小檗碱对肠道菌的抑制作用

目的测定小檗碱对肠道菌的抑制作用。方法选取24株需氧、厌氧肠道菌,利用试管倍比稀释法,测定小檗碱对各种肠道菌的MIC值;再选取有代表意义的4种肠道菌,分别检测小檗碱对4种肠道菌生长曲线的影响。结果小檗碱对24株肠道菌均表现出不同程度的抑制作用,大部分抑制较弱(最低MIC为64μg/ml)。其中,小檗碱对能够引起肠道感染的痢疾志贺菌、弗氏志贺菌的抑制作用相对较强,对其他正常菌抑制较弱。生长曲线的测定表明,小檗碱对4种有代表意义的肠道菌在对数生长期和稳定期均有明显的抑制作用,且随着小檗碱浓度的增高,抑制作用增强。结论小檗碱治疗胃肠道感染,在一定程度上依赖于小檗碱对致病性肠道菌的抑制作用以及小檗碱对肠道菌群的调节。     

结核分枝杆菌FtsZ抑制剂的筛选和活性研究

目的筛选结核分枝杆菌FtsZ的特异性抑制剂,为抗结核药物的研发提供先导化合物。方法应用本实验室已经建立的结核分枝杆菌FtsZ抑制剂筛选模型对化合物库进行筛选,获得能够抑制FtsZ的化合物202E,对其进行IC50以及分子水平活性测定,并利用DS 4.0软件将化合物202E与FtsZ的活性位点进行对接。结果化合物202E能够抑制结核分枝杆菌FtsZ的GTP酶活性,其IC50为15.46μmol/L。202E还能够抑制FtsZ蛋白的聚合。通过分子对接,发现202E能够与FtsZ的GTP结合位点结合,抑制FtsZ的GTP酶活性。结论化合物202E是活性较好的结核分枝杆菌FtsZ抑制剂。     

肠道微生物群在中药治疗非酒精性脂肪性肝病中的作用

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与遗传和环境因素密切相关的代谢性疾病,可发展为肝纤维化、肝硬化,以致肝细胞癌。近年来, NAFLD的患病率逐年上升,目前还缺乏明确的药物治疗方法。中药在NAFLD防治中具有很大潜力但相关机制研究较少。越来越多的证据表明,肠道菌群与NAFLD的发生发展密切相关,肠道菌研究为阐明中药的作用机制开辟了新的视野。本文旨在介绍肠道菌群与NAFLD发生、发展的关系,解析肠道菌群调节在以中药为基础的NAFLD治疗中的作用及机制,以期为相关研究提供参考。     

HCV非结构蛋白NS5A基因的斑马鱼肝脏表达模型

目的建立HCV非结构蛋白NS5A基因在斑马鱼肝脏特异表达的模型,研究HCVNS5A的体内作用机制并初步探讨HCVNS5A对肝病理标志基因表达的影响。方法克隆肝基因表达调控序列——斑马鱼脂肪酸结合蛋白基因增强子序列（eFABP）和HCV非结构蛋白基因NS5A序列,利用CMV启动子序列,构建HCVNS5A基因和报告基因绿色荧光蛋白基因eGFP在肝脏共表达的基因构件pFC-5AiR。经细胞转染实验验证所建构件的报告基因DsRed表达红色荧光蛋白后,将该基因构件线性化并经显微注射导入斑马鱼胚胎;通过荧光显微镜观察和整体原位杂交技术对目的基因NS5A的表达进行定位,验证其肝脏特异性表达。采用RT-PCR方法和westernblot方法对HCVNS5A基因的转录和翻译水平进行检测;并检测肝脏病理相关的标志基因的转录水平变化。结果细胞转染实验证明基因构件pFC一5AiR的报告基因DsRed能够在肝癌细胞Huh7中表达;斑马鱼胚胎注射该基因构件后在肝脏能够观察到红色荧光蛋白基因DsRed的表达;RT-PCR和westemblot结果显示HCV基因NS5A能够在斑马鱼体内正确表达;原位杂交结果进一步证明了NS5A的表达集中在斑马鱼肝脏内。进一步RT-PCR检测表明HCVNS5A在斑马鱼体内的表达可导致一些肝代谢和纤维化相关基因的上调,如Adiponectin、LDLR、Argsyn、TGF-β和HMGR等,推测NS5A在肝脏脂肪病变和纤维化中具有一定作用。结论成功建立了斑马鱼肝脏表达HCVNS5A的模型;初步数据表明HCVNS5A在斑马鱼体内的表达与部分肝代谢和纤维化标志基因的异常表达相关;该模型可以用于HCVNS5A的体内病理机制的研究。     

小檗碱治疗代谢性疾病抗炎作用的研究进展

慢性非可控性炎症在代谢性疾病如糖尿病、非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）和动脉粥样硬化的发生和发展过程中发挥关键作用。天然产物小檗碱对代谢性疾病有良好的改善作用并对其伴随的慢性炎症有明显的抑制作用。研究显示小檗碱主要通过调控AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）、核转录因子-κB（NF-κB）和肠道菌群来发挥抗炎活性。对小檗碱抗炎作用的深入研究将为其应用于临床治疗代谢性疾病提供进一步科学依据。     

老年单纯性左心舒张功能不全误诊原因分析

单纯性左心舒张功能不全是指左心室收缩功能正常但快速充盈减少和 /或充盈压增高 ,心搏量下降 ,从而引起的心功能不全。临床上易误诊、漏诊。现就本院 68例误诊病例进行分析。1　临床资料本组 68例 ,男 43例 ,女 2 5例 ,年龄均 >60岁。原发病 :高血压病 5 9例 ,冠心病 1 2例 ,肥胖8例 ,2型糖尿病 6例。所有病例临床表现主要为阵发性干咳 ,以夜间平卧位明显 ,坐起或直立位减轻 ,均有劳累后胸闷、气急。病程 5～ 5 7d。X线胸片 61例均提示肺透亮度减低及肺纹理增多 ,其中 2 9例可见叶间胸膜增厚 ,9例肋膈角变钝。左室肥厚 2 1例 ,心肌劳损 36…     

糖尿病动物模型及研究进展

糖尿病是一种常见的具有遗传倾向的葡萄糖代谢和内分泌障碍，是由于绝对性或相对性胰岛素分泌不足引起的，近半个世纪来，糖尿病患病率和死亡率有明显上升趋势，在我国已成为继心血管疾病、肿瘤之后列第三位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病。本文就各种类型的糖尿病动物模型进行了综述。     

检测HIV-1逆转录酶活性的ELISA方法的建立

目的　建立检测HIV 1逆转录酶活性的ELISA方法。方法　应用包被的模板和逆转录酶将生物素标记的dUTP掺入 ,用辣根过氧化物酶反应系统检测酶活性。结果　建立了检测HIV 1逆转录酶活性的ELISA方法 ,并与同位素掺入检测法进行了比较 ,用ELISA法检测了PFA等药物对HIV 1逆转录酶活性的抑制作用 ,对ELISA法的重复性、稳定性及用于抑制剂研究的特异性和敏感性进行了评价。结论　HIV 1RT活性的ELISA检测法具有简便、快速、重复性好、特异性强的特点 ,适用于抗HIV 1逆转录酶药物的大样品量筛选工作 ,并可发展成为高通量技术     

心血管专业临床药学博士培养模式的探索与实践

目的：探索我国高水平心血管专业临床药学博士(Pharm. D)培养模式,为提高我国专科临床药学实践教学质量做参考。方法：通过Pubmed、中国知网等工具检索国内外Pharm. D教育、毕业后培训和药学实践相关文献,参考美国Pharm. D先进教育经验,结合2019年北京协和医学院Pharm. D改革试点班设置,探讨适合我国心血管专业Pharm. D教学培养和临床实践模式。结果：从Pharm. D培养理念和目标、教学基地、教学大纲与课程、教学方法、临床实践、教学效果评估等多方面进行探讨,北京协和医学院心血管专业Pharm. D培养已形成较完善体系。结论：北京协和医学院设置的心血管专业Pharm. D 培养基地,已建立并探索特色的教学培养模式,对我国高水平临床药学实践教学质量的提高有一定的借鉴意义。