抗结核一线药物及结核分枝杆菌的耐药分子机制

近年来涌现出了耐多药结核病(Multidrug-resistanttuberculosis,MDR-TB)/广泛耐药结核病(Extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)。MDR-TB是指由耐异烟肼和利福平两种或以上抗结核药物的结核分枝杆菌引起的结核病。XDR-TB是指不...     

抗HIV-1活性化合物作用靶点的快速判断方法

目前,艾滋病的防治工作主要依靠抗HIV-1药物,临床使用的抗HIV药物主要是逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、融合抑制剂和整合酶抑制剂。逆转录酶抑制剂包括核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）,如Zidovudine（AZT）、Lamivudine（3TC）、Emtricitabine（FrC）等,非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）,如Efavirenz（EFV）、Nevirapine（NVP）、Delavirdine（DLV）等。蛋白酶抑制剂主要有Ritanovir（RTV）、Saquinavir（SQV）、Indinavir（IDV）等。     

以脂磷壁酸为靶点的新抗筛选模型的建立和应用

目的：根据达托霉素的作用机制，寻找与糖肽类抗生素无交叉耐药性的新抗生素，方法：本实验建立了以脂磷壁酸为靶点的新抗筛选模型，并通过脂磷壁酸合成抑制模型对所筛得的阳性菌株进行复筛验证。结果：从1200株放线菌中筛选到2株阳性菌株，初步证明其抗菌活性显示出Ca^2 依赖性，并在脂磷壁酸合成抑制模型上显示一定的抑制活性。结论：阳性菌株1510和1615活性成分对MRSA等细菌具有良好的抗菌活性，值得深入研究。     

利福平类抗结核药物机制排重系统的建立

目的:以抗结核一线药物利福平耐药为研究目标,探索快速评价抗利福平耐药结核分枝杆菌活性的方法。方法:利用PCR技术扩增与利福平耐药相关的rpoB及其突变体,插入载体pMV261构建重组质粒,电击转化入耻垢分枝杆菌进行药物敏感性测定。结果:在利福平浓度为4μg/mL时,表达rpoB-AM和rpoB-GM突变体的重组菌耐药性明显高于未突变组,其MIC提高了4倍以上,而与野生株相比,MIC提高了8倍以上;以ATG为起始密码子表达蛋白组的耐药性都强于以GTG为起始密码组。结论:本研究建立的利福平类药物作用机制的排重系统,可以用于排除某种或某些作用机制相同或类似的活性化合物,避免重复筛选,提高筛选效率,对于抗利福平耐药株的抗结核药物的筛选有着重要意义。     

人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮恶性转化的研究

提要研究病毒和促癌物在食管癌形成的作用，用人胚食管上度培养和HPV18E6E7AAV感染。培养细胞分二组，SHEEC1组培养基中加入TPA(5ng/mL)4周。对照组SHEE未加TPA。细胞转化的形态，细胞周期,软琼脂培养和裸鼠致瘤性等指标皆证明SHEEC1已恶性转化。E6E7基因在FISH和PCR检测，两组细胞核皆呈阳性。结论：人胚食管上皮可用HPV18E6E7和TPA在体外协同诱导细胞恶性转化。人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮恶性转化的研究@沈忠英$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@蔡维佳$汕头大学医学院肿瘤病理研究室@沈健$汕头大…     

腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法：将人乳头瘤病毒（HPV）的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中，通过包装的重组病毒感染，将E6E7基因导入并整合到永生293细胞的基因组中。结果：本研究成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒并感染了永生293细胞，PCR／Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞293TL中确有表达，转化细胞293TC和293TL具有明显的转化表型，和亲本293细胞相比，生长速度快，接触抑制消失，集落形成率提高20倍，且集落明显增大，形成时间短。结论：成功地构建了HPV18 E6E7 AAV病毒，HPV18 E6E7基因引起永生化人上皮细胞293的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞，研究其致癌机制。     

以流感病毒RNA聚合酶为靶点的抗病毒药物筛选和药效学评价方法的建立

流感病毒RNA聚合酶对流感病毒基因组的复制和表达至关重要。编码聚合酶各亚基的基因序列高度保守的特点使其成为极具发展潜力的抗流感药物靶标。本研究通过构建流感病毒RNA聚合酶活性依赖的荧光素酶报告系统,在细胞水平上建立了以流感病毒RNA聚合酶为靶点的抗流感药物筛选模型。特异性评价和统计学分析表明,该筛选方法灵敏可靠、重复性好,可以用于针对流感病毒RNA聚合酶的抗流感药物筛选。     

HIV-1前体蛋白早成熟化激活剂筛选模型的建立及应用

HIV-1蛋白酶 (PR) 活性的严格调控对于病毒的生存至关重要。在病毒蛋白表达及病毒颗粒装配过 程中, 处于病毒前体蛋白Gag-Pol中的蛋白酶必须以无活性状态存在, 避免前体蛋白Gag-Pol和Gag被提前酶切加工 (前体蛋白早成熟化)。干扰HIV-1蛋白酶活性的调控机制, 特异性的激活前体蛋白中的蛋白酶, 诱导前体蛋白早成熟化, 就可以直接抑制病毒的复制。根据这一设想, 运用生物发光共振能量转移技术, 建立细胞水平的HIV-1前体蛋白早成熟化激活剂筛选模型, 并通过3 000个化合物的试验性筛选对筛选模型进行评价。研究结果表明该筛选方法灵敏可靠, 特异性高, 重复性好 (Z' 因子为0.905)。     

新形势下医药科研院所产学研一体化的探讨

随着我国事业单位改革工作不断深化,处在转型过渡期的医药科研院所,需要通过加强产学研一体化,以实现可持续发展。目前,科研立项缺乏市场调研,科技转化吸引资金难度大,复合型人才缺乏。以上因素制约了医药科研院所产学研一体化。结合国外的经验,分析医药科研院所的优势与面临的挑战,通过创新药物占领市场,多渠道加强复合型人才的建设,与市场需求准确对接,以及借助“外脑”开发引资,加快产学研一体化的进程。产学研互相促进,进而达到社会效益和经济效益的双丰收。