诱导痰处理温度对支气管哮喘诱导痰中气道炎性反应标志物浓度的影响

目的 探讨诱导痰处理温度对哮喘患者诱导痰中炎性细胞分类及其气道炎性反应标志物浓度的影响.方法 收集2013年3月至2013年8月在广州呼吸疾病研究所就诊的哮喘患者52例,所有受试者进行痰诱导,选取痰黏液加入4倍体积0.1％的二硫苏糖醇(DTT)后,分别于0℃冰浴与37℃水浴下孵育15 min(15 min冰浴组和15 min水浴组,n=28)和30 min(30 min冰浴组和30 min水浴组,n=10).细胞沉淀行HE染色后进行分类计数,同时采用悬浮芯片方法检测痰上清白细胞介素(IL)-5、IL-10、IL-17、干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α.比较不同诱导痰处理温度对痰细胞计数及气道炎性反应指标水平的影响.结果 52例哮喘患者,痰诱导成功28例,成功率为53.8％.15 min冰浴组和15 min水浴组比较、30 min冰浴组和30 min水浴组比较,其痰液重量、痰细胞总数、细胞存活率和痰细胞分类差异均无统计学意义(均P＞0.05).15 min冰浴组和15 min水浴组痰上清IL-10、IL-17、IFN-γ、IL-5和TNF-α的浓度比较差异无统计学意义(均P＞0.05);30 min冰浴组和30 min水浴组痰上清IL-10、IL-17和IFN-γ的浓度差异无统计学意义(均P＞0.05),但30 min水浴组的IL-5和TNF-α浓度要高于30min冰浴组[IL-5:2.55 (2.20～4.35) ng/L比2.03(1.52～2.50) ng/L,TNF-α:19.41(9.07～37.92) ng/L比10.78(8.58～ 17.93)ng/L,均P＜0.05].结论 诱导痰处理温度会影响诱导痰中某些气道炎性反应标志物的浓度.在诱导痰处理时DTT裂解后,置于0℃冰浴下操作,可以较真实反映诱导痰中炎性反应标志物的真实浓度.     

CTX—M型阴沟肠杆菌的基因克隆及原核表达产物特性研究

目的对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究。方法以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测。结果PCR扩增出大小为876bp和1067bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%。CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致。结论重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性与AmpC耐药基因的研究

目的 了解我院临床分离的60株多重耐药鲍曼不动杆菌(multi-drug resistant Acinetobater baumannii,MDRAB)的耐药性和AmpC耐药基因的存在状况.方法 采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,对该细菌进行总DNA的提取,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因,结合药物敏感试验分析菌株的耐药特征.结果 检出结构基因ampC型49株,占81.7%:blaADC基因型50株,占83%;ACT基因型2株;41株菌同时携带blaADC和ampC结构基因,占68%;2株同时携带blaADC、ACT和ampC结构基因;未检测到其它AmpC耐药基因(MOX、CIT、FOX、DHA).携带AmpC耐药基因的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对于丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%.结论 多重耐药鲍曼不动杆菌的blaADC耐药基因和ampC结构基因同时携带率高,并且是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因.     

呼吸道菌群失调在支气管哮喘中的作用

呼吸道菌群研究是一个相对较新的领域,随着16S rRNA序列分析检测技术在临床研究中的广泛应用,人们对呼吸道菌群失调与支气管哮喘发生发展之间的关系有了新的认识,研究发现呼吸道有着远比之前认识要多样化的菌群.呼吸道菌群异常可能是支气管哮喘发生及加重的潜在原因之一.     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药分子机制及质粒谱分析

目的了解我院临床分离的66株多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和整合子(qacE△1-sull)、转座子(tnpU)存在状况,并对菌株质粒谱进行分析。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,并对该细菌进行总DNA的提取。用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sull及tnpU,提取质粒进行同源性分析。结果 66株鲍曼不动杆菌中整合子qacE△1-sull基因阳性率为31.8%,转座子tnpU基因阳性率为30.3%。携带遗传标记的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%;有19株对亚胺培南耐药,其中整合子阳性率63.2%,转座子阳性率36.8%。检出质粒的46株(70%)临床分离菌出现1～3条大质粒带,大小在1～20kb间,其中出现1条带的有33株、2条带8株、3条带5株,有12株菌提取到大小相同的质粒。结论多重耐药鲍曼不动杆菌耐亚胺培南的耐药现象严重;整合子、转座子遗传标记的携带率高,可能是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性与AmpC耐药基因的研究

目的了解我院临床分离的60株多重耐药鲍曼不动杆菌（multi-drug resistant Acinetobater baumannii,MDRAB）的耐药性和AmpC耐药基因的存在状况。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,对该细菌进行总DNA的提取,用聚合酶链反应（PCR）检测耐药基因,结合药物敏感试验分析菌株的耐药特征。结果检出结构基因ampC型49株,占81.7%;blaADC基因型50株,占83%;ACT基因型2株;41株菌同时携带blaADC和ampC结构基因,占68%;2株同时携带blaADC、ACT和ampC结构基因;未检测到其它AmpC耐药基因（MOX、CIT、FOX、DHA）。携带AmpC耐药基因的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对于丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%。结论多重耐药鲍曼不动杆菌的blaADC耐药基因和ampC结构基因同时携带率高,并且是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

大气颗粒物对肺部微生态的影响及在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

正大气颗粒物(particulate matter,PM)是指空气中悬浮的混合污染物,包括烟雾、灰尘、固体或液体的复杂混合物,以及多种生物成分,主要来源于自然现象(如沙尘暴)、工业生产、生物燃料使用和交通相关活动。大气PM的暴露与多种疾病的患病率和死亡率有着明显的相关性[1-2]。流行病学研究表明,大气PM暴露显著增加呼吸系统疾病的患病风险[3-5],我们发现这在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)上表现得尤为明显[6-7],而减少PM暴露的浓度能够改善慢阻肺患者的肺功能和减少急性发作[8]。鉴于大气PM暴露是慢阻肺发病的重要危险因素,因此研究PM在慢阻肺发病中的机制就显得尤为重要及迫切,目前对于PM暴露致慢阻肺发病的研究主要集中在炎症机制方面[9-12],但随着近年来对肺部     

CTX-M型和CMY型耐药基因的检测与传播机制的探讨

目的 筛查广州医学院第一附属医院临床分离的80株革兰氏阴性杆菌的CTX-M型或CMY型耐药基因,检测含CTX-M型或CMY型菌株的耐药情况以及初步探讨耐药传播机制中质粒介导耐药这一途径.方法 对该细菌进行总DNA的提取,PCR扩增该80株细菌的DNA.结合K-B法药物敏感试验,分析菌株的耐药特征,提取基因筛选为阳性的细菌,判定其质粒是否存在耐药基因,质粒接合试验判断是否为可接合质粒.结果 检出ESBLs产酶菌CTX-M型4株,占5%,AmpC产酶茵CMY型3株,占3.75%.对耐药基因的筛选为阳性的7株菌株质粒提取,有6株菌为阳性,质粒接合试验结果显示有2株菌的质粒为可接合质粒,野生茵和接合茵的质粒中均存在耐药基因.结论 CTX-M和CMY菌株呈现多重性耐药性,CTX-M和CMY菌株的耐药基因大部分位于质粒上,其中2株为可接合质粒,这一初步探讨为耐药传播机制的研究打下基础.     

临床教师带教医学生参与科研的体会

随着医学科技发展和素质教育的推进,如何培养大学生创新意识与科研能力,是新时期高等医学教育的重要任务.处于基础阶段的本科生无论是在思维能力以及动手能力上均存在一定的局限性,医学本科生的科研水平不高,科研意识不强,成为科研能力培养的一个薄弱环节.     

69例误诊为支气管哮喘的病例分析

目的分析误诊为支气管哮喘(简称哮喘)的其他疾病,以减少临床误诊。方法对广州呼吸疾病研究所2012年2月至2014年2月误诊为哮喘的69例患者的临床资料进行回顾性分析,并总结疾病的特点。结果多达13种疾病误诊为哮喘,占前5位的分别为嗜酸粒细胞性支气管炎(21.74%)、上气道咳嗽综合征(20.29%)、慢性阻塞性肺疾病(13.04%)、变态反应性支气管肺曲霉病(7.25%)和过度换气综合征(7.25%),少见疾病有嗜酸性肉芽肿性血管炎及声带功能障碍等。结论许多疾病与哮喘有相似表现,加强对哮喘及与其有相似症状的其他疾病的认识是避免和减少误诊的关键。