下调MARCH8基因的表达对宫颈癌Siha细胞侵袭、迁移与增殖的影响

目的：研究下调MARCH8基因表达对人宫颈癌Siha细胞侵袭、迁移、增殖以及克隆的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：构建特异性针对MARCH8基因的siRNA片段,并将其通过脂质体介导转染至宫颈癌Siha细胞,同时设立转染无义序列的阴性对照组。分别采用Real-time PCR法与蛋白质印迹法检测转染后,细胞中MARCH8在mRNA和蛋白水平上的表达改变。通过Transwell小室实验、划痕实验检测MARCH8表达下调对细胞侵袭、迁移能力的影响,通过CCK-8法、细胞平板克隆实验检测MARCH8表达下调对细胞增殖、克隆形成能力的影响,并采用蛋白质印迹法检测MARCH8基因表达下调对基质金属蛋白酶9（MMP9）,波形蛋白（Vimentin）以及增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的影响。最后采用蛋白质印迹法检测MARCH8基因表达下调,对Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin以及E钙黏蛋白（E-cadherin）表达的影响。结果：与转入siRNA-NC组相比,转入siRNA-MARCH8组细胞MARCH8在 mRNA和蛋白表达水平上均明显降低,细胞的侵袭、迁移以及增殖和克隆形成能力明显被抑制（P<0.05）,且侵袭标记蛋白MMP9,Vimentin以及增殖标记蛋白PCNA的表达也明显下降。MARCH8基因表达成功下调后,转入siRNA-MARCH8组细胞中β-catenin蛋白的表达水平较阴性对照组明显下降（P<0.05）,而E-cadherin蛋白的表达水平明显升高（P<0.05）。结论：下调MARCH8基因的表达可以抑制宫颈癌Siha细胞的侵袭、迁移、增殖和克隆能力,其机制可能与Wnt/β-catenin通路的抑制有关。     

基于UHPLC-QE-MS分析结合网络药理学探讨小叶黄杨生物碱治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的 鉴定小叶黄杨中生物碱类化学成分，探讨治疗阿尔茨海默病的物质基础和作用机制。方法 表征小叶黄杨生物碱成分，并利用PubChem、SwissADME、Swiss Target Prediction、Genecards和OMIM等数据库获取小叶黄杨生物碱的活性成分和对应靶点，以及阿尔茨海默病的相关靶点；运用Cytoscape3.9.0软件绘制“成分-靶点”网络图；运用String平台构建蛋白互作网络图；运用微生信在线绘图工具进行通路富集分析可视化；用AutodockTools-1.5.6软件对筛选出的核心成分做分子对接。结果 鉴定小叶黄杨生物碱成分23个，筛选有效成分19个，对应靶点216个；筛选阿尔茨海默病靶点880个，药物-疾病交集靶点49个；GO富集分析主要相关的生物过程有化学性突触传递，顺行跨突触信号，跨突触信号等；KEGG通路富集分析中神经活性配体-受体相互作用，5-羟色胺能突触，cAMP信号等为主要信号通路。分子对接显示筛选的核心靶点和核心成分均有较强结合力。结论 本研究初步证明了小叶黄杨生物碱成分可以多成分、多靶点、多通路共同作用治疗阿尔茨海默病，为进一步深入研究小叶黄杨生物碱对阿尔茨海默病作用的物质基础以及作用机制提供参考。     

N-乙酰半胱氨酸对肝星状细胞核因子κB的影响

目的　阐明N乙酰半胱氨酸(NAC)对肝星状细胞(HSC)核因子κB(NF-κB)结合活性和环氧合酶 2(COX-2)表达的影响机制。方法　体外培养大鼠 HSC-T6 细胞株,MTT法检测 NAC对HSC增殖的抑制作用。分别予NAC(1 mmol/L)处理 1 h;NAC和肿瘤坏死因子(TNF)α联合干预(先予 NAC处理1 h,再予TNFα干预1 h);TNFα100 ng/ml处理1 h。凝胶电泳移动抑制实验检测NF κB的结合活性。免疫蛋白质印迹检测相应的胞质内NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达。免疫组化观察 HSC-T6NF-κB表达的核转移。激光共聚焦检测NAC对 HSC-T6 中 COX-2 表达的影响。结果　NAC对 HSC具有明显的抑制作用。TNFα可诱导 NF-κB结合活性,而 NAC可显著抑制 TNFα诱导的 NF-κB结合活性。TNFα处理后 IκBα表达减弱,NAC处理后 IκBα表达增强。TNFα刺激 1 h后,NF κB表达从细胞质转移至细胞核内。NAC预处理后再予TNFα刺激,NF κB表达主要位于细胞质,很少发生核转移。HSC T6经TNFα处理后细胞内COX 2表达明显高于NAC和TNFα联合处理组以及正常对照组(P<0.05);NAC和TNFα联合处理组与正常对照组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论　NAC可抑制HSC增殖,抑制HSC-NF κB结合活性和COX-2表达。     

一氧化氮和内毒素在梗阻性黄疸致病机制方面的作用

梗阻性黄疸（obstructive jaundice）是临床常见的表现。梗阻性黄疸患者术后并发症和死亡率较高，常死于感染和败血症，提示机体术前的免疫功能受到了抑制。梗阻性黄疸可使网状内皮系统功能降低，细菌清除能力减弱。肠道来源的细菌和内毒素逃脱肝脏枯否细胞的监视，进入血液循环。有研究发现梗阻性黄疸常并发肠源性内毒素血症，内毒素激活枯否细胞，产生大量炎性介质，如一氧化氮（NO），肿瘤坏死因子α（TNFα）及氧自由基等。     

从临床医学八年制与五年制医学生的不同点看新时期临床实习教学应对策略

临床医学八年制是我国近几年医学教育中建立起的长学制教学模式,临床医学五年制是我国长期的医学教育模式。临床实习是两者都不能忽视的关键环节,是培养医学人才的必要途径。文章联系临床医学八年制、五年制实习教学工作的实践,分析其各自特点提出新的教学应对方法。     

抑癌蛋白维生素D3上调蛋白1在肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨肿瘤抑制蛋白维生素D3上调蛋白1(vitamin D3 up-regulated protein 1,VDUP1)在肺癌组织中的表达及其与肺癌临床、病理之间的关系和意义.方法 应用RT-PCR及Western blot分别检测35例肺癌患者的癌组织及癌旁正常组织VDUP1 mRNA和蛋白表达水平,进一步按照癌...     

原发性侵袭型肺曲霉病一例

患者男性，43岁，因“发热，咳嗽，咳痰，气喘2周，痰中带血1d”于2003年7月24日转入我院。患者2周前受凉后出现发热，体温38℃左右，咳嗽，咳少量黄白色黏痰，伴胸闷，气喘，无盗汗，胸痛，咯血等不适。7月18日当地医院X线胸片报告正常（图1），似诊“支气管哮喘”，予左旋氧氟沙星，头孢哌酮，氨茶碱，地塞米松（10mg/d，共3d）等药物治疗1周，效果差，仍有发热，胸闷，气喘明显加重，     

PBL结合情景模拟教学法在八年制医学生2010版心肺复苏指南教学中的运用

目的:探讨以问题为基础的教学法(PBL)结合情景模拟教学法在八年制医学生2010版心肺复苏指南教学中的运用效果.方法:将八年制医学生40名分为研究组和对照组各20例,研究组采用PBL和情景模拟教学相结合进行CPR培训,对照组采用常规方法培训,比较两组教学效果.结果:研究组学员的理论和实践考核成绩均明显优于对照组,P <0.05.结论:PBL结合情景模拟教学法有助于学员掌握心肺脑复苏的基本理论和CPR操作技能,建议推广应用.     

癌痛患者三阶梯用药后不良反应干预及措施

目的:通过对癌痛患者三阶梯用药后出现不良反应进行干预和指导,患者恶心、呕吐、便秘、排尿困难减轻,阐述如何具体干预和指导。方法:采用询问法,通过对照组42例患者和干预组62例患者的电话随访和家居随访,进行跟踪记录。结果:两组患者比较,差异有统计学意义(P<0.05),经过干预后的患者不良反应明显减轻。结论:对患者及时进行干预和指导是很有必要的。