眼表铁过载小鼠干眼模型的构建和机制研究

目的：通过给小鼠腹腔注射右旋糖酐铁，建立小鼠铁过载干眼模型并初步探索其可能的机制。

方法：将40只雄性C57BL/6小鼠(取右眼为实验眼)用随机数字表法将小鼠分为4组：对照组10只，每次腹腔注射生理盐水0.2mL； 低剂量组、中剂量组、高剂量组各10只为模型组，每次分别腹腔注射浓度为12.5、25、50mg/mL的右旋糖酐铁溶液0.2mL。每3d注射1次，共注射28d。注药后第7、14、28d观察各组小鼠眼表炎症指数、角膜荧光素染色、泪膜破裂时间(BUT)及泪液分泌量(SⅠt)，评估干眼及眼表炎症程度。28d后处死小鼠，取角膜、结膜及泪腺组织，进行HE染色、普鲁士蓝染色以及组织铁检测，评估小鼠炎症反应及铁过载情况； 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况。

结果：与对照组相比，模型组小鼠出现一系列干眼症状，小鼠眼表炎症指数增高，角膜荧光素染色评分增加，BUT缩短，泪液分泌量减少(均P<0.05)； 模型组小鼠角膜、结膜及泪腺组织均受到不同程度的损伤，各组织眼表铁沉积情况较对照组加重，组织铁含量明显增加(均P<0.01)； 模型组小鼠角膜、结膜及泪腺组织中炎症因子(IL-1β、TNF-α、MMP-9)的含量均高于对照组(均P<0.01)，随着右旋糖酐铁注药时间及浓度增加，小鼠干眼及眼表炎症程度逐渐加重。

结论：腹腔注射右旋糖酐铁可成功建立小鼠铁过载干眼模型，其机制可能与铁过载加重眼表炎症反应有关。     

姜黄素对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF和NF-κB p65表达的抑制作用

目的：观察不同浓度姜黄素对体外高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖及血管内皮生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)p65表达的影响。

方法：用高糖培养基模拟糖尿病环境建立HRCECs体外高糖模型,将培养的细胞分为：正常对照组、高糖对照组、高糖+20、40、80μmol/L姜黄素组,分别用CCK-8法检测姜黄素干预后HRCECs的增殖能力,用Western-blot及免疫细胞化学法检测VEGF、NF-κB p65的表达。

结果：CCK-8法结果示：与正常对照组比较,高糖显著促进HRCECs增殖(P<0.01),各浓度姜黄素作用12、24、48h后与高糖对照组比较,细胞增殖均有明显抑制作用(P<0.01),且呈浓度与时间依赖性。Western-blot结果示：与正常对照组比较,高糖对照组中VEGF-A、NF-κB p65表达显著增加(P<0.01),各浓度姜黄素作用12、24、48h后与高糖对照组比较,VEGF-A、NF-κB p65的表达显著减少,且随着浓度增加、时间延长抑制作用增强,各加药组间两两比较均有差异(P<0.01)。免疫细胞化学法结果示：与正常对照组相比,高糖对照组VEGF表达显著增加(P<0.01),各浓度姜黄素干预24h后与高糖对照组比较,VEGF表达逐渐下降(P<0.01),各加药组间两两比较均有差异(P<0.01)。

结论：姜黄素可呈浓度与时间依赖性地抑制高糖诱导的HRCECs增殖以及VEGF、NF-κB p65的表达,这种增殖抑制作用可能与其下调VEGF、NF-κB p65表达有关。     

防止牙-牙周组织切片脱片技术的改进

目的探讨一种可有效防止牙-牙周组织切片脱片的方法。方法改进组采用APES涂胶玻片,在抗原修复前在组织切片上覆盖同等大小纱布和空载玻片,回形针固定。对照组使用普通玻片,烤片过夜,常规脱蜡水化。比较改进组和对照组各40张切片在煮沸法、酶抗原修复后脱片率,并用PCNA检验其染色效果。结果改进组脱片率较对照组明显降低(P<0.01)。煮沸法抗原修复后PCNA染色有核染阳性细胞散在存在于组织中,背景清晰,效果满意。胰酶修复法两组均未出现阳性表达。结论该改进的方法能有效防止牙-牙周组织脱片并不影响染色效果,值得推广应用。     

Vitapex配伍AH-plus糊剂治疗牙周牙髓联合病变的疗效

目的:探讨Vitapex糊剂联合AH-plus糊剂治疗牙周牙髓联合病变的效果。方法:84颗牙体牙髓牙周病患牙,随机分两组。实验组Vitapex略超充封药后1个月,去Vitapex,改AH-plus糊剂加牙胶永久充填;对照组氧化锌丁香油糊剂牙胶尖永久充填。观察比较两组在第3、6个月时牙周袋深度(PD)、探诊出血(BOP)、牙龈指数(GI)的改变,并拍X线分析牙周骨缺损(CEJ-BD)和牙槽嵴顶(CEJ-AC)骨量的改变情况。结果:实验组PD、BOP、GI指数均较对照组显著改善,且牙周缺损区骨量增加显著(P<0.05),两者牙槽嵴顶骨量改变差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Vitapex糊剂联合AH-plus糊剂对牙周牙髓联合病变进行治疗,可取的较好的临床效果。     

TLR7介导日本血吸虫感染C57BL/6小鼠脾脏的T细胞反应

目的 探究日本血吸虫感染后小鼠脾脏TLR7对T细胞反应的调节作用。方法 使用日本血吸虫感染6周的C57BL/6小鼠（WT）和TLR7-KO小鼠,并设立相应对照组。然后观察组织病变情况,分离脾脏淋巴细胞,运用qRT-PCR、流式细胞术检测脾脏中CD4⁺T和CD8⁺T细胞数量改变以及TLR7分子表达;进一步通过流式细胞术检测WT和TLR7-KO小鼠感染前后CD4⁺T和CD8⁺T细胞CD25、CD69、CXCR5、CD40L等活化表型的变化;经PMA和离子霉素的刺激,使用细胞内细胞因子染色的方法检测CD4⁺T和CD8⁺T细胞IFN-γ、IL-4分泌情况。结果 日本血吸虫感染后,小鼠肝脏和脾脏明显增大,脾脏中CD4⁺T和CD8⁺T细胞发生大量聚集;感染后CD4⁺T和CD8⁺T细胞多种活化及功能相关指标均显著上升,且IL-4⁺CD4⁺T...     

聚合瓷纤维桩核与玻璃纤维桩核抗折强度比较研究

目的    评价聚合瓷纤维桩核与玻璃纤维桩核的抗折强度。方法    选择2012年1月至2013年1月广东医学院附属深圳南山医院口腔科门诊因牙周病拔除的20颗根长相似的上颌中切牙,随机分为聚合瓷纤维桩组和玻璃纤维桩组,每组各10颗。根管治疗后切除牙冠,聚合瓷纤维桩组采用牙周固位纤维增强的Adoro聚合瓷纤维桩核修复,玻璃纤维桩组采用ParaPost Taper Lux玻璃纤维桩核修复。两组样本进行抗折强度测试,记录折断模式及所加载的最大负荷。结果    聚合瓷纤维桩组牙齿折裂时负荷为（593.0 ±71.01）N,玻璃纤维桩组为（645.4 ± 63.63）N,两组差异无统计学意义（t = 1.737,P > 0.05）。两组的折裂位置大部分发生于牙根颈1/3处,分布差异无统计学意义（χ2 = 1.25,P > 0.05）。结论    聚合瓷纤维桩核系统与玻璃纤维桩核系统的抗折强度和折裂位置分布相似,聚合瓷纤维桩核系统应用于临床的修复效果尚有待进一步观察。     

10％纳米羟基磷灰石聚醚醚酮浸提液培养成骨细胞（MG63）Wnt3a／β－catenin信号通路的表达

目的：研究10％纳米羟基磷灰石聚醚醚酮（10％ HA／SPEEK／PEEK）复合材料浸提液培养MG63细胞后Wnt3a／β－catenin信号通路中特征性蛋白的变化,评价复合材料的生物相容性。方法：Wnt3a持续作用于10％HA／SPEEK／PEEK浸提液培养的MG63细胞。应用免疫荧光染色技术,定性检测Wnt信号通路中β－catenin蛋白的存在。应用Western－Blotting技术相对定量检测β－catenin蛋白的多少。应用实时定量PCR技术相对定量检测信号通路下游基因c－myc、cyclinD1的表达情况。结果：免疫荧光染色和Western－Blotting实验结果显示,Wnt3a作用于10％HA／SPEEK／PEEK浸提液中培养的MG63细胞,β－catenin蛋白绿色深染,位于细胞核中,表达量显著增加。实时定量RT－PCR实验结果显示Wnt3 a作用于10％HA／SPEEK／PEEK浸提液中培养的MG63细胞,信号通路的下游靶向基因c－myc、cyclinD1表达显著增加,Wnt通路开放。结论：10％HA／SPEEK／PEEK对MG63细胞有良好的成骨作用,可以指导临床实验研究。     

姜黄素对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和成管的影响

目的 研究姜黄素对体外高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖、迁移和管腔形成能力的影响.方法 将HRCECs分为5组进行培养:正常对照组(正常糖浓度的DMEM培养基下培养)、高糖对照组(高糖DMEM培养基下培养)、高糖+不同浓度姜黄素3个组(高糖DMEM培养基中分别加入20、40、80 μmol/L姜黄素)...     

异种脱细胞真皮基质膜在引导牙周组织再生中应用的临床效果评价

目的：评价异种脱细胞真皮基质膜在引导牙周组织再生中应用的临床效果。方法：30例牙周缺损区患牙随机分两组：实验组20例,异种脱细胞真皮基质膜和羟基磷灰石修复;对照组10例仅羟基磷灰石修复。统计学比较6个月时两组各项临床指标和牙槽骨水平改变。结果：实验组牙周袋深度、临床附着丧失的减少量和牙槽骨水平的增加量均较对照组高（P〈0.05）,牙龈退缩量低于对照组（P〈0.05）。结论：异种脱细胞真皮基质膜应用于引导牙周组织再生有较好的临床效果,值得推广。