高芥酸菜籽油对大鼠肝组织脂肪酸氧化功能的影响

高芥酸菜籽油(即普通菜籽油)对大鼠等实验动物有多方面的不良作用,其中之一是导致心脏和其它内脏器官的脂肪蓄积。国外一些研究表明,其原因除芥酸碳链较长,不易在动物体内氧化分解外,芥酸对其它脂肪酸(尤其是软脂酸)的氧化还有抑制作     

粮食防霉剂正丁醇动物毒性试验

正丁醇为酒类成份,在工业上主要用作试剂、溶剂。由于其沸点高,蒸气压小一般常温下不致伤害人体,但在高浓度情况下接触本品的工人可以引起红细胞降低,结膜水肿和视力模糊等。车间空气中正丁醇最高容     

藤黄酸对多发性骨髓瘤细胞株NCI-H929增殖和凋亡影响

目的探讨藤黄酸对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其分子学机制,为其临床治疗多发性骨髓瘤提供依据。方法用不同浓度的藤黄酸处理多发性骨髓瘤细胞株NCI-H929细胞,采用MTS法检测藤黄酸对多发性骨髓瘤细胞活性的影响;碘化丙啶单染法于荧光显微镜下观察细胞形态的变化;应用Western blot法检测泛素蛋白酶体系统相关蛋白(泛素-蛋白酶体系统蛋白(Ubs)、B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子α、B细胞淋巴瘤因子相关蛋白(Bax))、凋亡相关蛋白(聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3前体(Pro-caspase3)、髓细胞白血病-1蛋白(Mcl-1)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、B细胞淋巴瘤-白血病-2蛋白(Bcl-2)及信号转导和转录激活因子5(STAT5))表达情况。结果藤黄酸明显抑制NCI-H929细胞的活力,诱导NCI-H929细胞凋亡;随藤黄酸浓度升高,Ubs聚集,Bax表达升高,蛋白酶体系统受到抑制;随藤黄酸浓度升高与作用时间延长,PARP出现切割,凋亡相关蛋白Pro-caspase3、Mcl-1、XIAP、Bcl-2及增殖通路蛋白STAT5表达下调。结论藤黄酸能够抑制多发性骨髓瘤细胞株NCI-H929的蛋白酶体活性,影响凋亡相关蛋白的表达,促进细胞凋亡。其机制可能通过抑制JAKs/STATs信号转导通路的活化,抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖。     

PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究

目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法。方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-I、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术。对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较。结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830)。经χ2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P<0.05)。结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中~高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点。PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型。     

GHRHR-SV1抗体的制备及其蛋白在黑色素瘤细胞中的表达

目的：制备生长激素释放激素受体剪接变异体1（GHRHR-SV1）抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法：设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a（+）中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21（DE3）中,分别加入0、0.5、1.0、1.5和2.0mmol·L^-1异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）;诱导1、2、4和6 h,并在37℃、30℃和25℃不同温度下进行诱导;观察目的蛋白表达的最佳IPTG浓度、时间和温度。亲和层析纯化重组蛋白,将纯化后的蛋白免疫家兔,制备兔多克隆抗体,ELISA法检测该抗体效价,Western blotting法检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞系B16-F10中的表达情况。结果：重组载体pET-GHRHR-SV1构建成功。在IPTG浓度为2.0 mmol·L^-1时目的蛋白的表达量最高;IPTG诱导蛋白表达2 h时,蛋白表达量最大;当温度为25℃时,蛋白的表达量最大。诱导表达的蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后纯度为80%,GHRHR-SV1抗体效价为1：1 600 000,B16-F10细胞中有GHRHR-SV1蛋白表达。结论：成功制备pET-GHRHR-SV1重组载体。GHRHR-SV1蛋白在IPTG浓度为2.0 mmol·L^-1、诱导时间为2 h和温度为25℃的条件下表达最佳。成功制备了高效价的GHRHR-SV1抗体。黑色素瘤细胞系中有GHRHR-SV1蛋白表达。     

阿魏酸乙酯对胃癌 SGC －7901细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨阿魏酸乙酯（EF）对胃癌 SGC －7901细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC －7901细胞,采用不同浓度的 EF 作用 SGC －7901细胞,设置5个复孔,作用24、36、48 h,MTT 法检测细胞的增殖情况;用0和40μg／mL EF 分别作用 SGC －7901细胞24 h,DAPI 染色法观察 SGC －7901细胞形态学变化;另外,采用不同浓度的 EF 作用 SGC －7901细胞24、36和48 h,Annexin V －FITC／PI 法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果40、80、120、160和200μg／mL 浓度的 EF 分别作用 SGC －7901细胞24、36及48 h,其对 SGC －7901细胞的 IC50分别为158.86、142.48和128.07μg／mL;40μg／mL 的 EF 作用 SGC －7901细胞12 h,经 DAPI 染色,SGC －7901细胞的细胞核固缩,出现凋亡小体;经 Annexin V －FITC／PI 法检测,EF 对 SGC －7901细胞的凋亡有明显的诱导作用,并且随着 EF 作用浓度和时间的增加,凋亡率增加。结论EF 能有效抑制 SGC －7901细胞增殖,并能诱导 SGC －7901细胞凋亡,两种作用均呈浓度和时间依赖性。     

和厚朴酚对结肠癌细胞生长影响及Caspase凋亡途径相关蛋白的表达研究

目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究.方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时问下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9 酶活性检测方法和厚朴酚诱导下结肠癌SW480细胞凋亡指标及路径.结果:MTT结果显示和厚朴酚具明显抑制SW480细胞的体外增殖,其抑制率存在剂量和时间依赖性;药物处理24,48,72 h的IC50值分别是54.36、44.72、36.20 μmol/L.和厚朴酚作用细胞后,G0/G1期的细胞比例随药物浓度增加而逐渐增多(P<0.05),表明和厚朴酚能阻滞细胞于G0/G1期.荧光染料 Hoechst33258染色结果显示.细胞核出现典型的凋亡小体.Caspase家族蛋白酶活性检测结果,胞内Caspase-3,-8,-9酶家族分别被激活.其活性随不同时间点升高(P<0.05).结论:和厚朴酚能明显抑制人结肠癌SW480细胞体外增殖,并诱导大肠癌细胞SW480通过激活Caspase途径发生凋亡.     

肾移植中群体反应性抗体与性别的关联研究

目的：探讨性别在产生群体反应性抗体（penal reactive antibody,PRA)时的差异以及对肾移植的影响。方法：参照肖露露建立的PRA检测方法,对自1991年起10年间的4242例初次或再次等待肾移植的男女患者检查PRA。结果：女性患者每年的PRA阳性率与男性患者每年的PRA阳性率之间存在着明显的差异（P＜0．05）。其中9例肾移植术由于高PRA介导超急性排斥反应的患者,8／9例由于HLA配合程度低造成预后非常差。结论：有妊娠史女性患者比男性患者更易致敏淋巴细胞免疫抗体,因此女性患者应该避免输血和特别重视初次移植。     

魔芋精粉对五种二价金属离子的体外结合研究

本研究采用体外模拟体内胃肠道环境某些条件用透析方法研究了魔芋精粉与Ｐｂ＾２＋、Ｃｄ＾２＋、Ｆｅ＾２＋、Ｚｎ＾２＋、Ｃａ＾２＋的结合。并探讨了加热处理、ｐＨ改变及环境共存离子的竞争作用对结合的影响。结果表明，魔芋精粉与五种离子的结合具ｐＨ依赖性，ｐＨ５￣５．６时发生不同程度的结合，ｐＨ１．５时无结合，ｐＨ６．５时随离子浓度增加魔芋精粉与Ｐｂ＾２＋、Ｃｄ＾２＋的结合降低，与Ｃａ＾２＋的结合增加，与Ｚｎ