单因素和正交设计法优化苦参素空间稳定脂质体处方

目的:优化苦参素空间稳定脂质体的处方。方法:以高纯蛋黄卵磷脂PC-98T、胆固醇和PEG2000-DSPE为载体,采用乙醇注入法制备苦参素空间稳定脂质体。以包封率为评价指标,采用单因素考察法和正交设计法对其处方进行优化。结果:最优处方是磷脂与胆固醇的质量比(5:1),磷脂与药物质量比为(4:1),磷脂与PEG2000-DSPE质量比为(12:1),包封率大于80%。结论:该法制得的脂质体包封率符合中国药典要求(≥80%),平均粒径较小,说明该处方优化成功,制备工艺简单、可行,适宜工业化生产。     

高效液相色谱-蒸发光散射法检测酶促催化反应中底物D-半乳糖

目的：建立酶促催化反应中底物D-半乳糖的测定方法。方法：采用高效液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD法）测定酶促催化反应中底物D-半乳糖的含量,色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18（2）柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水,流速为1.0ml·min-1,柱温为35℃,检测器为SEDEX-75型蒸发光散射检测器（漂移管温度为45℃,载气压力为3.0bar）。结果：D-半乳糖在0.5~10.0mg·ml-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9995）,平均回收率分别为100.3%,RSD为1.6%。结论：该方法准确、重复性好,适用于酶促催化反应中底物D-半乳糖的测定。     

高效液相色谱法检测酶促反应中底物胆固醇

目的：建立酶促反应中底物胆固醇的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法：HPLC检测胆固醇含量的最佳色谱条件：Dia－monsil C18（250mm×4.6mm,5μm）为固定相,甲醇∶环己烷（90∶10）为流动相,检测波长为215nm,流速为1.0μl·min^-1,柱温为35℃。结果：胆固醇峰呈尖峰,分离较好,理论塔板数为12545;在0.5～10mg·L^-1范围内线性关系良好（A=19.136C-1.2707,r=0.9990）;平均加样回收率为104%,RSD为1.5%（n=6）。结论：该方法专属性强,重复性良好,适合初步用于酶促反应体系中底物胆固醇的含量测定,以胆固醇减少量反映转化率。     

有机相脂肪酶催化合成脂质体修饰物胆固醇癸二酸单烯酯

目的 在非水相中利用酶法合成胆固醇癸二酸单烯酯,并对其最优合成工艺条件进行研究。方法 利用TLC、MS和NMR法对合成产物进行结构鉴定;通过正交试验对合成处方工艺进行优化。结果 最佳反应条件为胆固醇与癸二酸二乙烯酯物质的量之比为1∶6,Candida rugosa Lipase 10 mg/mL,异辛烷5 mL,温度35 ℃,反应时间24 h。结论 该条件下酯化率可达95%以上。     

苦参素空间稳定脂质体的包封率测定和体外释放度考察

目的:测定苦参素空间稳定脂质体(Kushenin-SSL)的包封率,并考察其体外释放规律。方法:采用乙醇注入法制备Kushenin-SSL,用葡聚糖凝胶G-50柱分离Kushenin-SSL和游离苦参素,HPLC测定包封率。按《中国药典》2010年版溶出度第2法考察Kushenin-SSL的体外释放规律。结果:Kushenin-SSL平均包封率83.57%,Kushenin-SSL体外释放曲线符合Higuchi方程。结论:Kushenin-SSL的包封率符合《中国药典》要求,其具有良好的体外缓释作用。     

LC-MS/MS定量分析小鼠血浆和组织液中多西他赛的含量

目的:建立小鼠血浆和组织样品中多西他赛的含量测定方法。方法:选择紫杉醇为内标物,进样前用甲基叔丁基醚萃取,Hypersil BDS C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.4μm),流动相甲醇-0.1%甲酸(80∶20),柱温40℃,流速0.3 m L·min~(-1),进样量10μL。电喷雾离子源,多反应检测模式进行正离子检测,离子源喷雾电压3.5 kV,加热毛细管温度320℃,鞘气压力35 Pa,辅助气压力10 Pa,碰撞能量30 V,碰撞诱导解离电压12 V,多西他赛检测离子对m/z 876.3~549.1,紫杉醇检测离子对m/z 830.3~307.9。结果:多西他赛在小鼠血浆中的线性范围0.013~13 mg·L~(-1),在心、肝、脾、肺、肾的线性范围分别为0.012~12.937,0.013~13.068,0.012~13.001,0.013~13.133,0.011~12.965 mg·L~(-1);日内及日间精密度、各条件下稳定性均15%;血浆中低、中、高质量浓度多西他赛的平均回收率分别为98.24%,97.51%,93.70%;在小鼠心、肝、脾、肺、肾各组织的平均回收率在87.87%~98.90%。结论:相较于HPLC,LC-MS/MS更适合检测小鼠血浆及组织液中多西他赛的含量,该方法稳定可行、重复性好。     

去唾液酸糖蛋白受体配体胆固醇-半乳糖苷的酶促合成优化研究

目的在有机相中利用酶促反应合成能被去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)特异性识别的配体胆固醇-半乳糖苷分子,对其合成工艺进行优化。方法采用质谱和核磁碳谱鉴别产物结构;单因素和正交设计法优化酶促合成条件。结果酶促最佳条件为底物胆固醇癸二酸乙烯酯(CH-VS)与乳糖醇(LA)物质的量之比4∶1,脂肪酶Novozym 435 25 mg,反应32 h,产率高达92%。结论该方法高效、反应条件可行、产物专一。     

舒肝止痛丸的质量标准研究

目的：建立舒肝止痛丸质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中的木香进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量。结果：薄层色谱斑点清晰,专属性强,易于识别;黄芩苷在（0.3～1.8）μg呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均加样回收率为100.25%,RSD=1.45%。结论：所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于舒肝止痛丸的质量控制。     

酶法合成Kupffer细胞靶向的半乳糖配体

目的:采用酶催化法在非水相介质中合成半乳糖配体.方法:通过IR,质谱,核磁共振(1H-NMR,1C-NMR)对产物结构进行表征;以底物转化率为指标,采用单因素试验考察酶种类、反应介质、酶加入量、底物摩尔比、反应温度等对配体合成的影响.结果:通过表征分析显示经酶的催化反应,半乳糖C1’位的羟基发生了酯化反应,所得产物为目标产物.优选的反应条件为反应介质四氢呋喃(THF)-二甲基亚砜(DMSO) (3:1),Novozym 435固定化脂肪酶为催化剂,酶加入量600 U· mL-1,半乳糖-硬脂酸乙烯酯的摩尔比1:4,于55℃反应8h,半乳糖的转化率达＞0％.结论:酶促催化法可用于合成肝靶向脂质体配体.