基于网络药理学的雷公藤肾毒性机制探讨

目的:通过建立雷公藤活性成分-作用靶点、蛋白相互作用、靶点相应的生物功能和通路网络,以及利用分子对接技术探讨雷公藤肾毒性的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和毒性与基因比较数据库(CTD)筛选出雷公藤有毒候选化合物。用有机小分子生物活性数据Pub Chem数据库,将所有的候选化合物都转化为标准的Canonical SMILES格式,将SMILES格式文件导入Swiss Target Prediction平台,进行靶点预测,将TCMSP中相应化合物的靶点作为补充,用uniprot将蛋白转换为对应的基因名称,与从人类基因组注释数据库(Gene Cards)中寻找到的肾脏相关基因蛋白进行比对,筛选出重合的蛋白作为雷公藤潜在的肾脏毒性靶点。采用Cytoscape软件构建雷公藤毒性候选成分-作用靶点网络。通过String数据库结合Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,用DAVID生物信息资源对靶点生物功能及涉及的通路进行分析,最后用Glide软件对关键蛋白与雷公藤毒性候选成分的结合进行验证。结果:雷公藤中筛选得到30种有毒候选成分,涉及209个肾脏毒性作用靶点,网络分析结果表明雷公藤可通过氨基酸代谢、磷脂代谢、儿茶酚胺类物质代谢,抑制肾脏有机阴离子转运体Oatl,Oat2,Oat3的功能,以及诱导凋亡,并参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,JAK/STAT信号通路,血管内皮生长因子(VEGF)信号通路,Toll样受体信号通路,ERBB信号通路,FcεRI信号通路,过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路等对肾脏产生毒性。结论:利用中药多成分-多靶点-多通路的特点,探究了雷公藤肾脏毒性作用机制,为进一步开展雷公藤肾脏毒性作用机制研究提供了新思路和新方法。     

双酚A暴露对职业女工性激素的影响

目的探讨双酚A(BPA)暴露对职业女工性激素的影响。方法采用病例-对照研究方法,选取51名BPA暴露至少一年的女工作为BPA暴露组,104名BPA未暴露的女工作为对照组,收集两组人群的一般人口学特征、BPA暴露情况、月经情况等,采集清晨空腹静脉血,用放射免疫分析法检测血清中卵泡刺激素(FSH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促黄体激素(LH)水平。结果 BPA暴露组PRL的水平显著高于对照组(t=2.127,P=0.047)。暴露组PRL的异常比例显著高于对照组(χ2=4.924,P=0.026)。大于30岁年龄组中,暴露组PRL(χ2=5.131,P=0.023)和孕酮(χ2=4.665,P=0.031)的异常比例均显著高于对照组。在未服用维生素的人中,暴露组PRL的异常比例显著高于对照组(χ2=6.541,P=0.011)。暴露年限小于5年组孕酮的异常比例显著高于暴露年限大于5年组(χ2=3.938,P=0.047)。经多因素分析发现,BPA暴露是影响女工血清中PRL的独立危险因素(OR=2.623,P=0.030)。未发现BPA对血清中FSH、E2、LH的影响。结论 BPA职业暴露女工血清PRL水平升高,孕酮水平受到BPA暴露的影响。在调整了年龄、暴露年限等可能的混杂因素后,发现BPA暴露是影响职业女工血清PRL水平的独立危险因素。     

DNA甲基转移酶1在子宫颈病变组织和子宫颈癌细胞中的异常表达及其意义

 目的　探讨DNA甲基转移酶1（DNMT1）在子宫颈病变组织和子宫颈癌细胞中的异常表达及其意义。方法　选择经病理学确诊的子宫颈鳞状细胞癌（SCC）患者80例、子宫颈上皮内瘤样变（CIN）患者105例（CINⅠ 52例,CINⅡ／Ⅲ 53例）和子宫颈正常（NC）者53名,收集其手术或活组织检查子宫颈组织标本。选择子宫颈癌Caski细胞（HPV16阳性）和C33A细胞（HPV阴性）进行体外实验。分别采用Western blot和实时荧光聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测子宫颈组织和细胞中DNMT1蛋白和mRNA的表达。结果　DNMT1蛋白和mRNA的表达水平在CIN及SCC组织中均较NC组织高,差异均有统计学意义（F＝110.57,P＜0.001;F＝2.68,P＝0.048）;随着子宫颈病变程度的加重,DNMT1蛋白表达水平呈逐渐上升趋势（χ2趋势＝50.80,P＜0.001）,但DNMT1 mRNA的表达在调整子宫颈癌相关因素后,未显示相同趋势（χ2趋势＝3.63,P＞0.05）。Caski 细胞DNMT1蛋白和mRNA的表达水平均较C33A细胞高,特别是mRNA的表达水平差异有统计学意义（t＝7.134,P＝0.002）。结论　DNMT1蛋白和mRNA高表达均是导致子宫颈癌和癌前病变发生的危险因素,HPV16感染与DNMT1转录功能异常对子宫颈癌的发生可能有协同效应。     

基于网络毒理学探讨草乌心脏毒性

目的:通过建立草乌活性成分-作用靶点、蛋白相互作用、靶点相应的生物功能和通路网络,以及利用分子对接技术探讨草乌心脏毒性的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)和毒性与基因比较数据库(Comparative Toxicogenomics Database,CTD)筛选出草乌有毒候选成分。依据反向药效团匹配(Pharm Mapper)方法预测草乌毒性候选成分的作用靶点,与从人类基因数据库(Gene Cards)中寻找到的心脏相关基因蛋白进行比对,筛选出重合的蛋白作为草乌的潜在的心脏毒性靶点。采用Cytoscape软件构建草乌毒性候选成分-作用靶点网络。通过String数据库结合Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,用DAVID平台对靶点生物功能及涉及的通路进行分析,最后用Discover Studio软件对关键蛋白与草乌毒性候选成分的结合进行验证。结果:草乌中筛选得到6种有毒候选成分,涉及27个心脏毒性作用靶点,网络分析结果表明靶点主要是通过参与心脏磷代谢,磷酸化的监管等磷相关的代谢和调节,以及通过FKBP1A,TGFB2,INSR等靶点对心脏的代谢,发育及形态产生重要的影响,进而产生心脏毒性。结论:利用中药多成分-多靶点-多通路的特点,探究了草乌心脏毒性作用机制,并预测了其可能存在的毒性,为进一步开展草乌心脏毒性作用机制研究提供了新思路和新方法。     

基于网络分析细辛毒理学

目的:采用网络毒理学的方法,通过建立化合物、蛋白、基因和毒物反应的网络关系,分析细辛中有毒物质的毒理作用机制,预测未知毒性。方法:通过在中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)数据库查询到的细辛候选化合物,以及在比较毒物基因组学数据库(CTD)中查询到的毒物信息的比对,筛选出细辛中13种有毒成分,并用Pharm Mapper Server中查询到13种成分相应的靶点蛋白等详细信息。使用Cytospace软件对这13种化学成分以及对应靶点蛋白,构建了网络结构图,发现了其中联系度最高的几种靶点蛋白。使用Cytospace软件中的Clue GO+Clue Pedia插件,进行gene ontology(GO)基因本体分析以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,得出了细辛中有毒物质可能通过哪些通路对人体有害。结果:细辛中毒性成分可能通过p53,白细胞介素(IL)-17,核转录因子(NF)-kappa B,肿瘤坏死因子(TNF)-α信号通路,细胞凋亡通路诱导肿瘤以及癌的形成;通过对神经元的调节,对中枢神经系统产生抑制作用;还可能通过IL-17,TNF-α和细胞凋亡调节引起其他自身免疫系统疾病。结论:探讨细辛的毒理机制,并预测了细辛可能存在的毒性,并为预测中药成分的毒性以及探究毒性机制提供了一个方法。     

双酚A职业暴露对男性性激素水平影响的研究

目的 探讨双酚A(BPA)职业暴露对男性性激素水平的影响.方法 于2005年8月,选取在工作中有接触BPA机会的131名男工作为暴露组,同时,选取不接触BPA的146名男工作为对照组.采集研究对象空腹静脉血,采用放射免疫分析法检测促滤泡成熟激素(FSH)、泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、抑制素B(INB)...