血浆同型半胱氨酸和叶酸及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产

【目的】 探讨孕妇血浆同型半胱氨酸水平（Ｈｃｙ）、叶酸水平及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产的相关性。【方法】 采用病例对照研究,选取４４０例分娩孕妇为研究对象,其中早产临产孕妇（ｃａｓｅ ｇｒｏｕｐ）、同孕周健康孕妇（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）各２２０例。用高效液相色谱荧光检测法（ＨＰＬＣ－ＦＤ）检测两组孕妇血浆同型半胱氨酸水平和叶酸水平差异;１４Ｃ 放射法测定两组孕妇ＭＴＨＦＲ的活性;Ｔａｑｍａｎ－ＭＧＢ技术检测两组孕妇ＭＴＨＦＲ基因的５个ＳＮＰ分型差异。【结果】 早产临产孕妇的血浆Ｈｃｙ 水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显高于同孕周健康孕妇的血浆Ｈｃｙ水平 （７．５６ ± ２．９７ ｖｓ． ５．９６ ± ２．５４, Ｐ ＝ ０．０１５）,而早产临产孕妇的血浆叶酸水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显低于同孕周健康孕妇血浆叶酸水平（１６．２１ ± ２．９１ ｖｓ． １８．５３ ± ３．４４, Ｐ ＝ ０．００２）。早产临产孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（ｎｍｏｌ·ｍｇ－１·ｈ－１）明显低于同孕周健康孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（１３．３３ ± ３．１６ ｖｓ． ２６．８６ ± ５．６３, Ｐ ＝ ０．０００）。在ＭＴＨＦＲ基因中ｒｓ１８０１１３１和ｒｓ１８０１１３３在早产临产孕妇组与同孕周健康孕妇组的基因型分布差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 早产儿孕妇血浆同型半胱氨酸水平受叶酸水平影响,并与ＭＴＨＦＲ基因ＳＮＰ分型密切相关。     

ＥＮＨ 蛋白与病理性疼痛相关性研究

摘 要： 【目的】 观察ＥＮＨ（Ｅｎｉｇｍａ Ｈｏｍｏｌｏｇ）蛋白在大鼠坐骨神经选择性损伤（ＳＮＩ）疼痛模型引起的病理性疼痛中的表达,并探索其与疼痛的相关性及可能机制。【方法】取１５只雄性ＳＤ大鼠,分为３组（每组５ 只）,分为ＳＮＩ组,麻醉治疗组和假手术对照组。另取３０只雄性ＳＤ大鼠,分为６组（每组５ 只）,按时间点分为非手术组对照组和实施ＳＮＩ手术的１、４、７、１０、１４ｄ组。通过检测大鼠５０％机械刺激撤足阈值,观察ＳＮＩ,ＳＮＩ＋利多卡因和罗哌卡因复合制剂及假手术组在４、７、１０ ｄ大鼠痛敏的改变以及ＳＮＩ手术组大鼠在１、４、７、１０、１４ｄ的痛敏变化。免疫荧光组织化学染色方法观察各组术后１０ ｄ相应脊髓节段内ＥＮＨ蛋白的表达。蛋白质印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ） 检测相应各实验组及时间点脊髓节段裂解液内ＥＮＨ蛋白的表达量。【结果】与假手术组相比,ＳＮＩ术后１０ ｄ大鼠手术侧痛敏明显增高（ｎ ＝ ５／组,Ｐ ＜ ０．０１）,而ＳＮＩ ＋ 麻醉药组大鼠痛敏则与假手术组接近。免疫荧光染色与蛋白质印迹法显示ＳＮＩ术后１０ｄ,脊髓Ｌ４－６节段手术侧背角内ＥＮＨ表达明显高于假手术组（ｎ ＝ ５／组,Ｐ ＜ ０．０１）;ＳＮＩ ＋麻醉药组的ＥＮＨ蛋白表达则与假手术组接近。ＥＮＨ与正常对照组相比,ＳＮＩ组术后手术侧痛敏、ＥＮＨ蛋白及ｍＲＮＡ有一过性增高继而恢复正常,并随时间推移而逐渐再次增高（ｎ＝ ５／组）。【结论】 ＥＮＨ蛋白在大鼠慢性病理性疼痛模型中有表达,且其改变与痛敏的进程一致。这些结果为ＥＮＨ可能作为一种新的疼痛分子标志物奠定了理论基础。     

ＣＤ４５单抗介导的淋巴瘤荷瘤裸鼠三步法预定位放免显像

摘 要： 【目的】 评价生物素化ＣＤ４５单抗介导的９９ｍＴｃ－生物素在人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠模型中三步法预定位放免显像的价值。【方法】 ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记采用直接标记法。取人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠１８只,随机分为２组,每组９只。实验组为三步法预定位放免显像组,静注生物素化ＣＤ４５单抗１００ μｇ,４８ ｈ后静注亲和素２００ μｇ,再过４８ ｈ静注９９ｍＴｃ－生物素７．４ ＭＢｑ（２０ μｇ）;对照组为９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗放免显像组,静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗１００ μｇ。上述两组裸鼠分别于注药后３、６、１２ ｈ分别进行ＳＰＥＣＴ显像,每个时间点各取３只裸鼠断颈处死后,取脏器组织及肿瘤,称重后在γ计数仪中测量放射性计数,经放射性衰变校正后计算各脏器的％ＩＤ／ｇ及肿瘤／非肿瘤（Ｔ／ＮＴ）比值。【结果】平均每分子ＣＤ４５单抗约结合１２分子生物素,ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记率分别＞７０％和＞８０％。三步法给药后荷瘤裸鼠ＳＰＥＣＴ显像及生物分布示：整个显像期间血池内放射性均较低,肝脾见较多放射性浓聚;注射标记物后３－６ｈ,肿瘤显影清晰,并持续到１２ ｈ;注药后３、６和１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ分别为１．７３ ± ０．２２、１．２４ ± ０．０３和０．９４ ± ０．０７;肿瘤／血液比值分别为３．５、４．９和７．８;肿瘤／肌肉比值分别为８．２、８．９和１０．４。而静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗后则可见肝脾及肾脏明显放射性聚集,１２ｈ血池内见较多放射性分布,肿瘤部位见有少量放射性集聚,１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ为０．８９ ± ０．１３,肿瘤／血液及肿瘤／肌肉的比值分别为１．６和２．５。【结论】与９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗相比较,９９ｍＴｃ－生物素三步法预定位放免显像明显改善肿瘤Ｔ／ＮＴ比值,标记物注射后３ ｈ即可使肿瘤显影。     

纳米ＴｉＯ２：Ｃ涂层对口腔常见细菌的抗菌效果观察

摘要：【目的】考察纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的抗菌性能,为其在种植体周围炎防治中的应用奠定实验基础。【方法】制备ＴｉＯ２及ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层,根据贴膜法,每个样品做３个平行样,每个样品重复３次实验,检测其对不同口腔常见细菌的抗菌效果;通过Ｘ射线能谱仪检测牙龈卟啉单胞菌胞膜的离子种类并计算离子含量,从而分析探讨纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的抗菌机理。【结果】本研究合成的纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层厚度均匀,对口腔常见细菌２０ｍｉｎ可见光催化抗菌率均达到９０％以上,具有良好的抗菌效果。Ｘ射线能谱显示牙龈卟啉单胞菌Ｎａ离子、Ｃａ离子含量随着光催化时间的延长而降低,而Ｐ元素变化趋势无规律。【结论】纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层对口腔细菌有很强的抗菌效果,改善了基体材料的抗菌性能。纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的可见光催化抗菌机理之一可能为改变细胞膜的结构,影响细胞膜的通透性。     

外源性硫化氢通过抗氧化应激逆转过氧化氢诱导的 人脐静脉内皮细胞衰老

摘 要： 【目的】探讨硫化氢（Ｈ２Ｓ）对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导的人脐静脉内皮细胞衰老的影响及其抗氧化机制。【方法】建立Ｈ２Ｏ２诱导的人脐静脉内皮细胞衰老模型,采用不同浓度的硫氢化钠（ＮａＨＳ）预处理内皮细胞,观察其对衰老的作用。【结果】与对照组相比,６０ μｍｏｌ／Ｌ Ｈ２Ｏ２预处理后,能显著提高细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和血浆纤溶酶原激活物抑制剂－１（ＰＡＩ－１）的表达,同时增加丙二醛（ＭＤＡ）含量,但减少过氧化物歧化酶１（ＳＯＤ１）的表达。而ＮａＨＳ的预处理可以显著减少细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和ＰＡＩ－１的表达,减少ＭＤＡ的含量,增加ＳＯＤ１的表达。【结论】ＮａＨＳ可以逆转Ｈ２Ｏ２诱导的内皮细胞衰老,其机制与抗氧化应激有关。     

无痛胃镜下食管静脉曲张套扎术的安全性分析

【目的】 比较常规胃镜与无痛胃镜下食管静脉曲张套扎术的安全性。 【方法】 研究纳入２０４例接受食管静脉曲张套扎术的肝硬化患者,其中无痛胃镜组１３５人,常规胃镜组６９人;分别观察两组术前、术中及术后的心率、血压、血氧饱和度变化,以及术中不良反应以及完成手术所用的时间;同时评估手术者对术中内镜视野及操作的满意度。【结果】 无痛胃镜组患者术中与术后的心率、血压、血氧饱和度分别与术前比较无统计学差异;同时分别与常规胃镜治疗组比较,术中心率、血压、血氧饱和度与术前比较也无统计学差异。无痛内镜组的术中不良反应（５．９％）显著低于常规内镜组（２６．１％,Ｐ ＜ ０．０１）。内镜操作时视野评估显示无痛胃镜组的满意度明显高于常规胃镜组（Ｐ ＜ ０．０１）。无痛胃镜组的手术时间为（２８．３ ± ８．６ ）ｍｉｎ,显著低于常规胃镜治疗组的（４１．５ ± １１．８） ｍｉｎ （Ｐ ＜ ０．０１）。【结论】 无痛胃镜下食管静脉套扎术是安全的,不良反应低,术中视野清晰便于操作,易于患者接受。     

胚胎培养液氨基酸浓度与体外受精－胚胎移植妊娠结局的关系

【目的】 探讨体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）过程中胚胎培养液氨基酸浓度与胚胎移植后妊娠结局的关系。【方法】 对３０例接受ＩＶＦ－ＥＴ治疗且于受精后第５天行胚胎移植的患者,于胚胎移植当日收集使用过的胚胎培养液,高效液相色谱法测定培养液中２０种游离氨基酸的浓度,分析其与ＩＶＦ－ＥＴ后妊娠结局的关系。【结果】 （１）妊娠组、未妊娠组囊胚培养液谷氨酰胺浓度的中位数分别为６０．８和８４．７ μｍｏｌ／Ｌ,丙氨酸浓度的中位数分别为６１．９和９２．３ μｍｏｌ／Ｌ,两组比较,差异均有统计学意义（Ｐ分别为０．０２９和０．０２３）。（２）多因素回归分析在校正受精后第３天（Ｄ３）细胞数、Ｄ３胚胎分级和受精后第５天（Ｄ５）胚胎分级的影响后,囊胚培养液中谷氨酰胺和丙氨酸的浓度仍然与妊娠呈负相关（优势比［ＯＲ］分别为０．９９和０．９８,Ｐ分别为０．０２４和０．０１９）。【结论】 囊胚培养液中谷氨酰胺和丙氨酸的浓度与ＩＶＦ－ＥＴ后能否妊娠有关,囊胚培养液中谷氨酰胺和丙氨酸的浓度可能与胚胎活力有关。     

短程地塞米松不能提高乙型肝炎慢加急性肝衰竭生存率

摘要：【目的】评估小剂量地塞米松治疗早期慢加急性乙肝肝衰竭患者的疗效及安全性。【方法】选取２００９年１月至２０１２年１２月１３８例慢加急性乙肝肝衰竭患者,所有患者均接受内科标准治疗（ＳＭＴ）,其中３５例患者在标准内科综合治疗基础上,通过外周静脉每天推注１０ｍｇ地塞米松,共３ｄ（ＤＭＴ组）,按照基线匹配原则选取３５例为对照组（ＳＭＴ组）,随访１２周。观察患者生存情况以及治疗不同时间点肝功能、并发症发生率情况。【结果】ＳＭＴ组及ＤＭＴ组１２周累计生存率分别为４５．７％（１６／３５）、５４．３％（１９／３５）,Ｐ＝０．６５４。２组患者入组后１、２、４、８、１２周各时间点两组患者之间谷丙转氨酶、白蛋白、总胆红素、凝血酶原时间国际标准化比值、ＭＥＬＤ评分差别无统计学意义。两组患者感染、上消化道出血、肝性脑病、肝肾综合症、电解质紊乱以及腹水６种并发症的发生率无统计学差异。４０岁以上,ＭＥＬＤ积分２８以上以及肝性脑病是患者死亡的独立危险因素。【结论】小剂量地塞米松治疗早期慢加急性乙肝肝衰竭不能改善肝功能,提高患者生存率。年龄、ＭＥＬＤ评分、肝性脑病是评估预后的独立危险因子。     

中国南方人群遗传性痉挛性截瘫ＳＬＣ３３Ａ１基因的突变检测

【目的】 ＳＬＣ３３Ａ１基因已被报道是我国北方一个ＨＳＰ家系的致病基因,但研究未发现在欧洲的ＨＳＰ患者中有该基因的突变。本研究的目的是检测ＳＬＣ３３Ａ１是否为中国南方人群中遗传性痉挛性截瘫患者的致病性基因之一。【方法】 对收集到的７０例中国南方散发遗传性痉挛性截瘫的患者,提取基因组ＤＮＡ,并进行ＳＬＣ３３Ａ１基因所有编码外显子及外显子－内含子交界区域的直接测序;鉴定所发现的遗传变异,并同我们所收集到的５７例无血缘关系的正常人进行比对,以及生物信息学分析。【结果】我们只发现 ＳＬＣ３３Ａ１基因区域的８个已存在于数据库中的单核苷酸多态性,未发现任何致病性突变。【结论】 与国外学者的报道相符合,我们的７０例中国南方ＨＳＰ病人中没有ＳＬＣ３３Ａ１所导致的病人,故 ＳＬＣ３３Ａ１对ＨＳＰ的致病性需要进一步的核实、研究。     

胆管灌注对兔肝射频消融术中胆道热损伤的保护作用

摘 要： 【目的】探讨活体兔肝于射频消融（ＲＦＡ）术中行顺行性胆管内冷盐水灌注冷却（ＩＣＳＰ）及逆行性ＩＣＳＰ对主胆管免受热损伤的保护作用差异性。【方法】 健康雄性新西兰大白兔２０只随机分为２组（每组１０ 只）。顺行组动物于ＲＦＡ术前开腹行外周胆管置管,并于ＲＦＡ术中经外周胆管置管行ＩＣＳＰ。逆行组动物于ＲＦＡ术前开腹行胆总管置管,并于ＲＦＡ术中经胆总管置管行ＩＣＳＰ。ＲＦＡ术中射频针尖定位于距肝门部主胆管约０．５ｃｍ处。ＲＦＡ术后１０周对实验兔行Ｘ线胆管造影观察胆道系统改变情况,并取兔肝脏大体标本对主胆管行病理分析,比较顺行组与逆行组间主胆管损伤程度的差异性。 【结果】ＲＦＡ术后１０周胆道造影示逆行组胆道狭窄或扩张、胆汁瘘发生率高于顺行组（Ｐ ＜ ０．０５）,病理检查示逆行组主胆管损伤程度较为严重（Ｐ ＜ ０．０１）。 【结论】相比于传统方式行逆行性ＩＣＳＰ,于ＲＦＡ术中行顺行性ＩＣＳＰ对主胆管能起到更稳定的冷却保护作用。