脱碘酶

脱碘酶家族是含硒酶，包括Ⅰ型脱碘酶、Ⅱ型脱碘酶和Ⅲ型脱碘酶，它们在甲状腺激素代谢过程中起非常重要的调节作用。它们的底物亲合性、对抑制剂的敏感性和动力学机制等方面都不同。三者的ｃＤＮＡ总的同源性不同，但有共同的保守序列，都含有硒半胱氨酸的密码子ＴＧＡ和硒半胱氨酸插入必需的结构和序列     

大鼠脱碘酶、硒蛋白P和硒蛋白W正常表达所需的最低饲料硒水平

目的　研究能满足大鼠脱碘酶、硒蛋白 P和硒蛋白 W合成所需的饲料硒水平。方法　以低硒酵母合成饲料加不同剂量的亚硒酸钠配成硒水平分别为 0 .0 1、0 .0 2、0 .0 3、0 .0 4、0 .0 5、0 .0 6、0 .1 0和 0 .2 0 mg/kg的 8种饲料喂养雄性 wistar断乳大鼠。 2 0周时杀死大鼠取其组织 ,分别对各种组织中的 型、 型和 型脱碘酶、硒蛋白 P的 m RNA以及硒蛋白 W的 m RNA的水平进行测定。结果　能满足大鼠各组织 型、 型和 型脱碘酶发挥最佳活性时的最低饲料硒水平为0 .0 5mg/kg,而硒蛋白 P的 m RNA以及硒蛋白 W的 m RNA正常表达所需的最低饲料硒水平分别为 0 .0 5和 0 .0 6mg/kg。结论　饲料硒水平达到 0 .1 mg/kg可满足大鼠脱碘酶、硒蛋白 P和硒蛋白 W的合成。     

硒的分子生物学

硒蛋白是硒以氨基酸－硒半胱氨酸的形式存在的蛋白质。硒半胱氨酸有自己独特的ｔＲＮＡ和ＵＧＡ密码子。硒半胱氨酸的合成发生在它的ｔＲＮＡ上。ＵＧＡ作为硒半胱氨酸的密码子在自然界是通用的。ｔＲＮＡ的转录由ＲＮＡ聚合酶Ⅲ催化,还有特异的外部启动子,ＴＡＴＡｂｏｘ和近端序列元件。硒交胱氨酸参入到蛋白质中需要硒半胱氨酸插入顺序元件和特殊的延长因子。     

大鼠组织器官利用硒的优先性

克山病是我国一种地方性心肌病,主要是因硒缺乏而造成的心肌损伤,这似说明在硒缺乏时对不同组织中的影响不同。本实验旨在观察硒耗竭过程中和耗竭后补硒过程中不同的组织器官利用硒的优先性。1　材　料　与　方　法1.1　动物饲料　　两个动物实验所用的基础饲料均为低硒酵母(Torula-yeast,RhinelanderPaperCo,WI.USA)配制的半合成饲料,其组成(%)为:低硒酵母30,玉米淀粉60.7,花生油5,混合无机盐3,混合维生素1,DL-蛋氨酸0.3。每千克饲料加维生素A2500IU、维生素D250IU和维生素E60mg。基础饲料的硒含量为0.01mg/kg,向基础饲料中加不同…     

牛磺酸对体外培养人胚脑神经细胞生长发育和衰老的影响

妊娠１２～１６周人工流产胎儿大脑神经细胞用１６４０培养液和加入０．２４ｍｍｏｌ／Ｌ牛磺酸的同种培养液进行原代单层培养，用免疫组织化学Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＳＰ）法鉴定神经细胞，用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入和图像分析等方法对脑神经细胞的生长发育、增殖分化、形态学变化及生存时间进行了研究。结果显示：牛磺酸组神经细胞的胞体面积、周长、突起长度、神经特异性烯醇化酶阳性率及￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入量均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），牛磺酸组细胞体外生存时间（９６±４ｄ）比对照组（６４±３．３ｄ）显著延长（Ｐ＜０．０１）。说明牛磺酸有促进人胚脑神经细胞的生长发育、增殖分化和延缓衰老的作用。     

牛磺酸对小鼠抗氧化和DNA修复能力的作用

断乳小鼠在饲料相同的基础上，两组动物分别喂以普通水和１％牛磺酸，于３６天（幼龄期）和１１０天（中龄期）时断头处死，测定其肝、脑匀浆的ＳＯＤ活性，ＭＤＡ及脂褐质含量，结果表明：补充牛磺酸的小鼠肝脑匀浆ＳＯＤ在幼龄期即显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），至中龄期更为显著（Ｐ＜０．０１）。脑匀浆中ＭＤＡ及脂褐质含量在幼龄期时无差异，至中龄时，实验组含量显著低于对照组（Ｐ＜０．０１）。肝匀浆中脂褐质含量在不同鼠龄时与脑匀浆相同，但ＭＤＡ则不同鼠龄时无变化。本实验又以１１０天、１５０天、１８０天鼠龄之脾细胞进行细胞悬液培养后，测其ＤＮＡ经紫外线照射后的修复能力，结果证明，ＤＮＡ损伤修复能力随年龄增长而降低，但牛磺酸组在各年龄段的修复能力均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），说明牛磺酸在体内具有明显的抗氧化和延缓衰老的功能，并可能作用于ＤＮＡ分子水平。     

牛磺酸对小鼠脾细胞DNA修复能力的影响

（１）目的观察牛磺权对小鼠脾细胞ＤＮＡ修复能力的影响，以探讨牛磺酸抗衰老的机制。（２）方法以不同鼠龄小白鼠脾细胞悬液进行培养，实验级培养液中加入磺酸（３０μｇ／ｍｌ），以１０ｍｍｏｌ／Ｌ羟基脲抑制ＤＮＡ复制经紫外线照射后，以＾３Ｈ－胸腺嘧啶脱氧核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＤＮＡ损伤后修复能力。（３）结果鼠龄１１０ｄ１５０ｄ和１８０ｄ３组小鼠中，ＤＮＡ修复能力均随鼠龄增加而降低，但在不同鼠龄阶段     

慢性硒中毒大鼠硒蛋白的变化

在低硒酵母配制的低硒饲料的基础上,加亚硒酸钠配成含硒量为０．２和５．０ｍｇ／ｋｇ（适硒和高硒）的两组饲料来喂养雄性断乳Ｗｉｓｔａｒ大鼠。在实验２０周末处死大鼠,测定组织器官的细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（ｃＧＰＸ）、细胞外谷胱甘肽过氧化物酶（ｅＧＰＸ）、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＨＧＰＸ）、Ⅰ型脱碘酶（ＩＤⅠ）和Ⅱ型脱碘酶（ＩＤⅡ）活性、硒蛋白Ｐ和硒蛋白Ｗ以及组织硒含量,并对所有大鼠的肝脏进行病理学检查。结果发现高硒饲料组大鼠的体重明显低于适硒饲料组。高硒组动物组织中硒含量明显高于适硒组。两组动物肝脏无明显病理学差异,但高硒组大鼠的血浆ｅＧＰＸ活性,肾脏、心脏和睾丸中的ｃＧＰＸ活性,肝、肾和甲状腺的ＩＤⅠ活性,心脏和睾丸中的ＰＨＧＰＸ活性以及大鼠体重明显低于适硒饲料组。提示它们可以作为硒中毒的早期生化指标。     

大鼠硒耗竭过程中不同组织硒蛋白利用硒的优先性

以低硒酵母配制的低硒基础饲料（含硒量为０．０１ｍｇ／ｋｇ）和在此基础上加亚硒酸钠配成硒水平为０．５０ｍｇ／ｋｇ的足硒饲料来喂养雄性Ｗｉｓｔａｒ断乳大鼠。于０、１、２、４、６、８、１２、１５、１７、１９、２０和２４周时处死大鼠取其组织,分别对各种组织中的硒、细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（ｃＧＰＸ）、细胞外谷胱甘肽过氧化物酶（ｅＧＰＸ）、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＨＧＰＸ）、Ⅰ型脱碘酶（ＩＤⅠ）和Ⅱ型脱碘酶（ＩＤⅡ）活性进行动态观察。结果发现睾丸中的硒和脑垂体中的ｃＧＰＸ在耗竭过程中降低速度较其它组织慢,且降低幅度较小;而硒蛋白中ＩＤⅠ和ＰＨＧＰＸ对硒的利用优先于ｃＧＰＸ和ｅＧＰＸ,ＰＨＧＰＸ和ＩＤⅠ的功能可能比ｃＧＰＸ和ｅＧＰＸ更重要。     

大鼠谷胱苷肽过氧化物酶发挥最佳活性所需的最低饲料硒水平

目的　测定大鼠谷胱苷肽过氧化物酶活性达到最高时所需的饲料硒水平。方法　以低硒酵母配制低硒基础饲料 ,在此基础上加不同剂量的亚硒酸钠配成 8种不同硒水平的饲料来喂养雄性 Wistar断乳大鼠。饲料硒水平分别为 0 .0 1、0 .0 2、0 .0 3、0 .0 4、0 .0 5、0 .0 6、0 .1 0和 0 .2 0mg/kg。 2 0周时处死大鼠 ,分别对各种组织中的硒 ( Se)、细胞内谷胱苷肽过氧化物酶 ( c GPX)、细胞外谷胱甘肽过氧化物酶 ( e GPX)、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 ( PHGPX)活性进行测定。结果　在Wistar大鼠的各种组织中 c GPX发挥最佳活性时的最低饲料硒水平高于其它两种硒蛋白。雄性Wistar大鼠发挥最佳 c GPX活性所需最低饲料硒水平为 0 .2 0 mg/kg,e GPX和 PHGPX发挥最佳活性所需的最低饲料硒水平分别为 0 .0 4和 0 .0 5mg/kg。结论　确保满足雄性大鼠 c GPX、e GPX和 PHGPX三种硒蛋白合成的饲料硒水平为 0 .2 0 mg/kg。