高糖、胰岛素影响肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达的研究

目的:探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达的影响,进一步研究GluT4在糖尿病肾病发病中的作用。方法:将培养的鼠1097系膜细胞分为8组:正常对照组,生理浓度胰岛素组(10-9M),低浓度胰岛素组(10-8M),高浓度胰岛素组(10-6M),高糖组(30mM),甘露醇组,高糖加高浓度胰岛素组,高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT-PCR法检测GluT4 mRNA含量。结果:①正常系膜细胞可检测到GluT4mRNA。②高糖组GluT4 mRNA表达为对照组的58.7%(p<0.05);10-8M胰岛素组、10-6M胰岛素组分别为对照组的230.2%和297.2%(P<0.01);高糖加10-6M胰岛素组,高糖加10-9M胰岛素组分别为高糖组的170.6%和140.3%(p<0.05)。结论:①正常系膜细胞有GluT4 mRNA表达。②高糖可抑制GluT4 mRNA表达,胰岛素有一定拮抗作用,且呈剂量依赖性。③GluT4是糖尿病肾病发生发展中的重要因子。     

血管内皮生长因子及其受体Flk-1在糖尿病大鼠肾脏的表达及厄贝沙坦的干预

背景:已有实验提示,血管内皮生长因子及其受体系统可能参与糖尿病肾病的发生发展.目的:实验进一步验证血管内皮生长因子及其受体Flk-1在糖尿病鼠肾脏中的表达变化及厄贝沙坦对其影响和可能的机制.设计:随机对照动物实验.单位:四川大学华西医院.材料:雄性封闭群SD大鼠18只,体质量150-200 g,标准化饲养.方法:实验于2006-08/2007-04在四川大学华西医院实验室完成.建立糖尿病肾病大鼠模型,分为糖尿病肾病组、厄贝沙坦干预组和正常对照组,每组6只大鼠.采用10 g/L链脲霉素按55 mg/kg体质量一次性腹腔内注射诱导造模,对照组给予相同剂量的枸橼酸缓冲液,干预组在成模后按3 mg/(kg·d)给予厄贝沙坦.采用反转录聚合酶链式反应技术以及免疫组织化学技术检测血管内皮生长因子和Flk-1的表达,检测尿蛋白、肾小球面积和体积,并分析数据相关性.主要观察指标:①肾脏病理以及尿蛋白、肾小球面积和体积.②肾脏血管内皮生长因子与Flk-l mRNA表达.③肾脏免疫组织化学检查.④相关分析.结果:①肾脏苏木精-伊红染色病理榆查显示糖尿病肾病组出现明显.肾小球增大,系膜基质增多,系膜细胞增多,小管扩张,干预组病变轻于糖尿病肾病组.精尿病肾病组尿蛋白显著高于对照组(P＜0.01);糖尿病肾病组肾重/体质量、肾小球面积和体积明显高于对照组(P＜0.01),干预组蛋白尿、肾重/体质量、肾小球面积和体积均低于糖尿病肾病组(P＜0.01).②糖尿病肾病组16周时肾脏血管内皮生长因子与Flk-1 mRNA表达均明显上调,显著高于对照组(P＜0.05);干预组16周时肾脏血管内皮生长因子与Flk-1 mRNA表达也有上调,高于对照组(P＜0.05),但低于糖尿病肾病组(P＜0.05).③糖尿病肾病组血管内皮生长因子着染明显强于对照组(P＜0.01),干预组着染也强于对照组(P＜0.01),但与糖尿病肾病相比较,干预组着染明显减少(P＜0.01).Flk-1着染也有类似变化.④血管内皮生长因子、Flk-1与尿蛋白、肾小球面积和体积呈正相关(P＜0.05).结论:血管内皮生长因子及其受体Flk-1在糖尿病肾病发病机制中起重要作用,过度表达导致肾脏损伤,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦具有通过抑制血管内皮生长因子和Flk-1异常表达这一非血流动力学的肾脏保护作用.     

肾病综合征并发双肾静脉血栓形成一例

患者女,29岁.1个月前,患者感左侧腰部胀痛,外院彩超发现盆腔积液,抗感染治疗好转;3周前无明显原因出现右侧腰部胀痛,伴双下肢水肿,外院查血常规、肾功能正常,尿蛋白+,彩超示双肾增大,左肾轻度积水,左肾输尿管上段扩张,经保肾降脂等治疗病情无缓解;2d前出现无尿,伴恶心、呕吐、腹泻;1h前,腰痛加剧,伴血尿2次,共约150 ml,入本院.     

N-糖链抑制剂对高糖刺激鼠肾系膜细胞粘着斑激酶表达及透明质酸分泌的影响

目的：观察N-糖链抑制剂衣霉素(TM)和1-deoxymannojirimycin(DMM)对高糖刺激肾小球系膜细胞(GMC)增生、粘着斑激酶(FAK)表达及透明质酸(HA)分泌的影响。方法：体外培养大鼠GMC，分为七组：正常组，高糖组，甘露醇组，高糖加衣霉素组，高糖加DMM组，并设TM、DMM对照组。采用四唑盐比色(MTT)法测定细胞增生，免疫组织化学方法测定粘着斑激酶(FAK)，放射免疫法测定透明质酸(HA)含量。结果：高糖可诱导GMC增生、增加FAK表达及HA分泌。相对于正常培养条件下生长的GMC，N-糖链抑制剂TM和DMM对高糖作用条件下的GMC增生、FAK活性及HA分泌有更为明显的抑制作用。结论：N-糖链抑制剂TM和DMM可通过阻断糖链的合成和改变糖链类型抑制高糖诱导的细胞增生、FAK活性及HA分泌的作用。     

血管内皮生长因子及其受体Hlk-1在糖尿病大鼠肾脏的表达及厄贝沙坦的干预

背景：已有实验提示，血管内皮生长因子及其受体系统可能参与糖尿病肾病的发生发展。目的：实验进一步验证血管内皮生长因子及其受体Flk-1在糖尿病鼠肾脏中的表达变化及厄贝沙坦对其影响和可能的机制。设计：随机对照动物实验。单位：四川大学华西医院。材料：雄性封闭群SD大鼠18只，体质量150-200g，标准化饲养。方法：实验于2006-08／2007-04在四川大学华西医院实验室完成。建立糖尿病肾病大鼠模型，分为糖尿病肾病组、厄贝沙坦干预组和正常对照组，每组6只大鼠。采用10g／L链脲霉素按55mg／kg体质量一次性腹腔内注射诱导造模，对照组给予相同剂量的枸橼酸缓冲液，干预组在成模后按3mg／（kg·d）给予厄贝沙坦。采用反转录聚合酶链式反应技术以及免疫组织化学技术检测血管内皮生长因子和Flk-1的表达，检测尿蛋白、肾小球面积和体积，并分析数据相关性。主要观察指标：①肾脏病理以及尿蛋白、肾小球面积和体积。②肾脏血管内皮生长因子与Flk-1 mRNA表达。③肾脏免疫组织化学检查。④相关分析。结果：①肾脏苏木精-伊红染色病理检查显示糖尿病肾病组出现明显肾小球增大，系膜基质增多，系膜细胞增多，小管扩张，干预组病变轻于糖尿病肾病组。糖尿病肾病组尿蛋白显著高于对照组（P〈0．01）；糖尿病肾病组肾重，体质量、肾小球面积和体积明显高于对照组（P〈0．01），干预组蛋白尿、肾重，体质量、肾小球面积和体积均低于糖尿病肾病组（P〈0．01）。②糖尿病肾病组16周时肾脏血管内皮生长因子与Flk-1 mRNA表达均明显上调，显著高于对照组（P〈0．05）；干预组16周时肾脏血管内皮生长因子与Flk-1 mRNA表达也有上调，高于对照组（P〈0．05），但低于糖尿病肾病组（P〈0．05）。③糖尿病肾病组血管内皮生长因子着染?     

连续性静脉-静脉血液滤过中低磷血症的防治初探

目的对危重患者应用连续性静脉静脉血液滤过(CVVH)治疗过程中低磷血症的防治进行初步分析与探讨。方法选择危重患者30例,按急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ评分)不同分为2组(<15分13例为A组,≥15分17例为B组)。两组均行CVVH治疗,置换液速度A组2 000 ml/h、B组4 000 ml/h,持续时间8~12 h/d;补充甘油磷酸钠A组10~20 ml/d,B组为30~40 ml/d;治疗前、24小时、48小时、72小时检测血清磷的浓度、进行APACHEⅡ评分,并作血磷与APACHEⅡ评分的相关分析,计算磷清除率。结果B组磷清除率大于A组[(42.76±2.39)ml/min vs(23.84±3.05)ml/min,P<0.05];治疗前B组血磷浓度低于A组[(0.78±0.19)mmol/L vs(1.25±0.27)mmol/L,P<0.05];第24小时两组血磷浓度均开始下降,补磷后第48小时A组血磷浓度正常,B组为轻度低磷血症,经调整补磷剂量后,第72小时恢复正常;CVVH治疗后两组患者APACHEⅡ评分均有降低的趋势;血磷与APACHEⅡ评分的相关分析提示两者呈负相关。结论危重患者易发生低磷血症,且与病情危重程度相关,采用CVVH治疗更易加重低磷血症,补磷应做到个体化,且不必拘泥于常规剂量限制,同时通过密切监测血磷变化来调整。     

不同抗凝技术在连续性静脉-静脉血液滤过中的应用评价

目的 对连续性静脉-静脉血液滤过治疗过程中不同抗凝技术进行评价。方法 选择危重患者48例行连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH）治疗，其中出血倾向12例，设为A组，采用局部枸橼酸钠抗凝法；活动性出血者17例，设为B组，采用无肝素抗凝技术；其余患者19例。设为C组，采用低分子肝素钙抗凝。3组置换液速度均为3000ml／h，持续时间12h／d，碳酸氢盐置换液前稀释方式输入。计算溶质下降率，治疗前后检测电解质、酸碱指标、凝血指标；记录心率、平均动脉压、跨膜压及滤器寿命。结果 3组治疗后血尿素氮、肌酐均显著下降，但组间比较溶质下降率差异无显著性（P〉0．05）；电解质、酸碱指标在治疗后均趋于稳定。A、B组各凝血指标在治疗后无显著改变，C组部分凝血活酶时间显著延长（P〈0．05）。整个治疗过程中，3组患者心率、平均动脉压均较稳定。跨膜压明显升高的时间点：A组〉C组〉B组。滤器平均寿命：A组〉C组〉B组（P〈0.05）。结论 CVVH中3种抗凝技术各有优缺点，只有个体化地选择抗凝技术，才能使CVVH更安全有效地应用于危重患者的治疗。     

P21在肾小球系膜细胞的表达变化及意义

目的:探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂P21表达的影响及其与系膜细胞肥大的关系。方法:将培养的大鼠1097系膜细胞株分为8组:正常对照组,高糖组,甘露醇组,不同浓度胰岛素组,高糖加不同浓度胰岛素组。用RT-PCR法检测各组系膜细胞P21mRNA表达。流式细胞仪定量检测各组系膜细胞前向角度散射光(FSC)大小。结果:正常对照组系膜细胞中P21mRNA有一定表达。高糖组P21mRNA表达明显增加为正常对照组的3.89倍(P<0.01);FSC为正常对照组的1.42倍(P<0.01)。不同浓度胰岛素组系膜细胞P21mRNA表达及FSC大小随胰岛素浓度增加而增加,但无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)P21mRNA在正常肾小球系膜细胞有一定表达。(2)高糖刺激可使系膜细胞P21mRNA表达上调,且与渗透压无明显关系。(3)P21mRNA表达上调可导致系膜细胞肥大,在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。     

介入栓塞治疗肾活检术后假性动脉瘤严重出血1例

出血是肾活检术后常见并发症之一,特别严重的出血甚至需要外科手术来解决。运用血管造影明确出血部位及进一步使用超选择性介入栓塞治疗在国内鲜有报道。这类报道多是由肾穿术后肾动静脉瘘所引起,而本文报告我院肾穿术后第三天出现的由于假性动脉瘤致严重出血及使用介入方法成功救治患者一例。1临床资料患者女,34岁。因反复血尿1个月,于2005-04-04入院。1个月前血尿最初为终末期肉眼血尿,鲜红色不伴血凝块,伴尿频、尿急、尿痛,无牵涉痛,当地诊为“尿路感染”,予左氧氟沙星治疗,尿路刺激症状缓解,但血尿呈全程无痛性洗肉水样,伴双侧腰部胀痛,…     

FAK家族的新成员PYK2

PYK2是FAK家族的成员之一 ,是一种钙依赖性酪氨酸激酶 ,在氨基酸序列上与FAK有 4 5 %的同源性。它的活化涉及了多条信号传导通路 ,与离子通道的调节、细胞骨架的联系及细胞增殖、凋亡密切相关。血管紧张素Ⅱ、一氧化氮可调节PYK2的活性。