重型颅脑外伤院前急救进展

《2010中国卫生统计年鉴》显示,2009年城乡居民主要疾病病死率及死因构成中"损伤和中毒"列第5位,城市占5.59％,农村占8.25％,是45岁以下人群最主要的死亡原因.外伤性脑损伤(TBI)在"损伤和中毒"中占有较大的比例,TBI已经对社会造成巨大危害,成为重要的公共卫生问题,需要迫切解决[1].     

慢性硬膜下血肿住院期二次手术一例并文献复习

慢性硬膜下血肿（Chronic subdural hematoma,CSDH）是神经外科常见病,约占创伤性颅内血肿的10%,好发于60岁以上老年人,绝大多数患者需手术才能治愈。其中钻孔引流是目前公认的治疗CSDH的首选方法[1],其次为开颅、内镜、穿刺等术式,不同的患者术式的选择尚无统一标准。本文总结我科1例CSDH患者住院期二次手术的诊治资料并复习相关文献报道如下：     

胶质瘤中CD133、Nestin和ABCG2阳性细胞及其壁龛分布

目的探讨胶质瘤干细胞生存微环境—壁龛的结构和分布特征。方法采用免疫组化法检测26例胶质瘤标本中CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及壁龛的表达,计算其阳性细胞及壁龛数,并分级,分析其与病理分级的相关性。结果低级别(Ⅱ级)12例,高级别14例(Ⅲ级10例、Ⅳ级4例)。CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及其壁龛多半分布于血管周围以及血管相对富集的肿瘤边缘,三者均与病理分级呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论 CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及壁龛均以血管周围分布为主,与病理分级呈正相关关系;胶质瘤干细胞壁龛在胶质瘤发生、发展和浸润扩散中起着重要作用。     

胶质瘤C6肿瘤干细胞蛋白质组学初步分析

目的: 运用蛋白质组学的方法,对C6脑肿瘤干细胞(BTSC)和非BTSC细胞进行配对研究,建立差异性蛋白文库,为探讨胶质瘤病因提供初步线索.方法: 在C6细胞中,参照神经干细胞(NSC)培养条件进行培养.出现典型的神经球后,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等,以及诱导分化等方法,鉴定神经球细胞是否为BTSC.收集神经球和非神经球细胞,进行配对,利用双向凝胶电泳(2D-PAGE)检测细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.结果: C6细胞在NSC培养条件下,出现比较典型的神经球.神经球细胞nestin阳性,NSE和GFAP阴性.经诱导发生分化,分化后细胞形态与C6相似,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记,证实这种神经球细胞为肿瘤干细胞.在2D-PAGE结果中,C6肿瘤干细胞和非干细胞配对比较,有统计学差异(P＜0.05)的蛋白点共有84个,大于2倍差异蛋白点有50个,大于3倍的有17个,大于4倍的有6个,最大差异倍数为11.607 2.在BTSC中,有55个差异蛋白表达增多(上调),29个蛋白表达下降(下调).结论: 胶质瘤C6细胞系中存在肿瘤干细胞,在蛋白质组学方面与非BTSC细胞有明显差异.     

维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥疗效的影响

目的探讨维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥（BCNU）疗效的影响。方法制作裸鼠胶质瘤U251模型,分别给予BCNU和BCNU＋维拉帕米进行治疗,测量肿瘤大小,用免疫荧光染色检测肿瘤中P-糖蛋白（P-gp）,多药耐受蛋白1（MRP1）和肺耐药相关蛋白（LRP）的表达。结果 BCNU＋维拉帕米组中,肿瘤大小明显比BCNU组减小,尤其是第一至四周更加明显（P〈0.05）。肿瘤细胞中LRP,P-gp和MRP1均为阳性,主要在细胞膜表达,从形态学上两组差别并不明显。结论维拉帕米在体内有明显增加胶质瘤U251对BCNU的敏感性,逆转耐药的作用。     

氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的探讨氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞体外增殖的影响。方法用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测不同浓度的氯丙咪嗪对U251细胞增殖活性的影响。根据结果,选取二个不同浓度组检测细胞形态学的变化、台盼兰染色细胞死亡计数、细胞凋亡染色、流式细胞术检测等。结果依据MTT实验结果,选取氯丙咪嗪57μmol/L和28.5μmol/L两个浓度进行台盼兰染色、细胞形态学、细胞凋亡染色和流式细胞术检验。结果证实,氯丙咪嗪对U251细胞有明显的抑制作用。结论氯丙咪嗪具有明显的抑制胶质瘤U251细胞增殖的功能,促进其凋亡,可作为胶质瘤化疗的备选药物。     

胶质瘤CD133阳性和阴性U87细胞蛋白质组学分析

目的 通过对人脑胶质瘤U87细胞中CD133+和CD133-细胞进行配对研究,寻找差异性蛋白.方法 通过磁珠选择分离U87中CD133+和CD133-细胞,利用双向凝胶电泳(2D - PAGE)检测上述细胞总体蛋白,分析差异性蛋白点.通过质谱( MALDI -TOF - MS)对蛋白点进行鉴定,建立两种细胞差异性蛋白文库.结果 CD133+和CD133-细胞配对比较,蛋白质组学检测结果中,差异有统计学意义(P＜0.05)的2D - PAGE蛋白点共有73个,＞1.5倍差异蛋白点有46个,＞2倍差异蛋白点有27个,＞3倍差异蛋白点有8个.在CD133+ U87细胞中,有10个蛋白表达增多(上调),63个蛋白表达下降(下调).共得到44张高质量质谱肽质量指纹图谱(PMF),鉴定了35种蛋白质.结论 CD133+和CD133-细胞是同一细胞株中两种不同的细胞,蛋白方面存在的差异,将成为进一步研究它们相互关系的重要靶点.     

转位分子蛋白对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的 利用相对分子质量为18000的转位分子蛋白(TSPO)的特异性配体1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰(pk11195)研究TSPO对人脑胶质瘤U251增殖的影响及机制,为人脑胶质瘤的治疗寻找新的靶点. 方法 体外常规培养U251细胞,应用100、50、25、12.5、6.25 μmol/L pk11195作用2h后MTT比色法检测细胞的增殖活性,同时设对照组(加入等量溶剂);台盼蓝染色法检测对照组和50、6.25 μmol/L pk11195组细胞死亡率的变化;Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting和免疫荧光法检测细胞TSPO的表达;2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)探针法和GSH试剂盒分别检测细胞内活性氧(ROS)和GSH的水平;曲氟胸苷(JC-1)染色法检测线粒体膜电位;荧光素酶法检测细胞内ATP含量. 结果 MTT检测显示50、25μmol/L pk11195组细胞存活率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);台盼蓝染色显示50 μmol/L pk11195组细胞死亡率、GSH水平低于对照组和6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/L pk11195组细胞凋亡率、TSPO的表达量较对照组降低,且50μmol/L pk11195组低于6.25 μmol/Lpk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/Lpk11195组ATP的含量高于对照组,且50 μmol/Lpk11195组高于6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05).pk11195组ROS水平较对照组降低,而细胞膜电位增高. 结论 TSPO具有促进U251细胞凋亡、抑制其增殖、类似于抑癌基因的作用.