气相色谱-质谱联用结合代谢组学方法研究不同极化状态下小胶质细胞的代谢差异

目的 运用代谢组学方法阐明经典激活型(M1型)、选择活化型(M2型)和静息态小胶质细胞的代谢差异。方法 将体外培养小鼠小胶质细胞系(BV2)细胞,分为M1组、M2组和静息态组,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测特异性mRNA的表达差异以确定细胞极化状态,采用基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术的代谢组学方法阐明代谢变化。结果 发现M1型与静息态细胞的差异代谢物15个,M2型与静息态细胞的差异代谢物15个。结论 通过代谢组学方法可以找到小胶质细胞极化的差异代谢物,并解释其可能的极化机制,为神经退行性疾病的防治提供了理论依据。     

采用流式细胞分选术区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞

目的 建立通过流式细胞术区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞的方法。方法 成年C57BL/6小鼠建立双侧颈总动脉狭窄模型,分别采用PLX5622或氯磷酸盐脂质体给药处理。分离、匀浆、重悬后的脑和脊髓组织,通过Percoll密度梯度离心,得到单个核细胞悬液。进一步采用抗CD45、抗CD11b和抗Ly6C抗体,流式分选获得小胶质细胞(CD11b+ CD45low Ly-6C-^细胞群)和浸润巨噬细胞(CD11b+ CD45high Ly-6C+^细胞群),并分析和验证PLX5622和氯磷酸盐脂质体两种给药范式获得的处理效果。结果 通过抗CD45、抗CD11b和抗Ly6C三种抗体可以有效区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞。PLX5622给药组的小胶质细胞显著减少,而氯磷酸盐脂质体给药组的浸润巨噬细胞显著减少。结论 本方法利用流式分选术有效区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞;PLX5622和氯磷酸盐脂质体两种给药范式可分别选择性清除中枢神经系统内的小胶质细胞和浸润的巨噬细胞。     

神经生物学课堂教学的几点体会

大脑是人类终极探索的目标之一,美英等西方国家在21世纪第一个十年纷纷投入巨资启动脑研究计划,我国也将很快启动国家级脑研究工程。作为生命科学领域中最重要和最为活跃的学科之一,神经生物学正是一门以神经系统为研究对象的内容复杂、研究层次多,且同多门学科交叉的综合学科。虽相比传统学科起步晚,但发展迅速,已成为国内多家大学医学和生物学专业本科生的必修课。我科室作为国内成立较早的神经生物学教研室,始终重视     

α-synuclein硝基化修饰在帕金森病中的研究进展

帕金森病是以中脑黑质多巴胺能神经元病变和胞内路易小体形成为特征的疾病.氧化应激导致的α-synuclein蛋白硝基化修饰很可能与帕金森病发生、发展相关.本文简述了α-synuclein和硝基化α-synuclein的理化性质、结构特征,综述了近年来关于其在生理和病理条件下的作用和效应方面的研究进展,并进一步探讨了导致帕金森病发生、发展的可能机制,为防治帕金森病提供新的线索.