不同治则方剂对5-氟尿嘧啶化疗增效作用的实验观察

目的 观察不同治则方剂对5-氟尿嘧啶(5-Fu)疗效的影响.方法 设计清热解毒、活血化淤、扶正固本、化痰祛湿、益气养血、软坚散结6种治则方剂,中药血清药理通法获取含药血清.MTT法检测10%和20%含药血清对人乳腺癌(MCF-7)细胞生长的影响以及其对5-Fu化疗作用的影响.小鼠肿瘤艾氏腹水癌(EAC)动物模型观察软坚散结方对5-Fu化疗的增效作用.结果 血清药理体外实验显示,与对照组相比,6种方剂含药血清均显示出对5-Fu化疗不同的增效作用,其中以软坚散结方和化痰祛湿方效果较好,软坚散结方体内实验亦表现出明确的增效作用.结论 血清药理学实验可用于中药方剂对化疗药物增效作用的筛选,其体外与体内实验存在相关性.     

牛蒡根4种提取物体外抗肿瘤活性的比较研究

目的:研究牛蒡根4种提取物体外抗肿瘤活性。方法:以系统溶剂分离法分别提取牛蒡根的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位。采用MTT法检测4种提取物对人乳腺癌细胞MCF-7、人胃腺癌细胞BGC-823、小鼠肝癌细胞HepA、肉瘤细胞S180和小鼠脾淋巴细胞生长的抑制作用。结果:牛蒡根石油醚、氯仿、乙酸乙酯3种提取物对MCF-7细胞和BGC-823细胞在体外有一定生长抑制作用;牛蒡根4种提取物对HepA细胞、S180细胞和小鼠脾淋巴细胞在体外有一定的生长抑制作用。结论:牛蒡根石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取物体外具有一定的抗肿瘤活性,这种作用与增强细胞免疫活性无关。     

紫杉醇原位凝胶在EAC荷瘤小鼠体内药动学研究

目的:考察紫杉醇原位凝胶制剂PECT/PTX小鼠瘤体内植入后的药动学特点,评价该制剂是否具有控释、缓释作用。方法:对EAC荷瘤小鼠分别进行PECT/PTX瘤体内给药(A组,40 mg·kg^-1),PTX瘤体内给药(B组,40 mg·kg^-1)和PTX腹腔给药(C组,40 mg·kg^-1),给药后于设定的时间点采血,应用HPLC法测定血浆中PTX的含量,DAS 2.1.1药动学分析软件计算主要药动学参数。结果:血浆中A、B、C 3组的C_max分别为(2.23±0.16),(25.25±0.83),(258.38±10.34)mg·L^-1;t_1/2分别为(473.81±195.13),(10.89±0.87),(17.87±6.29)h;AUC_0-t分别为(623.57±23.48),(340.72±2.73),(843.35±25.93)mg·L^-1·h;V_d分别为(17.01±2.24),(1.76±0.13),(1.07±0.25)L·kg^-1;CL分别为(0.024±0.010),(0.105±0.001),(0.040±0.004)L·h^-1·kg^-1。与B组相比,A、C 2组主要药动学参数均具有显著的统计学差异(P<0.01)。结论:PECT/PTX原位凝胶制剂瘤体内给药具有缓慢释放PTX的作用。     

柴胡桂枝汤减轻慢性胰腺炎神经性腹痛机制的探讨

目的 探讨柴胡桂枝汤（CHGZT）减轻三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠慢性胰腺炎（CP）神经性腹痛的初步机制。方法 50只雄性SD大鼠随机均分为5组，分别为假手术组、模型组、CHGZT低、中、高剂量组（4、8、16 g·kg^-1）。假手术组轻轻翻动胰腺后即关腹，模型组采用向胰管内逆行注射2% TNBS-10%乙醇。CHGZT在造模后4周开始灌胃给药，连续2周。5组大鼠分别于术后6周进行Von Frey疼痛阈值检测；苏木素-伊红（HE）染色评估胰腺组织慢性炎症及纤维化病变；免疫组化法（IHC）检测PGP9.5蛋白表达，同时观察神经周围炎性改变；IHC及免疫荧光（IF）染色观察胰腺相关胸段脊髓后角离子钙结合蛋白-1（Iba-1）、嘌呤能受体P2X7（P2RX7）的定位及P2RX7和小胶质细胞的共表达。结果 与假手术组比较，模型大鼠胰腺组织腺泡萎缩评分、炎性浸润评分、纤维化评分显著增高（P<0.01），大鼠在不同力值疼痛反应值均明显升高（P<0.05，P<0.01），PGP9.5周围炎性浸润评分显著升高（P<0.01），模型组大鼠脊髓后角Iba-1与P2RX7表达均显著增强（P<0.01）；与模型组比较，CHGZT高、中剂量组明显降低大鼠胰腺组织腺泡萎缩评分、炎性浸润评分、纤维化评分，明显降低疼痛反应值，明显降低PGP9.5周围炎性浸润评分（P<0.05，P<0.01），CHGZT高、中、低剂量组显著降低Iba-1及P2RX7表达（P<0.01）。结论 CHGZT可明显减轻CP模型大鼠腹痛程度，可能和通过抑制胰腺内神经炎症、降低相应脊髓后角小胶质细胞P2RX7活化有关。     

牛蒡根氯仿提取物有效组分分离及其抗肿瘤活性的研究

目的:通过生物活性追踪法对牛蒡根氯仿提取物进行分离提取,研究其抗肿瘤有效组分及可能的作用机制。方法:牛蒡根氯仿提取物经硅胶柱洗脱分离得到不同组分。用S180细胞和K562细胞经 MTT法筛选活性组分;流式细胞术检测活性组分对K562细胞周期及凋亡的影响;小鼠淋转实验验证活性组分对小鼠免疫功能的影响;MTT法观察活性组分对耐药细胞K562/O2的逆转作用。结果:牛蒡根氯仿 提取物分离鉴定后得到甾体类组分（L-1）、三萜类组分（L-2）、L-3和L-4 4个组分。各组分对S180细胞均显示很强的细胞毒作用,其IC50值均在10 μg/mL以下。而K562细胞对甾体类组分和三萜类组分 敏感度较高,IC50值分别为204.50 μg/mL和117.56 μg/mL;三萜类组分可使K562细胞 G0/G1期细胞比例较对照组的45.52%增加至53.82%,S期细胞比例由对照组的45.68%减少到37.11%（均P<0.05）;甾 体类组分和三萜类组分分别将K562细胞凋亡率由5.1%增加至21.8%和38.0%（均P<0.01）。三萜类组分对小鼠淋巴细胞存在一定促进增殖作用,而甾体类组分与阿霉素合用后K562/O2细胞耐药指数由1 165 降低至46８（P<0.01）。结论:牛蒡根氯仿提取物中的甾体类组分和三萜类组分影响细胞周期、诱导细胞凋亡并在免疫调节和肿瘤耐药性方面发挥抗肿瘤作用。     

重症急性胰腺炎大鼠血浆中6种线粒体N-甲酰肽及胰腺FPR1的表达研究 #br#

目的 检测重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血浆中6种线粒体N-甲酰肽（NFPs）及胰腺中甲酰肽受体1（FPR1） 的表达情况，探讨其与SAP病程进展的关系。方法 30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAP模型3 h 组和SAP模型6 h组，每组10只。假手术组仅在开腹后轻轻翻动胰腺后关闭腹腔；SAP模型3 h组和SAP模型6 h组 均通过胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠（50 mg/kg）制备SAP大鼠模型，并分别于SAP造模3 h后和SAP造模6 h后 取材。苏木素-伊红染色法观察胰腺组织病理变化；免疫组织化学法检测胰腺中FPR1的表达水平；蛋白质免疫印迹 法检测血浆中6种线粒体NFPs的表达水平。结果 与假手术组比较，SAP模型3 h组和SAP模型6 h组的胰腺均发 生明显出血、腺泡细胞坏死、炎性细胞浸润、水肿等病理改变，病理评分明显升高，且SAP模型6 h组更高（P＜0.05）。 免疫组化结果显示SAP模型3 h组和SAP模型6 h组的胰腺组织FPR1表达水平均较假手术组升高，SAP模型6 h组更 高（P＜0.05）。6种线粒体NFPs的表达水平出现不同变化，其中MT-ND1、MT-ND3和MT-ND6随着SAP造模时间延 长表达逐渐增加（P＜0.05），MT-ND4则呈递减趋势（P＜0.05），MT-ND5在3组中表达无明显差异。结论 FPR1和 部分线粒体N-甲酰肽与SAP病程进展密切相关，且可能与SAP的过度炎症反应和炎症级联放大有关。     

益肺通络方对低氧性肺血管重建大鼠无肌型肺小动脉肌化的影响

目的:观察益肺通络方对低氧性PVR大鼠无肌型肺小动脉血管重建的影响。方法:采用气管注入脂多糖联合烟熏法建立COPD大鼠模型,并叠加低氧建立PVR大鼠模型。60只Wistar大鼠随机分成空白、模型、实验高、中、低剂量5组,每组12只,空白、模型组生理盐水灌胃,实验组按高剂量(含药1.5 g/m L)、中剂量(含药1.0 g/m L)、低剂量(含药0.5 g/m L)益肺通络方煎剂灌胃。4、5、6周3个时点取材,计算3型肺小动脉百分比。结果:3型肺小动脉百分比,空白组各时点无明显改变(4周≈5周≈6周),模型组无肌型动脉呈减少趋势(4周5周6周),部分肌型动脉呈增加趋势(4周5周6周),0~4周无肌型动脉减少快,4~6周减少慢。无肌型动脉百分比,实验组各时点变化趋势均同模型组,组内分析,4周~6周比较,差异均有统计学意义(P0.05);各时点组间比较,均表现为模型组实验低剂量组实验中剂量组实验高剂量组空白组,各实验组与模型组比较,各实验组组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益肺通络方能抑制慢性低氧PVR大鼠肌型肺小动脉中膜增殖,且存在量效关系。     

血必净注射液调节线粒体N-甲酰肽/NLRP3炎症通路对重症急性胰腺炎大鼠模型的治疗机制

目的 探讨血必净注射液（XBJ）对牛磺胆酸钠（Na-Tc）诱导重症急性胰腺炎（SAP）大鼠模型的治疗作用。方法 将40只大鼠随机均分为5组，分别为假手术组、SAP模型组、XBJ低、中、高剂量组（4、8、12 mL·kg·d^-1）。以胆胰管内逆行注射Na-Tc（1 mL·kg^-1）制备SAP模型，XBJ在造模前3 d和造模后0.5 h进行腹腔注射给药。测量大鼠腹水量和胰腺组织湿质量比；采用苏木素-伊红（HE）染色观察胰腺组织病理变化；采用免疫组化检测胰腺组织甲酰肽受体1（FPR1）和核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）的蛋白表达水平；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠血浆中NADH-泛素氧化还原酶链1~6（MT-ND1、MT-ND2、MT-ND3、MT-ND4、MT-ND5、MT-ND6）的表达情况。结果 与假手术组比较，SAP模型组腹水量和胰腺湿质量比明显增加（P<0.05），胰腺组织病变严重，病理总评分明显上升（P<0.05），胰腺组织FPR1和NLRP3表达明显增多（P<0.05），血浆中MT-ND2表达明显降低（P<0.05），MT-ND1、MT-ND3和MT-ND6均明显增加（P<0.05），MT-ND4和MT-ND5无明显变化；与SAP模型组比较，XBJ各剂量治疗组大鼠腹水量和胰腺湿质量比显著减少（P<0.01），胰腺病变均有不同程度地改善，且胰腺组织FPR1和NLRP3表达均显著降低（P<0.01），血浆中MT-ND1、MT-ND3和MT-ND6表达均显著下降（P<0.01），MT-ND4表达下降，其中XBJ高剂量组尤甚（P<0.01），MT-ND5表达差异无统计学意义。结论 血必净注射液可有效治疗大鼠SAP，其机制可能与拮抗部分线粒体N-甲酰肽和FPR1/NLRP3介导的过度炎症反应相关。     

方剂配伍增加中药方剂活性——一项来自毒理学的实验研究

[目的] 比较不同制备方法对清热解毒方水煎剂毒性的影响。[方法] 清热解毒方中各味药材分别制备成不同待测样品：合煎样品、分煎样品及单味药给药样品,采用简化机率法测定各样品对小鼠灌胃给药的半数致死量（LD₅₀）,并比较测定结果。[结果] 所测得合煎样品和分煎样品的LD₅₀分别为（91.26±7.92）g/kg 和（111.47±9.12）g/kg,与合煎样品比较,分煎样品的毒性显著降低（P<0.05）,且动物死亡时间及死前表现不同。单味药样品给药后多未出现明显毒性反应。[结论] 与单味中药比较,复方配伍确能提高中药的生物活性。