重症监护室中艰难梭菌无症状携带老年患者危险因素分析

目的初步分析重症监护室中艰难梭菌(Clostridium difficile)无症状携带老年患者的危险因素,为制定有效的预防控制策略提供一定的理论依据。方法选取2016年11月1日-11月30日于浙江医院重症监护室住院的老年患者45例作为研究对象。采用酶联免疫荧光技术检测其粪便标本的艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH),同时将标本接种于艰难梭菌鉴定培养基(chroml D C.difficile agar,CDIF),用质谱仪鉴定菌株的菌种。结果 45例患者中,共检出艰难梭菌18株,阳性率为40.00%。艰难梭菌分离率在年龄、性别、住院史、使用抗菌药物种类以及不同基础疾病等方面差异无统计学意义(P0.05),在有无机械通气患者中检验结果差异有统计学意义(P0.05)。结论重症监护室中老年患者粪便标本艰难梭菌培养阳性率高,应加强对此类患者艰难梭菌的监测和筛查,其中的机械通气患者尤其需要密切关注。     

老年人亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药性研究

目的 明确我院老年病人临床分离铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及耐碳青霉烯菌株的基因型。方法 收集我院2006年5月-2009年5月自临床老年病人分离的262株铜绿假单胞菌,纸片扩散法测定其对16种抗菌药物的耐药性;琼脂稀释法和E test法测定耐碳青霉烯菌株对14种抗菌药物的MIC值,PCR扩增及克隆测序分析金属酶基因型。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析携带金属酶基因型菌株的同源性。结果 262株铜绿假单胞菌中筛选到104株耐碳青霉烯。104株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦两个含舒巴坦制剂药物耐药率分别为78.9％和35.9％,对多黏菌素E耐药率最低为6.0％,对米诺环素耐药率58.3％,其余抗菌药物耐药率均大于70.0％;104株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中12株携带金属酶基因,10株检测到有携带VIM-2基因的1类整合子。PFGE分型中12株菌株属于5个克隆株。结论 在我院流行的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中,金属酶基因不是最主要的基因型,金属β-内酰胺酶均为VIM-2型金属酶,耐药基因盒分布于不同的1类整合子中,整合子播散是最主要的流行方式。     

宫颈癌患者手术前后血清TK1检测的临床意义

[目的]探讨血清胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)在宫颈癌筛查、诊断及治疗中的作用.[方法]采用免疫印迹增强化学发光法检测125例宫颈癌患者手术前后血清TK1、鳞状细胞癌相关抗原(squamous cell carcinoma-related antigen,SCC-Ag)、肿瘤抗原125 (cancer antigen 125,CA125)浓度,并对TK1与SCC-Ag、CA125作为宫颈癌诊断指标的相关参数进行评估.[结果]TK1浓度与细胞分化程度、FIGO分期明显相关,均有统计学意义(P＜0.05).与正常对照组比较,宫颈癌组术前TK1浓度增高约4.8倍,SCC-Ag增高约4.2倍,CA125浓度增高约2.1倍,均有显著性差异(P＜0.05).手术切除肿瘤后,TK1浓度与术前比较明显降低(P＜0.05).血清TK1浓度的假阳性率低于CA125,特异性、阳性预测值均高于CA125,但无统计学意义(P＞0.05).SCC-Ag的假阳性率、假阴性率低于TK1,敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值均高于TK1,而有统计学意义的是假阴性率和敏感性(P＜0.05).在125例宫颈癌中,SCC-Ag诊断为假阴性的24例病例中14例为TK]阳性. [结论]TK1是一种高效灵敏的肿瘤标志物,与SCC-Ag、CA125等指标联合检测有望成为宫颈癌筛查的有效指标,在宫颈癌诊断及病情监测等方面发挥重要作用.     

sea基因定位突变体构建及其重组表达产物生物学活性的研究

目的 构建葡萄球菌肠毒素A（SEA）基因及其突变体原核表达系统，了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化。方法采用高保真PCR和TA克隆法，从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列的湖基因。采用突变引物PCR构建sea基因定位突变体。建立sea基因及其定位突变体原核表达系统。Ni—NTA亲和层析法提纯表达的目的重组蛋白。采用TCID50。法测定目的重组蛋白对Vero细胞的细胞毒性。采用MTT比色法分别检测不同浓度的目的重组蛋白促小鼠脾细胞增殖及对抑制KB和HL-60癌细胞株生长的作用。结果 所克隆的sea基因核苷酸序列与报道序列的相似性为100％，7种突变体均在既定位置获得预期的密码子突变。rSEA和各突变体重组蛋白表达量约为细菌总蛋白的52％。rSEA对Vero细胞TCID50为4．1μg，其突变体重组蛋白分别为5．8～23．5μg。1和5μg/ml的rSEA及其5种突变体重组蛋白rSEA／H187A、rSEA／H225A、rSEA／D227A、rSEA／H187A／D227A和rSEA／H225A／D227A对小鼠脾细胞均有明显的促增殖作用（P〈0．05），10和20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白促小鼠脾细胞增殖活性与100μg/ml PHA相似（P〉0．05）。5～20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白作用的小鼠脾细胞上清及其上清与脾细胞混合物均能有效地抑制KB和HL-60细胞生长（P〈0．05）。结论 本研究成功地构建了sea基因突变体及其高效原核表达系统，其表达产物的细胞毒性均有所降低。由于rSEA／H225A、rSEA／D227A、rSEA／H225A／D227A细胞毒性较低、促脾细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长活性较强，可作为研制升白细胞、抗肿瘤SEA相关药物的候选突变体。     

美国《Emerging Infectious Diseases》2005年第11期有关人兽共患病论文摘译

Toscana病毒在欧洲流行的情况；2004年泰国的高度致病性禽流感；北美、欧洲和亚洲地区科罗拉多埤热病毒和Seadornavirus的调查研究；关于老年女性宫颈HPV的检查；俄罗斯西西伯利亚地区蜱传病原体的检测。     

体检人群血浆致动脉硬化指数与血清ApoB／ApoA1比值的相关性研究

目的：探讨杭州地区体检人群的血浆致动脉硬化指数（AIP ）与ApoB/ApoA1比值的相关性。方法选取8990例体检人员,按性别和年龄进行分组,检测并分析不同性别、年龄组间的AIP、ApoB/ApoA1、LDL-C/HDL-C比值及其各指标间的相关性。结果 AIP、ApoB/ApoA1、LDL-C/HDL-C水平男性组均明显高于女性组,差异有统计学意义（ P＜0.01）。各年龄组AIP、ApoB/ApoA1、LDL-C/HDL-C水平差异有统计学意义（ P＜0.01）,且女性组随年龄增高上述各指标水平有增高趋势。ApoB/ApoA1比值≥0.9组无论男性或女性组,AIP、LDL-C/HDL-C水平均明显高于ApoB/ApoA1＜0.9组,差异有统计学意义（ P＜0.01）。Pearson相关分析显示,AIP与ApoB/ApoA1、LDL-C/HDL-C有较好的相关性（ r＝0.54、0.60,P＜0.01）。结论 AIP结合ApoB/ApoA1比值对预示动脉粥样硬化风险判断可能更有价值。     

siHybrids对耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌kpc-2基因表达水平的影响

目的 研究siHybrids对耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌kpc-2基因表达水平及其对美罗培南的抑菌效果的影响,探讨siHybrids的作用机制。 方法 将48株携带有kpc-2基因的耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌株分成对照组(不加siHybrid)、低浓度组(siHybrids为0.125 μg/ml)、高浓度组(siHybrids为8.0 μg/ml)。分别检测3组12、24、48 h后3个时间点的mRNA的量。另外再分别取3组菌液进行美罗培南药敏试验,观察3组间抑菌圈直径的大小有无差异。 结果 与对照组相比较,siHybrids干预后kpc-2基因的mRNA表达量显著下降(P＜0.05),高浓度组kpc-2基因的mRNA表达量显著低于低浓度组(P＜0.05),siHybrids的浓度与kpc-2基因的mRNA表达量呈负相关(r=-0.782,P=0.014);kpc-2基因的mRNA表达量随着siHybrids干预时间的延长而显著下降(P＜0.05)。siHybrids干预能显著增大美罗培南抑菌圈的直径(P＜0.05),不同浓度的siHybrids对美罗培南抑菌圈直径的增大幅度不同,高浓度组美罗培南抑菌圈的直径显著大于低浓度组(P＜0.05),siHybrids的浓度与美罗培南抑菌圈直径的大小呈正相关(r=0.882,P=0.024)。 结论 siHybrids能降低耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌kpc-2基因的表达水平,能提高美罗培南的抑菌效果,其作用机制是siHybrids分子特异性沉默了肺炎克雷伯菌的kpc-2基因。