华南地区某眼科医院的感染性角膜炎病原菌谱特征

目的 探讨华南地区某眼科医院感染性角膜炎的病原菌谱及其特点。方法 回顾性系列病例研究。选择2013年7月1日至2017年12月31日在中山大学中山眼科中心进行角膜取材和微生物检测的角膜感染患者3 914例。表面麻醉后刮取病灶边缘的病灶组织,进行细菌、真菌培养及鉴定。培养结果阳性的细菌采用生化比色或质谱进行种属鉴定;真菌依据形态学进行种属鉴定。各季节菌谱阳性率差异比较采用卡方检验。结果 感染性角膜炎患者中,男2 468例（63.1%）,女1 446例（36.9%）,年龄（49.5±16.8）岁。病原菌培养阳性的患者共1 673例（42.7%）,其中单纯细菌749例（44.8%）,单纯真菌849例（50.7%）,混合感染75例（4.5%）。最常见的细菌是葡萄球菌属（20.1%）,其次是假单胞菌属（7.5%）;最常见的真菌是镰刀菌属（25.5%）,其次是曲霉菌属（10.3%）。细菌的阳性率在5-8月明显高于1-2月和9-12月（P<0.05）,真菌的阳性率在5-6月明显低于1-2月和9-12月（P<0.05）。结论 在华南地区一所三甲眼科医院的感染性角膜炎中,真菌感染略高于细菌感染,且细菌和真菌感染存在季节性差异。     

初发和复发翼状胬肉成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶的比较及汉防己甲素对其的影响

目的检测培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的情况,并作为观察指标了解汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对其的抑制作用。方法相同的条件下培养初、复发翼状胬肉与正常球结膜成纤维细胞,酶联免疫吸附试验检测培养的细胞上清液中MMP-1、MMP-3、MMP-9的含量,同时应用10-5mol·L-1Tet作用于培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞,48h后分析培养液中上述MMPs含量的变化。结果培养的初、复发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1含量均较正常球结膜高(均为P<0.05),加入10-5mol·L-1Tet后均明显下降(均为P<0.05),但初发翼状胬肉上清中MMP-1含量仍高于正常球结膜(P<0.05),而复发翼状胬肉上清中MMP-1含量与正常球结膜相比差异无统计学意义(P>0.05);初发翼状胬肉上清中MMP-1含量明显高于复发翼状胬肉,加入Tet后仍较复发翼状胬肉高(均为P<0.05)。培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-3含量较正常球结膜高(P<0.05),加入10-5mol·L-1Tet后明显下降(P<0.05),但仍高于正常球结膜(P<0.05);复发翼状胬肉上清中MMP-3含量低于正常球结膜(P<0.05)。培养的初、复发翼状胬肉和正常球结膜成纤维细胞上清中均未检测到MMP-9。结论初、复发翼状胬肉成纤维细胞MMP-1、MMP-3的分泌有明显的差异,Tet对初、复发翼状胬肉成纤维细胞MMP-1及初发翼状胬肉MMP-3的分泌有明显的抑制作用。     

汉防己甲素对人眼Tenon囊成纤维细胞中bax、bcl-2、TGF-β2mRNA表达的影响

摘要：目的观察汉防己甲素（Tet）对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞（tenon’s capsule fibroblasts, TCFS）中bax、bcl-2、转化
生长因子-β2（TGF-β2）mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法将体外培养的第3代TCFS分别置于浓度为10-5 mol/L
Tet的培养液和1640培养液中培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞中bax、bcl-2和TGF-β2 mRNA的表达变化。结果同
对照组比较,Tet 实验组中bax mRNA的表达量明显升高,bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量显著下降,差异均有统计学意义（P<
0.05）。结论一定浓度的汉防己甲素可以通过降低bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量,同时提高bax mRNA的表达量来抑制
TCFS的增殖,并可诱导其凋亡,可能成为一种潜在的抗青光眼滤过瘢痕药物。
     

汉防己甲素滴眼液对家兔眼刺激性实验研究

目的观察不同浓度汉防己甲素滴眼液对兔眼的刺激反应。方法 20只家兔（40眼）随机分为0.1%Tet、0.2%Tet、0.5%Tet、1%Tet、赋形剂5组,每只家兔右眼分别滴上述各组滴眼液0.1 ml,左眼滴等体积的生理盐水做对照,每天4次,连续1周,停药后继续观察7d,用裂隙灯观察兔眼结膜、角膜、虹膜的刺激反应并评分。结果 1%Tet组中4只动物中的2只出现鲜红色结膜充血,角膜散在点状混浊,停药后2~3d消失,其余各组动物未见异常反应。结论汉防己甲素滴眼液对兔眼无明显刺激性。     

杞菊地黄汤改善实验性大鼠视网膜变性的作用观察

目的:观察杞菊地黄汤对实验性视网膜变性大鼠的治疗作用。方法:将生后45 d的SD大鼠分为正常组、模型组和杞菊地黄汤组。中药组大鼠ig杞菊地黄汤8.3 g.kg-1(15 mL.kg-1),模型组ig等体积生理盐水。两组动物均于生后47 d开始ig,每天1次,直至动物处死。生后50 d以N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)ip造成视网膜变性模型,预定时间行闪光视网膜电图(flash electroretinograms,FERG)检测,造模后2,5 d时分批处死动物,取右眼行病理切片,分别以TUNEL法检测视网膜外核层细胞的凋亡、HE染色检测视网膜外核层的厚度。结果:ig杞菊地黄汤8.3 g.kg-1组大鼠FERG消失时间较模型对照组明显延迟;造模后2 d,其外核层细胞凋亡指数(50.8±7.3)%低于同期模型组大鼠(81.1±9.7)%(P<0.01);造模后5 d,其视网膜外核层厚度(71±27)μm大于同期模型组大鼠(22±10)μm(P<0.01)。结论:杞菊地黄汤对MNU诱导的光感受器细胞凋亡有保护作用。     

不同区域晶状体上皮细胞基因表达差异分析

【目的】比较不同区域猪晶状体上皮细胞的基因表达在转录组水平上的差异。【方法】解剖显微镜下分离晶状体前囊膜，将附着于其上的上皮细胞分为中央（直径为10．56mm）和周边两部分。分别提取两个样本的总RNAs并经PCR扩增，以Cy3和Cy5分别标记扩增的中央与周边部分的cDNA。与含7548个基因的表达谱芯片杂交，经图像分析，生物信息学处理获得基因表达在转录水平差异的相关信息。【结果】中央与周边区域的猪晶状体上皮细胞在转录组水平共鉴定出952个有效表达的基因点，其中差异表达基因261个．以中央区域为参照，周边上皮细胞mRNA上调137个，下调124个。差异表达基因主要涉及的功能有：细胞周期与凋亡、细胞骨架蛋白及细胞外基质、转录、细胞信号分子等。【结论】中央与周边区域猪晶状体上皮细胞基因表达在转录组水平上差异明显。这类差异呈明显的功能聚类。     

维生素C在晶体蛋白光氧化中的作用及其机制

目的：观察维生素Ｃ（ＡＳＡ）在晶体蛋白发生光氧化时的作用及其机制。方法：牛日体蛋白溶液在加入或不加入ＡＳＡ时,于５天内共接受２００ｍＪ／ｃｍ＾２紫外线Ｂ（ＵＶＢ）照射,接着在３７℃继续孵育至第３周,然后测定晶体蛋白的非色氨酸我、游离巯基和进行蛋白电泳分析。结果：ＡＳＡ在溶液中易被氧化,蛋白溶液中加入ＡＳＡ促使晶体蛋白 非色氨酸荧光产生明显增强,导致非二硫键聚合形成,对晶体蛋白的游离巯基减少有保护作     

人γ-晶体蛋白的研究:Ⅴ.胚胎晶体γ_1-、γ_3-晶体蛋白在体外的非酶糖化作用

目的:比较由葡萄糖和果糖诱发不同的人胚胎γ-晶体蛋白的非酶糖化作用。方法:用Sephadex凝胶层析方法从人类胚胎晶体中分离出γ_1和γ_3-晶体蛋白,将这些γ-晶体蛋白与葡萄糖或果糖37℃下培养20天,γ-晶体蛋白产生非酶糖化作用,混浊和块状沉淀出现,还观察到SDS—PAGE图谱的变化和蓝色荧光产物。结果:虽然两种γ-晶体蛋白出现相类似的变化。但在早期阶段(3天)γ_1-晶体蛋白更容易产生聚合和不溶解。SDS—PAGE显示有聚合物产生,这些都是通过二硫键和非二硫键交联以及肽键的降解而形成。γ_3-晶体蛋白溶液糖化作用后,蓝色荧光增加。果糖与γ-晶体蛋白的糖化作用比葡萄糖更明显(如:聚合、降解、产生蓝色荧光)。结论:人类胚胎γ_1和γ_3-晶体蛋白对非酶糖化作用是敏感的,程度亦有不同(γ_1>γ_3),果糖的作用比葡萄糖强。眼科学报 1995;11:197—201     

眼蛋白质组学

蛋白质组学是对一个细胞、组织或器官的基因组表达的所有蛋白质分析研究，是新世纪生命科学研究的前沿以及功能基因组学的研究重心。蛋白质组学为研究眼部细胞生命活动规律和眼科疾病病变机制提供了一个新的研究平台。本文就蛋白质组学在眼科的应用作一综述。眼科学报2003；19：67-70     

人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。