·kg-1·d-1,每毫升约含生药4.22 g),其余各组灌胃等量生理盐水,连续8周。检测各组大鼠血压、血脂、血糖及胰岛素代谢情况;RT-PCR测定胰岛素信号通路关键基因的mRNA表达水平,并用免疫印迹加以验证。结果:治疗组SHR大鼠的血压、三酰甘油、胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数均较SHR模型组显著下降(P0.01);且治疗组大鼠血浆葡萄糖激酶(GCK)、6-磷酸葡萄糖酶催化亚基(G6PC)表达明显上调(P0.01),丙酮酸脱氢酶激酶4(Pdk4)明显下调(P0.05)。结论:活血潜阳方可改善血瘀阳亢痰浊型SHR大鼠的血压、血脂、胰岛素抵抗的进行性发展,其机制可能与提高胰岛素PI3K信号通路GCK、G6PC的表达及降低Pdk4的表达有关。     

不同中医治法对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥大的比较研究

目的观察不同中医治法对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥大的干预作用。方法以异丙肾上腺素20 mg/kg1、0 mg/kg、5mg/kg递减皮下注射,3 mg/kg维持7 d制备大鼠心肌肥大模型,给予金匮肾气丸、真武汤、补阳还五汤及生脉饮5周,观察大鼠血流动力学指标、心输出量、心脏指数、左心室指数以及血清心房利钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及去甲肾上腺素（NE）含量的变化。结果异丙肾上腺素造模5周后,模型组大鼠血流动力学处于代偿状态,与正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;但心输出量明显降低,血清ANP、BNP含量显著升高,心脏指数及左心室指数增加（P〈0.05）。与模型组比较,补阳还五汤组及金匮肾气丸组能够有效提高心输出量,降低血清ANP、BNP水平,降低心脏指数（P〈0.05）。生脉饮组和真武汤组能够降低血清ANP含量,对于模型大鼠心脏指数及血清BNP含量均无明显作用（P〉0.05）,但是有降低心输出量及心肌收缩功能的作用。结论益气活血法和温补肾阳法能够有效改善异丙肾上腺素致大鼠心肌肥大的血流动力学状况,改善过度激活的神经体液水平。     

益心口服液对化学性缺氧心肌细胞的保护作用

目的：探讨益心口服液对化学性缺氧心肌细胞的保护作用。方法：改良Simpson法培养新生大鼠心肌细胞,随机分为生理盐水对照组、缺氧模型组、复方丹参滴丸组及益心口服液大中小3个剂量组。采用二亚硫酸钠造心肌细胞化学性缺氧,并给予相应的药物干预。检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）和丙酮酸激酶（PK）含量,观察益心口服液对化学性缺氧心肌细胞的影响。结果：与对照组心肌细胞相比,缺氧模型组心肌细胞变大,折光性差,胞核暗淡,细胞LDH和PK含量降低,细胞MDA含量增加,SOD活性降低（P〈0．05）。复方丹参滴丸组细胞PK含量降低,细胞MDA含量增加,SOD活性降低（P〈0．05）。益心口服液各剂量组SOD活性增加,LDH和PK含量增加,而MDA含量降低（P〈0．05）。未见剂量依从性。结论：益心口服液通过抗氧自由基,稳定细胞膜;降低心肌耗氧量,增加氧供需比等来减少缺氧心肌细胞损伤。