腺性膀胱炎IL-6、IL-17和TGF-β的表达及意义

目的:探讨白细胞介素(IL)-6、IL-17和转化生长因子(TGF)-β在腺性膀胱炎(CG)组织中的表达及其在CG发病及进展中的作用。方法:将15例正常膀胱黏膜定为对照(A)组,43例未复发CG定为治愈(B)组,13例复发和癌变的CG定为进展(C)组;检测3组IL-6、IL-17和TGF-β的表达情况,并分析这些因子与CG发病及进展的相关性。结果:A组、B组及C组IL-6、IL-17和TGF-β的阳性表达率差异均有统计学意义(P0.01)。3种因子与CG发病(rs分别为0.431、0.545、0.354,P0.05)和进展(rs分别为0.426、0.333、0.288,P0.05)呈正相关;IL-17分别与IL-6、TGF-β呈正相关(rs分别为0.997、0.961,P0.05)。结论:IL-6、IL-17和TGF-β可能在CG的发病及进展中起重要作用。     

CD26、Ki67和表皮生长因子受体在甲状腺肿瘤中的表达及其诊断意义

目的 观察CD26、Ki67和表皮生长因子受体(EGFR)在甲状腺良恶性肿瘤中的表达,探讨其鉴别诊断意义,并寻找分化型甲状腺癌标志物.方法 用免疫组化S-P法检测分化型甲状腺癌、腺瘤各50例中CD26、Ki67和EGFR蛋白的表达,并分析它们的相关性.结果 CD26、Ki67和EGFR的阳性表达率、表达强度在腺癌组显著高于腺瘤组、尤其滤泡性腺癌显著高于滤泡性腺瘤组.结论 CD26、Ki67和EGFR的异常表达尤其CD26可能对滤泡上皮起源的甲状腺癌与腺瘤的鉴别诊断、预后判断有参考意义.     

牛樟芝非还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析

目的获得牛樟芝聚酮合酶基因(Ac PKS1)全长,对其进行生物学分析并分析该基因在不同培养基上的表达差异。方法通过对牛樟芝基因组分析获得牛樟芝聚酮合酶基因,通过设计含有起始密码子和终止密码子的特异引物并以牛樟芝c DNA为模板克隆得到Ac PKS1基因全长,并对该基因进行生物信息学分析及在不同培养基上的表达谱分析。结果 Ac PKS1全长6 348 bp,含有6个内含子和7个外显子,外显子编码2 115个氨基酸;通过生物信息学分析,推测该基因为真菌I型非还原型PKS,结构域为SAT-KS-PT-ACP-ACP-TE,系统树分析显示Ac PKS1与其他未知功能的聚酮合酶(PKS)聚为一支,说明Ac PKS1可能是一种新的聚酮化合物环化方式;表达谱分析表明,葡萄糖为Ac PKS1基因表达的必要条件,且葡萄糖含量与Ac PKS基因表达量呈正相关。结论本研究为Ac PKS1功能鉴定以及牛樟芝基因资源利用奠定基础。     

兔骨膜细胞分离培养的方法改进

BACKGROUND:Periosteum is considered as a source of seed cells for cell therapy due to its biological features. OBJECTIVE:To seek the optimal way to isolate and culture rabbit periosteal cells and identify their biological features. METHODS: Rabbit periosteum on facies medialis tibiae was taken out under aseptic conditions. Periosteal cells isolated through the digestion of type II collagenase with the explants culture method were cultured in DMEM/F12 complete medium. Cell ultrastructure was observed under an inverted microscope. Periosteal cell proliferation was determined by cell counting kit-8 assay. Cell surface antigens CD90 and CD105 were determined using flow cytometry. Osteogenic and lipogenic induction mediums were applied to induce periosteal cells to differentiate into osteocytes and adipocytes, respectively. After 2 weeks of induction, cells were harvested for alizarin red staining and oil red O staining to assay the calcium nodules and lipid droplet. RESULTS AND CONCLUSION:The digestion of type II collagenase with the explants culture method shortened the period of primary cells culture and enhanced the survival rate, which caused higher purity and stronger reproductive activity of harvested periosteal cells. Primary cultured periosteal cells grew in form of spindle spiral or parallel. Alizarin red and Oil red O staining verified the multi-directional differentiation potentiality of periosteal cells. These findings suggest that the periosteal cells with high purity, strong reproductive activity, and multi-directional differentiation potentiality can be harvested in short time using digestion of type II collagenase with the explants culture method.     

成人肾恶性横纹肌样瘤15例临床病理及免疫表型分析

目的：探讨成人肾恶性横纹肌样瘤（MRTK）的病理组织学,分子免疫表型的特点及临床意义.方法：对我院1983～2009年收治15例肾脏恶性横纹肌样瘤的石蜡组织切片运用SP法进行免疫组化染色,检测Vi-mentin、Myoglobin、Desmin、α-SMA、EMA、NSE、S-100的表达,并结合临床病理特征进行分析.结果：组织学上瘤细胞胞界清楚.胞浆丰富具有嗜酸性颗粒、常见大的嗜酸性包涵体,呈圆形或椭圆形,将细胞核挤向一侧.核膜明显而核仁突出,核分裂多见.经SP染色后,Vimentin均警阳性或强阳性表达,EMA、NSE和S-100均有不同程度的阳性表达,α-SMA有2例呈阳性表达,而Myoglobin、Desmin均呈阴性表达.结论：成人MRTK是一种表达多种免疫抗原,独立的可多向分化的肾恶性肿瘤,Vimentin和Myoglobin、Desmin、α-SMA有助于MRTK的诊断和鉴别诊断.     

甲状腺肿瘤增殖与凋亡的关系

 目的 研究甲状腺肿瘤细胞增殖指数PI和凋亡指数AI的关系；探讨甲状腺肿瘤的发病机制及PI和AI在鉴别甲状腺良、恶性肿瘤中的诊断价值。方法 用免疫组化Envision法和TUNEL法分别检测76例甲状腺肿瘤细胞中Ki67和AI表达。结果 ①39例腺瘤和37例腺癌PI和AI表达在腺瘤和腺癌组间比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；②15例滤泡性腺瘤（FTA）和15例滤泡性腺癌（F1C）的PI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；③15例乳头状腺瘤（PTA）和15例乳头状腺癌（PTC）AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PI表达组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。④9例嗜酸细胞腺瘤（OCTA）PI表达和7例嗜酸细胞腺癌（OCTC）PI组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。9例OCTA AI表达和7例OCTCAI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。⑤AI表达强度和PI表达强度呈正相关（rs=0．595，P〈0．01）。结论 甲状腺癌细胞的增殖与凋亡相关，甲状腺癌细胞的AI表达增高不表示有良好生物学行为。AI表达率和PI表达率可以作为鉴别诊断甲状腺良、恶性肿瘤的参考指标。     

甲状腺肿瘤bcl-2和c-myc蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的探讨甲状腺肿瘤细胞bcl-2、c-myc蛋白的表达与细胞凋亡的关系以及它们在甲状腺良、恶性肿瘤中的诊断意义。方法应用免疫组化EnVisionMT法检测甲状腺肿瘤细胞bcl-2、c-myc蛋白的表达,用TUNEL法检测甲状腺肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果30例腺瘤中bcl-2、c-myc蛋白阳性表达率分别为90.0%(27例)、50.0%(15例)鸦30例腺癌中分别为63.3%(19例)、93.3%(28例)。二者在腺瘤和腺癌组间比较差异均有显著性(P<0.05)。30例腺瘤中AI为0.12±0.28,30例腺癌中AI为0.39±0.39,组间比较差异有显著性(P<0.05)。在甲状腺癌中,bcl-2阳性组AI低于阴性组(P<0.05),c-myc阳性组AI高于阴性组(P<0.05)。结论bcl-2、c-myc蛋白和AI可作为鉴别甲状腺良恶性肿瘤的参考指标;bcl-2蛋白的丢失可能与甲状腺乳头状癌的形成有关;bcl-2蛋白高表达抑制细胞凋亡,c-myc蛋白高表达促进细胞凋亡。     

BAI-1在肾细胞癌组织中的表达定位及与VEGF MCD P53蛋白相关性研究

  目的  探讨BAI-1在不同分期肾细胞癌中的表达差异以及BAI-1抑制肿瘤血管内皮增殖的机制。  方法  取人肾细胞癌标本133例, 正常肾组织标本133例(癌旁 > 4 cm处正常肾组织, 病理学检测证实)。正常肾脏标本为对照组, 肾细胞癌标本为研究组。采用免疫组织化学SP法分别检测BAI-1、VEGF、MVD、P53, 进行半定量统计学分析。取临床新鲜肾细胞癌组织标本27例, 癌旁4cm以外肾组织15例。应用Western blot方法分析BAI-1肾细胞癌组织及正常肾组织中的表达差异。  结果  免疫组化统计分析及western blot检测显示正常肾组织中BAI-1表达明显高于肾细胞癌组织, 并且与临床分期相关, T1~2局限期肾细胞癌中BAI-1表达远高于T3~4进展期肾细胞癌(P < 0.05)。同时BAI-1表达与VEGF具有相关性(r=0.586, P < 0.05), 与MVD具有相关性(r=0.577, P < 0.05), 与P53表达具有相关性(r=0.513, P < 0.001)。  结论  在肾细胞癌组织中BAI-1含量较正常肾组织明显降低且与肾细胞癌临床分期相关, BAI-1表达与VEGF、MVD负相关, 与P53正相关性。BAI-1可能参与了肿瘤微血管增殖的负调节, BAI-1的表达减少可能与P53的突变相关。      

细胞黏附分子CD44v6对膀胱癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的:探讨细胞黏附分子CD44v6对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响.方法:免疫细胞化学法检测正常膀胱移行上皮细胞和膀胱癌T24细胞中CD44v6蛋白的表达.用不同浓度的抗CD44v6单克隆抗体封闭细胞24、48和72 h后,MTT法检测细胞的生长抑制率.FCM检测封闭前后细胞凋亡率,并通过免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平的变化;Transwell小室检测细胞迁移特性的变化.结果:膀胱癌T24细胞表达CD44v6蛋白,而正常膀胱移行上皮细胞几乎不表达.MTT法检测结果显示,抗CD44v6单克隆抗体可抑制T24细胞的生长(P＜0.01).抗CD44v6单克隆抗体能增加T24细胞的凋亡率(P＜0.01),并且Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加(P＜0.01).抗CD44v6单克隆抗体封闭后T24细胞的迁移能力受到抑制,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:抗CD44v6单克隆抗体封闭可以抑制膀胱癌细胞的增殖及迁移能力,同时诱导膀胱癌细胞凋亡,其机制可能与Bcl-2和Bax基因表达水平变化有关.