液相色谱-质谱联用法测定人血浆中富马酸单甲酯药物浓度及应用

目的： 建立液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中富马酸单甲酯的方法,并应用于检测中国健康受试者血浆中富马酸单甲酯的浓度。方法： 血浆样品用醋酸铵稀释后经过96孔固相萃取板前处理,以含0.5%甲酸的水溶液和甲醇作为流动相,采用梯度洗脱方式在ACE Excel 3 C₁₈-AR（2.1 mm×50 mm）色谱柱上进行分离,每个样品分析时间为4 min。在电喷雾负电离模式下,多反应监测检测离子对m/z 129.0→m/z 85.0（富马酸单甲酯）和m/z 134.0→m/z 90.0（内标,富马酸单甲酯-d₅）。结果： 富马酸单甲酯线性范围为4~1 200 ng·mL^-1（r²>0.99）,定量下限为4 ng·mL^-1,日内和日间精密度RSD ≤ 9.7%,准确度相对偏差均在±4.2%以内,平均回收率RSD ≤ 6.6%,基质效应在98.3%~100.9%之间。稳定性实验中,各种储存条件不影响对药品浓度的准确测定。结论： 本方法运行时间短,灵敏度高,重复性好,适用于富马酸单甲酯血浆浓度定量检测。     

护理干预对腰麻下行单侧下肢手术患者术后自行排尿的影响

腰麻为蛛网膜下腔麻醉的简称,是将一定浓度的局麻药物注入蛛网膜下腔,阻断部分节段脊神经而达到麻醉相应区域的作用[1].其麻醉效果迅速、明确,肌肉松弛满意,特别适用于下肢手术,但为了解决腰麻产生的术后排尿困难,常常在手术开始前就预先留置导尿.由于机械性损伤、疼痛不适、感染等并发症的存在,导尿给患者带来了很大痛苦.我们一直致力于寻找减少术后导尿的办法,现将我科于2010年11月～2011年3月期间对70例腰麻下行单侧下肢手术的患者给予护理干预后的结果分析如下.     

湖南农村老年女性艾滋病感染者自感羞辱与社会支持

目的 了解湖南农村老年女性人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）感染者自感羞辱水平及社会支持的情况。方法 选取永州农村地区老年女性HIV感染者为研究对象,于2017年1月~2018年1月调查其自感羞辱程度以及社会支持现状。结果 农村老年女性感染者其自感羞辱总得分为（33.36±9.31）分,高于同人群老年男性（t=11.59,P<0.001）,责备维度的得分低于老年男性（t=-6.14,P<0.001）。汉族、依靠儿女赡养的、独自居住老年女性HIV感染者自感羞辱程度较高,差异具有统计学意义（均有P<0.05）。此地区老年女性的社会支持程度较低,其客观支持得分与社交距离以及歧视维度的得分呈负相关（均有P<0.05）;主观支持与责备维度的得分呈正相关（r=0.27,P=0.005）;支持的利用度得分与责备维度的得分呈正相关（r=0.41,P<0.001）。结论 此地区老年女性HIV感染者的自感羞辱程度较同地区男性更高,而社会支持程度较非HIV感染的老年人群低。     

POSSIBLE REASONS FOR TP53 ACCUMULATION IN NASO-PHARYNGEAL CARCINOMA USING ATLAS HUMAN CANCER cDNA EXPRESSION ARRAY

The incidence of nasopharyngeal carcinoma (NPC) in southern China and southeastern Asia is the highest in the world. The etiology of NPC is very complicated and has been associated with Epstein-Barr virus (EBV), chemical carcinogens and genetic susceptibility[1]. Indeed, multi-factors may finally lead to the alterations of gene expression pattern of NPC. Therefore, to explore the changes of gene expression will provide direct evidence to the underlying mechanism of NPC pathogenesis. T…     

NEK2通过抵抗肝癌细胞衰老促进肝癌进展

目的:肝癌是全球第6大常见的恶性肿瘤,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占所有肝癌患者的85％～90％.HCC具有起病隐匿、进展快、复发早、易耐药和预后差的临床特点.中心体相关激酶2(NIMA related kinase 2,NEK2)是细胞周期调控蛋白激酶,在有丝分裂中调节细胞周期...     

高效液相色谱-串联质谱法测定雷公藤制剂中5种有效成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法测定雷公藤制剂中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱、雷公藤次碱和雷公藤红素的含量.方法:采用电喷雾正电离模式和多反应监测模式.雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤晋碱和雷公藤次碱含量测定,以含5 mmol·L-1碳酸氢铵的水溶液和纯甲醇作为流动相,采用梯度洗脱方式在ACE UltraCo...     

罗格列酮对高胰岛素培养的内皮细胞一氧化氮的影响及其机制研究

目的观察罗格列酮（RGZ）对高胰岛素培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）NO浓度和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酯酰肌醇3激酶（P13K）和蛋白激酶B（PKB）表达的影响,探讨RGZ改善高胰岛素状态下内皮功能障碍的信号转导机制。方法高浓度胰岛素培养HUVEC72h,并用不同浓度的RGZ进行干预。检测NO浓度,PI3K mRNA的表达,PKB、eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473（PKB-Ser473）、eNOS丝氨酸1177（eNOS-Ser1177）的磷酸化表达。结果高浓度胰岛素培养HUVEC能呈剂帚和时间依赖性地降低N0的浓度,抑制内皮细胞P13KmRNA表达和PKB-Ser473、eNOS-Ser1177的磷酸化。用RGZ干预能硅著升高高胰岛素培养的内皮细胞NO的浓度和PKB、eNOS的磷酸化,增强PI3KmRNA表达;eNOS和P13K阻断剂均能阻断RGZ对高胰岛素培养的内皮细胞中NO浓度的升高,PI3K阻断剂还能阻断RGZ对高胰岛素培养内皮细胞PKB、eNOS的磷酸化。结论高胰岛素能下调P13K／PKB／eNOs信号通路而抑制内皮细胞NO的产生,RGZ能通过上调PI3K／PKB通路而增强高胰岛素培养的内皮细胞eNOS的活性和NO的产生。     

鼻咽癌组织中EB病毒潜伏相关基因的表达

目的： 通过检测鼻咽癌组织中EB病毒的潜伏膜蛋白LMP1的序列以及LMP1、EBNA1、EBNA2的mRNA表达来探讨EB病毒的感染状态及其表达产物与鼻咽癌的关系。方法: 应用PCR法检测鼻咽癌组织中LMP1 DNA的存在，并对鼻咽癌来源的LMP1和EB病毒永生化狨猴B淋巴细胞系B95-8来源的LMP1进行测序，比较序列的差异。利用巢式RT-PCR检测鼻咽癌组织中LMP1、EBNA1、EBNA2的mRNA表达。结果: 47例鼻咽癌组织均含有LMP1 DNA，所有鼻咽癌来源的LMP1 DNA与B95-8来源的LMP1 DNA序列比较均存在着多个单核苷酸变异，最明显的是XhoⅠ酶切位点的丢失。测序后显示鼻咽癌来源的LMP1 DNA有30个核苷酸的丢失。巢式RT-PCR显示LMP1、EBNA1、EBNA2在鼻咽癌中的mRNA表达率分别为76.6％、80.0％和74.5％。其中EBNA1的表达是由Qp启动的，而B95-8细胞中EBNA1的表达是由Cp启动的。结论: 鼻咽癌中EB病毒的作用途径比较复杂，LMP1、EBNA1、EBNA2等潜伏期基因还有早期裂解基因BARF1均可能参与鼻咽癌的发生发展过程。     

罗格列酮对人脐静脉内皮细胞NO和PI3K/PKB/eNOS信号通路的影响

目的:观察罗格列酮对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)表达的影响,探讨罗格列酮改善内皮功能的信号转导机制.方法:首先观察罗格列酮对内皮细胞NO影响的时效和量效关系,然后加用eNOS和PKB信号阻断剂进行干预.用Griess重氮化反应法检测NO浓度,RT-PCR方法检测PI3K,PKB及eNOSmRNA的表达,Western免疫印迹方法检测PKB,eNOS总蛋白和PKB丝氨酸473(PKB-Ser473),eNOS丝氨酸1177(eNOS-Ser1177)的磷酸化表达.结果:罗格列酮呈剂量和时间依赖性地升高内皮细胞NO浓度,不同浓度的罗格列酮培养内皮细胞均能升高PI3K mRNA表达和PKB-Ser473,eNOS-Ser1177磷酸化,但对PKB和eNOS表达均无影响;eNOS阻断剂L-NAME能完全阻断罗格列酮培养的内皮细胞NO浓度的升高,PI3K阻断剂LY294002能阻断罗格列酮诱导的NO产生和PKB,eNOS的磷酸化.结论:罗格列酮能通过激活PI3K/PKB/eNOS信号通路而增强内皮细胞NO的浓度,改善内皮功能.