攀枝花市学龄前儿童无症状发育性髋关节发育不良的社区筛查及流行病学调查

[目的]调查攀枝花学龄前儿童发育性髋关节发育不良(DDH)的流行病学特征。[方法]在攀枝花市区选择6家幼儿园3～6岁儿童2 362例,其中男1 206例,女1 156例。进行性别、年龄、居住地等统计。根据患儿步态、髋关节外观、Allis、Ortolani征以及影像学检查进行筛査。[结果]在2 362例筛查儿童中(男1 206例、女1 156例),261例儿童符合学龄前儿童DDH表现,为总筛查人数的11.05%,其中女孩232人,占患儿总数的88.89%,男孩29人,占患儿总数11.11%。在阳性患儿性别中,男女之比为1:8,差异有统计学意义(P0.05),患儿的DDH表现均为双侧髋关节。[结论]攀枝花地处海拔1 110 m,学龄前儿童DDH患病率明显高于国内外文献报道。     

人参皂苷Rg1延缓造血干细胞衰老过程中端粒长度和端粒酶活性的变化

目的:探讨端粒长度和端粒酶活性在人参皂苷Rg1延缓造血干细胞(HSC)衰老中的作用.方法:免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+ HSC后分5组:对照组,衰老模型组,Rg1组,Rg1治疗衰老组,Rg1延缓衰老组.衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、流式细胞术细胞周期测定和造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养分析Rg1调控Sca-1+ HSC衰老的生物学作用;Southern blotting与TRAP-PCR SYBR Green法检测端粒长度和端粒酶活性.结果:与衰老模型组相比,Rg1治疗组和Rg1延缓衰老组Sca-1+ HSC的SA-β-Gal染色阳性细胞百分比降低,G1期细胞比例下降,生成CFU-Mix数相对增加,端粒长度缩短明显减少,端粒酶活性增强;Rg1延缓衰老组各检测指标变化均较Rg1治疗组明显.结论:Rg1可能通过激活端粒酶活性和减少端粒长度缩短发挥延缓和治疗Sca-1+ HSC衰老的作用.     

辐射损伤导致造血干/祖细胞衰老的机理研究

目的 探讨辐射损伤导致骨髓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老的可能机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为辐照组和假辐照组,辐照组小鼠经6.5 Gy的X射线全身一次性辐照,假辐照组小鼠处理同辐照组,但不辐照.辐照后24 h免疫磁珠分选法分离并计数两组小鼠的Sca-1+造血干/祖细胞细胞(Sca-1+ HSC/HPC),流式细胞术检测细胞周期,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分率;混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养观察分选细胞增殖分化能力,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测辐照导致细胞的DNA损伤,RT-PCR检测细胞衰老相关基因p16INK4a、p19Arf、p53、p21 Cipl/wafl mRNA的表达;Western blot法检测p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白表达.结果 免疫磁性分析法分离纯度的Sca-1+ HSC/HPC可达94％,辐照后小鼠每支股骨的Sca-1+ HSC/HPC数量急剧下降,细胞出现G1期阻滞;形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显降低;SA-β-Gal染色阳性率显著增高,彗星实验显示细胞拖尾明显延长;p16INK4a、p19Arf、p53、p21cipl/wafl mRNA表达明显增强,p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白的表达水平上调.结论 辐射导致HSC/HPC DNA的损伤和衰老相关生物学改变,p16INK4a-Rb和p19Arf-p53-p21 Cipl/Wafl信号通路可能起一定作用.     

人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞连续移植中对抗细胞衰老的作用研究

目的:探讨人参皂苷Rg₁在造血干/祖细胞(HSC/HPC)连续移植中对抗细胞衰老的作用。方法:免疫磁性分选法分离纯化的雄性供体小鼠Sca-1⁺HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。⁶⁰Coγ射线致死剂量辐射雌性受体鼠后分4组:对照组、衰老模型组、Rg₁治疗衰老组、Rg₁延缓衰老组。荧光定量PCR检测受体鼠骨髓细胞Y染色体(Sry基因)表达,确定受体鼠重建造血细胞来源;观察受体鼠存活时间及外周血血象指标的恢复,确定受体鼠造血功能重建情况及Rg₁促进造血恢复情况;造血祖细胞混合性集落(CFU-Mix)培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分析Sca-1⁺HSC/HPC衰老的生物学特点及Rg₁体内调控Sca-1⁺HSC/HPC衰老的作用。结果:雌性受体鼠重建造血细胞来源于雄性供体鼠;连续移植后受体鼠30 d存活率明显降低,外周血象恢复延缓,Sca-1⁺HSC/HPC出现细胞衰老特征:G₀/G₁期细胞比例及SA-β-Gal染色阳性率增高,CFU-Mix数量下降。与同代衰老模型组相比,Rg₁治疗衰老组及Rg₁延缓衰老组受体鼠30 d存活率,WBC,HCT,PLT增高,Sca-1HSC/HPC G₀/G₁期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性率下降,CFU-Mix数量升高。Rg₁延缓衰老组变化较Rg₁治疗衰老组明显。结论:人参皂苷Rg₁在HSC/HPC连续移植过程中具有延缓和治疗Sca-1⁺HSC/HPC衰老的作用。Rg₁延缓衰老作用优于Rg₁治疗衰老作用。     

人参皂苷Rg1诱导人白血病K562细胞复制性衰老的机制

目的 探讨人参皂苷Rg1(Rg1)诱导人白血病K562细胞复制性衰老特征性变化.方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选Rg1对K562细胞增殖抑制的最佳浓度及时间,以此浓度和作用时间诱导K562细胞衰老.流式细胞术检测Rg1对细胞增殖周期的影响;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测阳性细胞百分率;Southern blotting检测端粒长度;Western blotting检测复制性衰老信号通路相关P21、P53与Rb蛋白表达;透射电镜观察人白血病K562细胞衰老超微形态学改变.结果 Rg1在体外能明显抑制K562细胞增殖,其最佳作用浓度为20 μmol/L,时间为48h;诱导后的K562细胞阻滞于G2/M期;SA-β-Gal染色阳性细胞百分率增加(P<0.05);复制性衰老通路相关蛋白P21、P53和Rb表达上调(P<0.05);端粒长度缩短加速(P<0.05);经诱导细胞呈现胞体增大,溶酶体体积增大、数目增多,线粒体体积增大等衰老形态学变化.结论 Rg1可能经由p53-p21-Rb信号通路诱导K562细胞呈现复制性衰老特征.     

理疗与玻璃酸钠对早期膝OA疼痛缓解的对比性研究

目的：比较膝局部理疗与关节腔内注射玻璃酸钠治疗早期OA患者的效果。方法将120例膝骨关节炎患者随机平均分为理疗组60例（局部电针灸配合中药熏蒸、干扰电），玻璃酸钠组60例（关节腔注射20 mg，每周1次，5周1疗程）。临床评估包括静息痛与负重活动时疼痛2个方面，分别在第4周，第3、12个月进行评测。结果2组在第4周时，膝关节疼痛缓解差异无统计学意义。然而，在第3个月开始玻璃酸钠组对疼痛的缓解优于理疗组（P<0.05）。第12个月后，2组疼痛缓解差异无统计学意义，玻璃酸钠组治疗效果更为持久。结论早期OA患者关节注射透明质酸和局部理疗均能在第4周明显缓解疼痛；第3个月缓解疼痛效果最为明显，且2组之间比较玻璃酸钠组对膝关节疼痛缓解优于理疗组。12个月后2组疼痛缓解基本失效，在对疼痛缓解的持久性上，膝关节内注射玻璃酸钠具有长期有益效果。     

人参皂苷Rg1在造血干/祖细胞连续移植中抗细胞衰老的作用机制

目的 探讨人参皂苷Rg₁在造血干/祖细胞（HSC/HPC）连续移植中抗细胞衰老的作用机制。方法 免疫磁性分选法分离纯化的雄性供体小鼠Sca-1⁺HSC/HPC连续移植3代构建HSC/HPC衰老体内模型。经⁶⁰Co γ射线致死剂量辐射的雌性受体小鼠分成4组：对照组、模型组、人参皂苷Rg₁（20 mg/kg）治疗给药组、人参皂苷Rg₁（20 mg/kg）预防给药组,每天给药1次,连续给药30 d。荧光定量PCR法检测各组小鼠Sca-1⁺HSC/HPC p16^INK4a、p19^Arf、p53、p21^Cip1/Waf1基因的表达,Western blotting法检测p16^INK4a、p21^Cip1/Waf1、CDK4、CDK2、CyclinD1、Cyclin E蛋白的表达。结果 与模型组比较,各代移植Sca-1⁺HSC/HPC雌性小鼠中,人参皂苷Rg₁治疗给药组及预防给药组小鼠Sca-1⁺HSC/HPC p16^INK4a、p19^Arf、p53、p21^Cip1/Waf1基因及p16^INK4a、p21^Cip1/Waf1、CyclinD1蛋白表达下调;CDK4、CDK2、CyclinE蛋白表达上调。人参皂苷Rg₁预防给药组小鼠各项检测指标的改善均优于其治疗给药组。结论 人参皂苷Rg₁可能通过调控p16^INK4a-Rb和p19^Arf-p53-p21^Cip1/Waf1信号转导通路,对Sca-1⁺HSC/HPC连续移植衰老模型发挥拮抗作用。     

三丁基过氧化氢通过调控细胞周期诱导Sca-1+造血干/祖细胞衰老

目的 探讨三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导Sca-1+造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老的细胞周期调控机制。方法免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+ HSC/HPC后分为对照组（常规培养细胞）,衰老模型组（用t-BHP复制细胞体外衰老模型）。通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞周期测定和造血祖细...