基于一项“多中心、随机对照、双盲”的临床研究探讨影响肾功能进展的因素＊

目的 基于一项前瞻性、多中心、随机、安慰剂对照、双盲的临床试验结果，探索影响肾功能进展的因素。方法 选择343例慢性肾脏病3期的患者，将入组的患者随机分为治疗组和对照组，治疗组给予中药颗粒剂口服，对照组给予安慰剂口服。两组患者均给予基础治疗，疗程24周。评估两组患者肾功能变化情况。治疗结束后，根据患者肾功能情况，以CKD3期为界限，将病情好转者定为A组，该组患者血肌酐下降至CKD2期或CKD1期；病情恶化者为B组，该组患者血肌酐上升至CKD4期或CKD5期；病情稳定者为C组，该组患者血肌酐稳定，仍处于CKD3期，分析各组患者指标的差异。结果 经过24周观察，比较两组患者的血肌酐（Scr）水平，治疗组130.78 ± 32.55 μmol·L^-1，对照组149.12 ± 41.27 μmol·L^-1，两组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。eGFR水平比较，治疗组55.74 ± 50.82 mL/min/1.73 m²，对照组44.46 ± 12.60 mL/min/1.73 m²，差异有统计学意义（P < 0.05）。研究结束后，A组患者血尿酸水平明显低于B组和C组的患者，A组患者血红蛋白水平明显高于B组和C组的患者，A组患者的血磷水平明显低于B组和C组的患者。结论 中药颗粒剂在24周内可以明显改善肾功能，患者的血尿酸水平、血红蛋白及血磷水平对肾功能有一定的影响。     

大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达

目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。     

糖尿病肾病ETFβ表达变化与脂毒性关系研究

目的 通过检测ETFβ在糖尿病肾病中的改变, 探讨其与脂毒性的关系。方法 体内实验采用腹腔注射链脲佐菌素合并单侧肾切除建立糖尿病肾病模型, 并评价肾小管损伤情况, 检测ETFβ在肾皮质中的表达变化。体外建立脂肪酸诱导肾小管细胞NRK 52E凋亡模型, 构建ETFβ重组质粒, 并将其转染至NRK 52E细胞, 观察ETFβ过表达对脂肪酸诱导细胞凋亡的作用。结果 链脲佐菌素合并单侧肾切除诱导的糖尿病肾病大鼠模型中, 肾小管明显损伤, ETFβ mRNA 和蛋白表达均下降。脂肪酸可诱导NRK 52E细胞凋亡, 过表达ETFβ可减少凋亡。结论 糖尿病肾病模型中ETFβ表达下降, 过表达ETFβ可降低脂肪酸诱导的肾小管细胞凋亡。     

浅谈中药"毒"性与炮制解毒

中药毒性是中药药性理论的基本性能之一。我国医家对中药毒性认识历史悠久,并采用配伍、炮制等方法达到增效、减毒的作用。本文分别从中药药性与毒性、中药炮制作用及方法、中药炮制减毒的现代研究、中药毒性与炮制的展望几方面归纳总结。对于中药毒性,在基础研究和临床应用中,应正确对待,理性认识,合理用药。     

二氢生物喋呤还原酶减轻脂肪酸诱导的细胞凋亡的机制研究

目的 探讨二氢生物喋呤还原酶(QDPR)高表达对脂肪酸(PA)诱导的细胞凋亡的作用.方法 HEK293T细胞转染实验分为A、B、C 3组,A组为空载体转染组,B组为经过PA刺激的空载体转染组,C组为经过PA刺激的QDPR重组质粒转染组.首先将空载体及构建的QDPR重组质粒分别转染至HEK293T细胞,培养24 h后采用0. 5 mmol/L PA刺激上述细胞,将没有经过PA刺激的空载体组细胞、PA刺激的空载体组细胞和PA刺激QDPR重组质粒组细胞三组细胞继续培养24 h后收集细胞.采用四氢生物喋呤(BH4)和活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测3组BH4和ROS的生成量;采用Western blot法检测3组凋亡相关蛋白Beclin 1 、Caspase 3和Beclin 2的表达.结果 ①转染细胞后,QD-PR融合蛋白成功表达;②与A组相比,B组的BH4生成量差异无统计学意义;与B组相比,C组BH4生成量明显增多(P<0.05);③与A组相比,B组的ROS生成量明显增加(P<0.05);与B组相比,C组ROS生成量明显下降(P<0. 05);④Western blot结果显示:与A组相比,B组经过PA刺激后细胞中Beclin 1和Caspase 3表达水平显著上调(P< 0.05),Beclin 2表达水平下降(P<0. 05);QDPR过表达后C组Beclin 1和Caspase 3表达水平显著下调(P<0. 05) , Beclin 2表达水平升高(P<0.05).结论 QDPR高表达后,可以刺激BH4的生成,同时能降低PA诱导的ROS的生成量,还可以降低细胞凋亡相关蛋白Beclin 1和Caspase 3的表达,增强抗凋亡蛋白Beclin 2的表达,提示其可能通过调节 BH4和ROS含量影响细胞凋亡.     

糖足洗液对糖尿病足小鼠皮肤溃疡的影响

目的探讨糖足洗液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠皮肤溃疡的疗效及机理。方法昆明种小鼠50只,随机抽取10只为正常对照组,其余小鼠在禁食12h后均按150mg/kg腹腔注射STZ造模,并随机分为模型对照组、单用胰岛素组、糖足洗液组、金黄散对照组,每组10只。5组小鼠均在背部单侧制造直径约8mm的皮肤溃疡模型。除正常对照组和模型对照组外,其余3组均注射胰岛素,其中2组分别予糖足洗液及金黄散湿敷。动态观测各组小鼠体重、创面大小、空腹血糖(FBG)等指标。连续用药30d后禁食8h,测定C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标。结果糖足洗液组糖尿病小鼠溃疡时间早于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01),FBG、CRP、IL-6、TNF-α均低于模型对照组,体重高于模型对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论在胰岛素有效控制血糖的前提下,应用糖足洗液能够缩短溃疡愈合时间、促进肉芽组织生长、促进创面愈合,其机制与降低炎症细胞因子水平有关。     

系统化营养管理在慢性肾脏病患者中的应用效果分析

目的 探讨营养管理在慢性肾脏病患者中的应用效果.方法 选取2015年1月至2019年12月在江苏省中医院和金堂县第一人民医院就诊的534名患者,将加入营养管理的患者纳入为干预组(259例),未加入营养管理的患者纳入为对照组(275例),进行6个月和12个月的随访,比较两组患者的血红蛋白、血清白蛋白、肾小球滤过率、血肌酐...     

EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨

目的：构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞（human embryonic kidney 293T,HEK293T）中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响.方法：提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系.Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响.结果：（1）两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变.（2）转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;（3）TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达;（4）EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高（P〈0.05）.结论：成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒（L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5）,可在HEK293T细胞中过表达.为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础.     

糖尿病肾病小鼠模型的研究现状

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已成为导致终末期肾病的主要原因之一。小鼠是研究人类疾病最常用的实验动物优势明显。目前常用的DN小鼠模型难以完全模拟人类DN病变,限制了DN发病机制和治疗措施的进展。近年来应用基因工程技术和杂交技术建立了一些新的DN小鼠模型,其中部分模型能较好地模拟人类DN的典型病变。本文总结常见DN小鼠模型特点的基础上,对新建立的DN小鼠模型疾病表现、肾病特点及应用进行了分析,从而有助于DN发病机制的深入认识及DN研究中动物模型的合理选择。     

丁甘仁养阴润燥法治疗消渴探析

丁甘仁(1865—1926年),清末民初孟河四大名医之一。丁氏以擅治温病及喉科闻名,对内伤杂病亦颇有心得,著有《丁甘仁医案》等书。西医学中的糖尿病属中医学消渴范畴,是一种病程长、并发症多,严重危害人类健康的疑难病。近年来发病率以惊人的速度迅速增高。中医药在改善其症状、防治并发症等方面都具有西医西药不可比拟的优势和特色。丁甘仁在遵循经典的基础上,分三消论治消渴病,以养阴润燥为治疗法则,对消渴病的治疗颇有心得。精选丁甘仁治疗消渴病案例3则,逐一进行浅析,冀学以致用,以启发更多杏林学子应用于临床。