微凝自动扫描法在Rh(D)血型检测中的应用

随着微量板检测技术的发展 ,越来越多的凝集试验逐步由手工检测走向自动化检测[1～ 3] 。Ｒｈ(Ｄ)血型常用的检测方法有纸片法和试管法。纸片法有灵敏度差的缺点 ,而试管法操作繁琐 ,因此不适合大批量标本快速检测。我们采用单克隆混合型 (ＩｇＭ +ＩｇＧ)抗 Ｄ试剂结合自动扫描分析系统 ,建立了Ｒｈ(Ｄ)血型检测的微凝自动扫描法 ,该方法集快速、准确的优点于一体 ,经临床应用 ,准确率达 10 0 % ,介绍如下。1　材料和方法1.1　标本　 2 0 0 1年 3月～ 2 0 0 2年 8月来我单位的无偿献血者血液标本 (肝素抗凝 ) ,计 15 6 2 0人份。1.2　仪器…     

正交试验法优选夏黄颗粒处方药材的乙醇提取工艺

目的 优选夏黄颗粒处方药材的乙醇提取工艺条件.方法 以乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验设计,对5种蒽醌总转移率、出膏率两个指标进行综合评分,优选出最佳工艺.结果 最佳提取工艺为10倍量60％乙醇回流提取2次,每次1.5h.结论 优选出的夏黄颗粒处方药材的最佳工艺合理,经验证其稳定可行,有效成分提取率较高.     

复方地黄对帕金森病大鼠多巴胺能神经元及GDNF表达的影响

目的:研究复方地黄对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法:40只SD雄性大鼠,分为正常组、假手术组、模型组、模型组+复方地黄组(即干预组)。观察PD大鼠药物诱发的旋转行为;免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元数目及胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derivedneurotrophic factor,GDNF)表达水平的变化。结果:干预组与模型组间的旋转圈数有明显差异(P0.05);模型组黑质TH阳性神经元数目(52.9±2.2)明显少于正常组(160.3±2.4)、假手术组(161.6±3.4)及干预组(61.5±2.6)(P0.05);在大鼠黑质和纹状体部位,干预组GDNF阳性细胞数量比正常组、假手术组、模型组均明显增加(P0.05)。结论:复方地黄方能明显改善PD大鼠的旋转行为,拮抗6-羟基多巴胺诱导的PD大鼠黑质多巴胺能神经元的丢失,其保护作用可能与促进内源性GDNF分泌增加有关。     

多指标成分测定结合全息谱法优化夏黄颗粒的提取工艺

目的优选夏黄颗粒处方药材的最佳提取工艺。方法采用高效液相色谱法,建立夏黄颗粒的全息图谱以及5种蒽醌类成分的测定方法,并对水回流提取、水提醇沉、醇回流提取、水煎煮、醇提结合水提、水提醇沉结合醇渗漉6种提取工艺进行比较。以总蒽醌转移率、结合蒽醌质量为指标并结合全方全息谱优选出最佳提取方法。结果夏黄颗粒的6种提取工艺中,醇回流提取总蒽醌转移率最高、结合蒽醌质量也最高,全息谱中各峰相对面积也较大。结论醇回流提取工艺为夏黄颗粒处方药材的最佳工艺。     

多指标成分测定结合全息谱法优化夏黄颗粒的提取工艺

目的优选夏黄颗粒处方药材的最佳提取工艺。方法采用高效液相色谱法,建立夏黄颗粒的全息图谱以及5种蒽醌类成分的测定方法,并对水回流提取、水提醇沉、醇回流提取、水煎煮、醇提结合水提、水提醇沉结合醇渗漉6种提取工艺进行比较。以总蒽醌转移率、结合蒽醌质量为指标并结合全方全息谱优选出最佳提取方法。结果夏黄颗粒的6种提取工艺中,醇回流提取总蒽醌转移率最高、结合蒽醌质量也最高,全息谱中各峰相对面积也较大。结论醇回流提取工艺为夏黄颗粒处方药材的最佳工艺。     

梓醇对乳胞素诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的探讨梓醇对蛋白酶体抑制剂乳胞素诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法梓醇10μmol·L-1预处理SH-SY5Y细胞1 h后,加入乳胞素10μmol·L-1继续处理24 h。倒置显微镜下观察细胞形态的变化,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化,酶联免疫吸附检测细胞内20S蛋白酶体含量。结果与正常对照组相比,梓醇10μmol·L-1对细胞存活率、形态和凋亡及20S蛋白酶体含量无显著差异;乳胞素10μmol·L-1组细胞存活率为(72.0±1.8)%,明显降低(P<0.05),细胞凋亡率为(64.7±2.6)%,明显增高(P<0.05)。Hoechst33258染色发现梓醇细胞核形态改变,出现凋亡小体;细胞内20S蛋白酶体含量降低60%,差异具有统计学意义(P<0.05)。与乳胞素10μmol·L-1组相比,梓醇10μmol·L-1预处理组细胞存活率(87.9±2.2)%明显增高(P<0.05),细胞凋亡率为(51.4±1.5)%,明显降低(P<0.05)。Hoechst33258染色发现,梓醇细胞核形态明显改善;细胞内20S蛋白酶体含量升高了1.9倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论梓醇对乳胞素诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与梓醇提高SH-SY5Y细胞内20S蛋白酶体含量有关。     

影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨

目的　探讨 3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素 ,提高 ELISA法检测结果的准确性。方法　 ( 1 )随机选择对照组和实验组各 44份无偿献血者血样 ,分别进行两种不同方式的抗凝 ,应用 FAME全自动酶免分析系统进行 HBs Ag、抗 -HCV、抗 -HIV、TP4个项目检测 ,比较两组检测结果。 ( 2 )在全自动加样仪的加样高度设置中 ,不断增加加样高度 ,观察 FAME对 4个质控血清平行孔的检测效果。( 3 )在不同温度的 FAME洗液下 ,对 88份正常的无偿献血者血样进行 4个项目检测 ,观察不同温度的洗液对检测结果的影响。结果　 ( 1 )除抗 -HCV外 ,实验组中其他 3项检测结果均有假阳性出现 ,且阴性标本的 S/CO值明显高于对照组 ( P<0 .0 0 1 )。( 2 )当加样高度低于 9.1 mm时 ,抗 -HCV有假阴性出现 ,4项检测的 CV值均较高 ,均一性差。 ( 3 )洗液温度低于 1 4℃时 ,除抗 -HCV外 ,其他 3项检测结果有假阳性出现 ,CV值较高 ,均一性差。结论　标本的抗凝效果、全自动加样仪的加样高度和洗液温度对全自动酶免检测结果均有影响 ,只有在血样充分抗凝、加样高度和洗液温度适当等条件下 ,才能获得准确的检测结果     

免疫质控在血站检测工作中的应用

室内质量控制是实验室为了监测和评价本室工作质量 ,决定常规检验报告能否发出所采取的控制手段和检验方法 ,旨在检测本室工作的精密度和准确度 ,并检查本室常规工作中批间和日间标本检测的一致性。目前室内质控在实验室生化测定方面应用较广 ,方法也较为成熟 ,但用在免疫检测上还不够普遍。本血站检验科为了保证工作质量 ,确保每次实验的可靠性 ,将室内质控方法也引入到免疫检测中[1] ,对ＨＢｓＡｇ ,ＨＣＶ抗体和ＨＩＶ - 1+2抗体三项实验开展了室内质控工作。经过一段时间的实践 ,我们认为该方法具有一定的可操作性 ,现将方法及实验过程…     

松香骨架结构分子印迹聚合物的制备及其对竹节参皂苷IVa吸附性能研究

目的 为了减少非特异性结合位点,制备了松香大分子骨架的竹节参皂苷IVa分子印迹聚合物（molecularly imprinted polymers,MIPs）并研究其吸附性能,为开发选择性更高的竹节参皂苷IVa分离材料提供理论基础。方法 以脱氢枞酸丙烯酸乙二醇酯为功能单体制备了竹节参皂苷IVa分子印迹聚合物。使用红外光谱、扫描电子显微镜、比表面积测试仪、热重分析仪对聚合物进行表征;通过吸附动力学实验、静态吸附实验、重复再生实验、解吸附实验考察聚合物的吸附性能,并将聚合物应用于珠子参提取液的分离。结果 制备的聚合物形貌规整,具有介孔结构;吸附实验表明MIPs的印迹因子为1.58,通过Scatchard方程分析,聚合物存在2种结合位点,其中高亲和力位点最大结合量为270 mg/g,低亲和位点的最大结合量为142.01 mg/g;重复使用5次后聚合物的吸附量仅降低了13%;解析率为83.7%。与C18萃取小柱相比,MIPs对珠子参粗提物具有明显的分离效果。结论 制备的聚合物对竹节参皂苷IVa具有良好的吸附性能,可多次重复使用,是一种极具潜力的竹节参皂苷IVa分离新材料。该研究也可作为其他皂苷...     

-80℃下不同冻存时间对脐血造血干细胞保存效果的影响

目的探讨-80℃下不同冻存时间对脐血造血干细胞保存效果的影响。方法对-80℃下分别冻存1、2、3、4、8、16、32 w的脐血细胞进行复苏,比较各组间有核细胞数、CD34^＋数和台盼蓝拒染率的差异。结果脐血细胞在-80℃下保存1、2、3、4、8 w后,各组的有核细胞数和CD34^＋数的差异无统计学意义,而在冻存16、32 w后较1 w的差异有统计学意义（P〈0.05）。台盼蓝拒染率在8、16、32 w较1 w的差异均有统计学意义（P〈0.05）,1、2、3、4 w各组间的差异无统计学意义。结论-80℃直接冻存对于短期（〈8 w）脐血细胞的活性（有核细胞数、CD34^＋数和台盼蓝拒染率）无明显影响,但对于需要长期保存的脐血细胞的效果有影响。