COX-2、CCR7表达与乳腺癌临床病理参数的关系

目的 探讨环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)、C-C家族趋化因子受体7(C-C chemokinereceptor 7,CCR7)表达与乳腺癌临床病理学参数的关系,并分析COX-2、CCR7表达的相关性.方法 用免疫组织化学检测乳腺癌组织80例、乳腺癌癌旁组织15例中COX-2、CCR7的表达,分析其表达与临床病理学参数的关系,对COX-2、CCR7的表达进行相关性分析.结果 在乳腺癌组织,COX-2、CCR7均高表达,表达率分别为42.5%和38.8%,两者表达有相关性(P<0.05).COX-2、CCR7高表达均与肿瘤的病理分化、肿瘤大小、淋巴转移、TNM分期相关(p<0.05),与组织学分型、患者年龄无关.结论 COX-2、CCR7在乳腺癌组织高表达,两者表达有相关性,且与乳腺癌临床病理学参数有关.提示临床上联合检测COX-2和CCR7对乳腺癌转移的预测可能会有所帮助.     

人β-防御素-2在涎腺肿瘤及涎腺炎症中的表达及其意义

目的 研究涎腺良性肿瘤组织、恶性肿瘤组织和涎腺炎症中人β-防御素-2（HBD-2）mRNA和蛋白的表达特征。方法 对不同涎腺组织,采用聚合酶链反应（PCR）、实时聚合酶链反应（Real-Time PCR）和免疫组化检测HBD-2的表达,并分析HBD-2 mRNA和蛋白在涎腺良性肿瘤组织、恶性肿瘤组织、炎症组织和正常涎腺组织中的表达差异。结果 与涎腺正常组织比较,良性肿瘤组HBD-2 mRNA表达量为其6.468倍,显著高于涎腺正常组织组（P<0.05）;恶性肿瘤组为其0.334倍,显著低于涎腺正常组织组（P<0.05）;涎腺炎症组为其10.563倍,显著高于涎腺正常组织组（P<0.05）。HBD-2不仅在这些组织的细胞质中有表达,而且在恶性组织中的细胞核也有表达。结论 HBD-2在涎腺良性肿瘤组织及涎腺炎症组织中高表达,在涎腺恶性肿瘤组织中低表达,其蛋白发生核转移。     

siRNA CCR7抑制乳腺癌细胞转移的体外实验研究

目的 探讨CCR7对肿瘤转移的影响.方法 构建siRNA-CCR7载体,稳定转染表达CCR7的肿瘤细胞株MDA-MB-231,在mRNA和蛋白水平检测其对肿瘤细胞CCR7的抑制作用,再用趋化及侵袭,实验检测其对肿瘤细胞趋化、侵袭能力的影响.结果 稳定转染siRNA1、siRNA2的MDA-MB-231细胞,在mRNA、蛋白水平均能有效抑制肿瘤细胞CCR7表达,并能抑制CCL21刺激的趋化和侵袭能力.结论 siRNA-CCR7能有效抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的趋化和侵袭,该实验结果对进一步探讨CCR7在肿瘤转移中的作用、探讨CCR7化学抑制剂或中药成分具有重要启示作用.     

丁酸梭菌对肝缺血再灌注损伤大鼠的潜在保护作用

摘要：目的:采用代谢组学方法研究丁酸梭菌预处理肝缺血再灌注损伤大鼠代谢物的变化和可能涉及的代谢途径。方法:将24只SD大鼠随机分为3组:假手术、模型组、益生菌组(术前5 d灌胃丁酸梭菌,2.5×108?CFU·kg-1·d-1),每组8只。模型组和益生菌组大鼠构建肝脏缺血再灌注损伤模型。检测大鼠血清中ALT和AST的活性水平。利用超高效液相色谱-三重四级杆-线性离子阱质谱（UPLC-QTRAP-MS/MS）采集大鼠代谢物信息,并采用主成分分析法、正交偏最小二乘法判别分析法筛选差异代谢物,并做代谢通路分析。结果:与模型组相比,丁酸梭菌预处理后筛选出谷氨酸、谷氨酰胺、甘油磷胆碱、牛磺酸、乳酸、肌醇、琥珀酸盐等35种差异代谢物,主要涉及谷氨酰胺和谷氨酸代谢通路、牛磺酸和牛磺酸代谢通路等。与模型组相比,丁酸梭菌干预可显著降低肝缺血再灌注损伤大鼠血清ALT、AST活性（P<0.05）。结论:代谢组学方法结果表明丁酸梭菌能够调节大鼠缺血再灌注后的代谢平衡,从而起到保护肝缺血再灌注损伤大鼠的作用,这为今后研究丁酸梭菌治疗肝缺血再灌注损伤奠定了基础。     

白花蛇舌草LC-MS指纹图谱的研究

目的:建立白花蛇舌草的LC-MS指纹图谱。方法:采用LC-MS法,检测不同产地同一季节采收的10批样品色谱特征,与此同时和黄毛耳草(两者都属于茜草科耳草属植物)进行比较。结果:建立白花蛇舌草指纹图谱。结论:LC-MS指纹图谱具有特异性,可以评价和全面控制白花蛇舌草质量。     

注射用黄芪冻干粉对大鼠和犬的长期毒性研究

目的 考察连续给予注射用黄芪冻干粉对大鼠和Beagle犬的长期毒性反应,以评价其长期用药的安全性.方法 根据药效学实验的有效剂量,确定长毒试验的高、中、低剂量组.分别连续对SD大鼠和Beagle犬静脉给药3个月,观察SD大鼠和Beagle犬的生长发育情况,摄食量,并进行血常规、血生化检测和主要脏器的病理组织学检查.结果 连续使用该冻干粉3个月后大鼠和犬一般体征、血液学、血清生化学、尿常规和摄食量等均未发现明显异常变化.结论 黄芪冻干粉安全剂量范围较大,对SD大鼠和Beagle犬无明显毒性反应,可作为临床用药依据.     

白花蛇舌草LC—MS指纹图谱的研究

目的：建立白花蛇舌草的LC—MS指纹图谱。方法：采用LC—MS法，检测不同产地同一季节采收的10批样品色谱特征，与此同时和黄毛耳草（两者都属于茜草科耳草属植物）进行比较。结果：建立白花蛇舌草指纹图谱。结论：LC—MS指纹图谱具有特异性，可以评价和全面控制白花蛇舌草质量。     

后适应对大鼠实验性局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究后适应对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用与氧自由基的关系。方法大脑中动脉线拴法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型:50只♂性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注模型组(MCAO)、预适应组(MCAO+preconditioning)、后适应组(MCAO+postconditioning)和尼莫地平组(MCAO+nimodip-ine),每组10只大鼠。术后对大鼠进行神经缺陷评分,并取脑组织测量梗死体积。另取50只大鼠,分组、实验方法及步骤同上,术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果后适应能减少大鼠实验性局灶性脑缺血的梗死体积、降低脑含水量,改善其神经行为。脑组织匀浆生化指标检测发现缺血后适应能降低脑组织中MDA和LA含量;升高SOD和GSH含量,与MCAO模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论缺血后适应能诱导脑缺血耐受,对脑缺血/再灌注损伤产生保护作用,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力有关。     

癌胚抗原启动子调控融合自杀基因yCDglyTK载体的构建及其应用研究

目的构建靶向性基因治疗载体pcDNA3．1（-）CryCDglyTK，研究癌胚抗原（CEA）启动子是否能控制新型融合自杀基因yCDglyTK在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤作用。方法采用PCR、RT—PCR、融合PCR、酶切、连接等技术构建由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）cvvCDglyTK表达载体和分别由CEA启动子和巨细胞病毒（CMV）增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK、pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK表达载体，以磷酸钙纳米为载体分别转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LOVO细胞和CEA阴性的Hela细胞，采用RT—PCR、免疫荧光法检测感染细胞中yCDglyTK基因的表达，并用MIT法检测感染后细胞对5-氟胞嘧啶（5-FC）的敏感性。结果LOVO细胞在感染以上三种质粒表达载体后均有yCDglyTKmRNA表达，且对5-FC的敏感性明显增强，Hela细胞在纳米-pcDNA3．1（-）CMVyCDglyTK复合物感染后有yCDglyTKmRNA表达，对5-FC的敏感性增强，而在纳米-pcDNA3．1（-）CEAyCDglyTK及纳米-pcDNA3．1（-）CVyCDglyTK复合物感染后则没有yCDglyTKmRNA表达，5-FC对其亦无杀伤作用。结论该实验构建的由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因yCDglyTK靶向性基因治疗载体。能使融合自杀基因在CEA阳性细胞中专一性表达，从而达到靶向治疗肿瘤的目的。     

转人4-1BBL-B7-H3基因口腔鳞癌细胞体外诱导抗肿瘤免疫的研究

目的通过构建转人4-1BBL-B7-H3基因肿瘤细胞株,探讨4-1BBL-B7-H3体外诱导抗肿瘤免疫的能力。方法通过脂质体法将真核表达载体pEGFP-4-1BBL-B7H3转染人口腔鳞癌Tca8113细胞,经G418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,用流式细胞仪分析表型,RT-PCR检测转染细胞中4-1BBL-B7-H3mRNA的表达。用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,分别与转染4-1BBL、B7-H3、4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞混合培养。用CCK-8法检测细胞毒性T细胞（CTL）杀伤活性;ELISA法检测培养上清液中IFN-γ水平。结果转基因Tca8113细胞能够稳定高表达4-1BBL-B7-H3。与Tca8113细胞相比较,转染4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞能够显著增强T细胞增殖,促进IFN-γ分泌,并有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用。结论转染人4-1BBL-B7-H3基因既能增强口腔鳞癌Tca8113细胞的免疫原性,亦能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答。