华南地区某眼科医院的感染性角膜炎病原菌谱特征

目的 探讨华南地区某眼科医院感染性角膜炎的病原菌谱及其特点。方法 回顾性系列病例研究。选择2013年7月1日至2017年12月31日在中山大学中山眼科中心进行角膜取材和微生物检测的角膜感染患者3 914例。表面麻醉后刮取病灶边缘的病灶组织,进行细菌、真菌培养及鉴定。培养结果阳性的细菌采用生化比色或质谱进行种属鉴定;真菌依据形态学进行种属鉴定。各季节菌谱阳性率差异比较采用卡方检验。结果 感染性角膜炎患者中,男2 468例（63.1%）,女1 446例（36.9%）,年龄（49.5±16.8）岁。病原菌培养阳性的患者共1 673例（42.7%）,其中单纯细菌749例（44.8%）,单纯真菌849例（50.7%）,混合感染75例（4.5%）。最常见的细菌是葡萄球菌属（20.1%）,其次是假单胞菌属（7.5%）;最常见的真菌是镰刀菌属（25.5%）,其次是曲霉菌属（10.3%）。细菌的阳性率在5-8月明显高于1-2月和9-12月（P<0.05）,真菌的阳性率在5-6月明显低于1-2月和9-12月（P<0.05）。结论 在华南地区一所三甲眼科医院的感染性角膜炎中,真菌感染略高于细菌感染,且细菌和真菌感染存在季节性差异。     

汉防己甲素滴眼液对家兔眼刺激性实验研究

目的观察不同浓度汉防己甲素滴眼液对兔眼的刺激反应。方法 20只家兔（40眼）随机分为0.1%Tet、0.2%Tet、0.5%Tet、1%Tet、赋形剂5组,每只家兔右眼分别滴上述各组滴眼液0.1 ml,左眼滴等体积的生理盐水做对照,每天4次,连续1周,停药后继续观察7d,用裂隙灯观察兔眼结膜、角膜、虹膜的刺激反应并评分。结果 1%Tet组中4只动物中的2只出现鲜红色结膜充血,角膜散在点状混浊,停药后2~3d消失,其余各组动物未见异常反应。结论汉防己甲素滴眼液对兔眼无明显刺激性。     

杞菊地黄汤改善实验性大鼠视网膜变性的作用观察

目的:观察杞菊地黄汤对实验性视网膜变性大鼠的治疗作用。方法:将生后45 d的SD大鼠分为正常组、模型组和杞菊地黄汤组。中药组大鼠ig杞菊地黄汤8.3 g.kg-1(15 mL.kg-1),模型组ig等体积生理盐水。两组动物均于生后47 d开始ig,每天1次,直至动物处死。生后50 d以N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)ip造成视网膜变性模型,预定时间行闪光视网膜电图(flash electroretinograms,FERG)检测,造模后2,5 d时分批处死动物,取右眼行病理切片,分别以TUNEL法检测视网膜外核层细胞的凋亡、HE染色检测视网膜外核层的厚度。结果:ig杞菊地黄汤8.3 g.kg-1组大鼠FERG消失时间较模型对照组明显延迟;造模后2 d,其外核层细胞凋亡指数(50.8±7.3)%低于同期模型组大鼠(81.1±9.7)%(P<0.01);造模后5 d,其视网膜外核层厚度(71±27)μm大于同期模型组大鼠(22±10)μm(P<0.01)。结论:杞菊地黄汤对MNU诱导的光感受器细胞凋亡有保护作用。     

人γ-晶体蛋白的研究:Ⅴ.胚胎晶体γ_1-、γ_3-晶体蛋白在体外的非酶糖化作用

目的:比较由葡萄糖和果糖诱发不同的人胚胎γ-晶体蛋白的非酶糖化作用。方法:用Sephadex凝胶层析方法从人类胚胎晶体中分离出γ_1和γ_3-晶体蛋白,将这些γ-晶体蛋白与葡萄糖或果糖37℃下培养20天,γ-晶体蛋白产生非酶糖化作用,混浊和块状沉淀出现,还观察到SDS—PAGE图谱的变化和蓝色荧光产物。结果:虽然两种γ-晶体蛋白出现相类似的变化。但在早期阶段(3天)γ_1-晶体蛋白更容易产生聚合和不溶解。SDS—PAGE显示有聚合物产生,这些都是通过二硫键和非二硫键交联以及肽键的降解而形成。γ_3-晶体蛋白溶液糖化作用后,蓝色荧光增加。果糖与γ-晶体蛋白的糖化作用比葡萄糖更明显(如:聚合、降解、产生蓝色荧光)。结论:人类胚胎γ_1和γ_3-晶体蛋白对非酶糖化作用是敏感的,程度亦有不同(γ_1>γ_3),果糖的作用比葡萄糖强。眼科学报 1995;11:197—201     

HPLC测量维生素C在大鼠和豚鼠房水及晶体内的分布

目的测定豚鼠和大鼠眼房水及晶体不同部位的维生素Ｃ（ｖｉｔａｍｉｎＣ，ＶＣ）的含量。方法应用晶体分割技术将豚鼠和大鼠晶体分为赤道部、前皮质、核部和后皮质，然后用高压液相色谱测定了晶体不同部位以及房水内的ＶＣ含量。结果豚鼠和大鼠房水中的ＶＣ分别为１３０９．１和４４．６１μｍｏｌ／Ｌ。晶体内以赤道部的ＶＣ含量最高，晶体核为最低，前后皮质的含量介于二者之间。结论ＶＣ在不同动物的眼房水和晶体中的含量有很大差别，在晶体不同部位的分布也明显不同。     

人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。     

眼蛋白质组学

蛋白质组学是对一个细胞、组织或器官的基因组表达的所有蛋白质分析研究，是新世纪生命科学研究的前沿以及功能基因组学的研究重心。蛋白质组学为研究眼部细胞生命活动规律和眼科疾病病变机制提供了一个新的研究平台。本文就蛋白质组学在眼科的应用作一综述。眼科学报2003；19：67-70     

不同区域晶状体上皮细胞基因表达差异分析

【目的】比较不同区域猪晶状体上皮细胞的基因表达在转录组水平上的差异。【方法】解剖显微镜下分离晶状体前囊膜，将附着于其上的上皮细胞分为中央（直径为10．56mm）和周边两部分。分别提取两个样本的总RNAs并经PCR扩增，以Cy3和Cy5分别标记扩增的中央与周边部分的cDNA。与含7548个基因的表达谱芯片杂交，经图像分析，生物信息学处理获得基因表达在转录水平差异的相关信息。【结果】中央与周边区域的猪晶状体上皮细胞在转录组水平共鉴定出952个有效表达的基因点，其中差异表达基因261个．以中央区域为参照，周边上皮细胞mRNA上调137个，下调124个。差异表达基因主要涉及的功能有：细胞周期与凋亡、细胞骨架蛋白及细胞外基质、转录、细胞信号分子等。【结论】中央与周边区域猪晶状体上皮细胞基因表达在转录组水平上差异明显。这类差异呈明显的功能聚类。     

晶体蛋白质的混浊与PH值的关系

我们使用一些酸性试剂及药物,如HCl:谷胱甘肽(GSH,GSSG);维生素C;维生素B_6等,与碱性试剂(Tris)来调节晶体水溶性和尿素溶性蛋白质的pH值,发现在一定比例下,晶体蛋白质溶液产生混浊,用pH计测混浊溶液的pH值约为5.6—6.3,高于或低于这一范围,混浊不会产生.通过酸、碱梯度溶液试验,测定了人类胚胎晶体、成人透明和白内障晶体水溶性和尿素溶性蛋白质溶液的混浊程度,其结果是,成人透明晶体和白内障晶体蛋白溶液比胚胎晶体蛋白溶液产生的混浊明显,在同一晶体中,尿素溶性蛋白比水溶性蛋白产生的混浊多.我们认为白内障的形成与晶体内pH变化有一定联系.