SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb)，为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料。方法 用纯化的重组SARS-CoVN蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株，用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性，并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。结果 通过细胞融合和3轮克隆化，筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株。Western blot及免疫荧光显示，获得的McAb可与SARS-CoVN蛋白及SARS-CoV发生特异性反应，有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端，2个位于C端。结论 获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位，可用于SARS的早期诊断及致病机制研究。     

三种特殊饮用水对小鼠免疫系统的影响

目的　了解碱性离子水、矿溶生态水、活化水对机体免疫系统的影响。方法　根据《保健食品功能学评价程序和检验方法 1 996》 ,选用 1 2 0只 1 7 8～ 2 3 3g健康雄性Balb c小鼠 ,分为 4小组 ,每小组 30只 ,每天分别自由饮用纯净水 (对照组 )、碱性离子水、矿溶生态水、活化水 ,5 0天后进行小鼠脏器体重比值测定、迟发型变态反应实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、半数溶血值 (HC50 )的测定和抗体生成细胞数的测定(Ⅰ组 )。另选用 1 2 0只 1 7 8～ 2 3 3g健康雄性Balb c小鼠 ,分组同前 ,5 0天后进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定 (Ⅱ组 ) ,再选用 1 2 0只 1 6 7～ 2 2 0g健康雌性Balb c小鼠 ,分组同前 ,5 0天后进行小鼠碳廓清实验 (Ⅲ组 )。实验数据用stata软件 ,多个实验组和一个对照组间比较 ,进行方差分析。结果　 (1 )三种特殊饮用水与纯净水比较 ,对雌性Balb c小鼠体重增长的影响不显著 ,但饮用碱性离子水和活化水的雄性小鼠的体重增长值均明显低于纯净水 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ;(2 )活化水与纯净水组间比较 ,胸腺体重比值明显增加 (P <0 0 5 ) ;腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬指数明显增加 (P <0 0 1 ) ;NK细胞活性明显增加(P <0 0 1 )。 (3)其他指标与相应的纯净水比较差?     

1992～2001年食源性疾病暴发资料分析——国家食源性疾病监测网

目的　了解国家食源性疾病监测网覆盖地区人群食源性疾病爆发的发生状况。方法　对 13个监测地区 1992～ 2 0 0 1年食源性疾病爆发上报资料进行回顾性分析。结果　十年间共上报 5 770件食源性疾病暴发事件 ,涉及的患者人数达 16 2 995人。微生物引起的食源性疾病事件和涉及人数最多 ,分别占总体的38 5 %和 5 0 9%。副溶血性弧菌 (31 1% )是主要的病因物质。化学物引起的食源性疾病事件和涉及人数分别占总体的 37 5 %和 2 8 6 %。结论　应不断加强完善我国食源性疾病监测网络的建设。     

保健食品免疫功能评价的鼠种选择

在保健食品增强免疫力功能的检验方法中，试验动物推荐使用近交系动物。但由于远交系小鼠仅是近交系小鼠价格的1／3，所以迄今为止，许多增强免疫力功能的检验使用的是昆明种小鼠。在动物实验中，由于样本量较小，因此个体差异造成的随机变异对实验结果的判定带来很大影响。     

抗独特型抗体的研究现状

在目前的免疫技术中，抗独特型抗体的研制是一种可行的免疫原替代技术。抗体的独特型是指存在于抗体分子上的独特型抗原决定簇的总称，它反映抗体分子的多样性。独特型抗体（Ab1）是指具有独特型抗原决定簇的抗体，而抗独特型抗体（Ab2）是指针对抗体的独特位产生的抗体。该技术首次出现于1974年，Jeme在Bumet的细胞克隆选择学说的基础上提出了名的免疫网络学说，在Jeme提出免疫网络学说的基础上，Nisonoff和Lamoyl明确指出，抗独特型抗体实质上能替代抗原诱导特异性免疫应答，是近年来生物技术研究的一个热点，尤其作为人、畜疾病防治的一种新制剂，已展示出十分诱人的前景。     

玉米中伏马菌素B1高效液相色谱检测

伏马菌素(fumonisin,FB)是近年来发现的一组镰刀菌产生的真菌毒素,其中FB1是污染玉米的主要成分,也是导致伏马菌素毒性作用的主要原因,广泛存在于世界范围的玉米及其制品中,对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁,成为真菌毒素中继黄曲霉毒素后的又一个研究热点[1].     

蛋白核小球藻对小鼠细胞免疫系统的影响

目的:探讨蛋白核小球藻对健康小鼠细胞免疫系统的影响.方法:选用BalB/c正常小鼠,随机分组,经口给予小鼠不同剂量的小球藻粉水溶液0,0.15,1.50,4.50 g/kg·bw,每日1次,30 d后测量小鼠迟发型变态反应,co.LA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力.结果:迟发型变态反应试验中4.50剂量组与对照组比较差异有显著性(P＜0.01);ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力试验中0.15剂量组与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:蛋白核小球藻能增强健康小鼠细胞免疫系统的功能.     

抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备和特性

目的建立敏感、特异和快速的针对伏马菌素B1(fumonisin B1, FB1)的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay ,ELISA)检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒.方法利用B细胞杂交瘤技术,建立能分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株.结果用伏马菌素B1-牛血清白蛋白(FB1-BSA)偶联物免疫8～10周龄雌性BALB/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经过3～4次亚克隆建立了1个稳定分泌抗伏马菌素B1毒素抗体的杂交瘤细胞株,命名为5A9.将杂交瘤细胞打入BALB/c小鼠腹腔,获得含抗伏马菌素B1毒素单克隆抗体的腹水,并将腹水用饱和硫酸铵法进行纯化,得到单克隆抗体.该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,腹水中抗体的滴度分别为2.56×106,参考工作浓度为3.2×105.纯化后抗体的IgG含量为10.4 g/L,亲和常数为8.3×10-8 mol/L.该抗体与其他结构类似物无交叉反应,具有较高的特异性.结论制备了具有高特异性和亲和力的抗伏马菌素B1单克隆抗体,初步形成了针对伏马菌素B1的ELISA检测试剂盒.     

乳果糖溶液通便功能人体试食试验研究

目的观察乳果糖溶液的通便功能。方法采用双盲法将127例受试者按其便秘症状随机分为试食组和对照组，试食样品组服用受试样品，对照组不进行任何处理。连续服用7d后，观察两组排便次数、排便状况和粪便性状的变化。结果对照组试食前后排便次数均为0.3次／d，排便状况积分均为1.7分／便次，粪便性状积分均为1.1分／便次，差别无统计学意义；试食样品组试食前后排便次数分别为0.3次／d和0.7次／d，排便状况积分分别为1．7和0.5分／便次，粪便性状积分分别为1．1和0.4分／便次，差别均有统计学意义（P〈0．01）；试食后试食样品组与对照组的排便次数、排便状况和粪便性状差别均有统计学意义（P〈0．01）。试验前后对照组和试食组均未见不良反应，各项安全性指标均未见异常。结论乳果糖溶液对人体具有明显通便功能，且对机体健康无不良影响。     

总黄曲霉毒素ELISA定量检测试剂盒研制

目的研究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒,并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果该试剂盒对黄曲霉毒素B G标准品的最低检出浓度为0.26 ng/ml,标准曲线的线性范围为0.26-20.00 ng/ml,线性方程y=-0.4463x 0.3532(R2=0.9915);对黄曲霉毒素B G50%的抑制浓度为2.08 ng/ml;试剂盒的条内变异系数为4.18%,条间变异系数为5.21%,抗体亲和力常数为1.52×10-10mol/L;对玉米3个加标水平的平均回收率分别为98.63%,94.56%和1 12.05%;对花生的3个加标水平的平均回收率分别为88.66%,87.50%和85.60%。试剂盒37℃可放置96 h以上;试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100%,57.5%,104%和19%,与其他真菌毒素无交叉反应。结论研制出的ELIS试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。