拉米夫定应答不佳慢性乙型肝炎患者加用阿德福韦酯与换用恩替卡韦疗效比较

目的比较拉米夫定应答不佳慢性乙型肝炎（CHB）患者加用阿德福韦酯联合治疗与换用恩替卡韦单药治疗48周疗效。方法采用前瞻性研究方法观察2010年6月—2011年6月在浙江省诸暨市人民医院感染科和浙江大学医学院附属第一医院接受拉米夫定抗病毒治疗24周以上,但HBVDNA仍阳性的住院及门诊CHB患者120例,以随机数字表法将患者分为两组,每组各60例,一组在用拉米夫定的基础上加用阿德福韦酯联合抗病毒治疗,另一组则换用恩替卡韦单药治疗,疗程均为48周。每1～3个月检测患者的肝功能、肾功能、甲胎蛋白、HBV血清学标志物、HBVDNA、凝血酶原时间（PT）、肝脏的超声波或行CT检查。采用χ2检验比较治疗48周时两组的病毒学、血清学的应答率和耐药发生率,观察两组的不良反应。结果基线HBVDNA介于3～5lg拷贝／mL的拉米夫定应答不佳者,加用阿德福韦酯治疗至48周后有86．8％（33／38）的患者HBVDNA转阴,而换用恩替卡韦单药治疗组有69．2％（27／39）的患者转阴,两组比较差异具有统计学意义（χ2=4．578,P〈0．05）;基线HBVDNA〉5lg拷贝／mL的拉米夫定应答不佳者,加用阿德福韦酯的患者HBVDNA转阴率为72．7％（16／22）,而换用恩替卡韦单药治疗患者只有52．4％（11／21）,两组差异也具有统计学意义（χ2=4．865,P〈0．05）。拉米夫定应答不佳者经加用阿德福韦酯联合治疗后48周无一例发生病毒学突破,也无耐药的发生;而换用恩替卡韦治疗组则有5例发生病毒学突破,3例检测到基因突变,其中2例为rtM204V、rtL180M和rtS202G变异,1例为rtM204V、rtL180M和rtT184A,所有发生基因突变的病例均为基线HBVDNA〉10。拷贝／mL者。结论拉米夫定应答不佳CHB患者加用阿德福韦酯比换用恩替卡韦单药治疗更能抑制HBV复制,且可减少病毒耐药的发生。     

拉米夫定联合阿德福韦酯与恩替卡韦单药治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化二年疗效比较

目的比较拉米夫定（LAM）与阿德福韦酯（ADV）初始联合与恩替卡韦（ETV）单药治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化2年的疗效。方法选取2007年1月—2008年4月浙江省上虞市人民医院和浙江大学医学院附属第一医院120例失代偿期乙型肝炎肝硬化患者作为研究对象,其中60例接受LAM联合ADV初始抗病毒治疗,60例接受ETV单药抗病毒治疗。每1～3个月检测患者肝功能、肾功能、甲胎蛋白、HBV血清学标志物、HBVDNA、凝血酶原时间（PT）、肝脏超声波或CT。采用重复测量方差分析和X检验比较两组在治疗12和24个月时的疗效、不良反应和累计生存率。结果LAM和ADV初始联合治疗组和ETV单药治疗组各有45例至随访结束。两组HBVDNA转阴率和ALT复常率在治疗12个月（X^2=2．12和2．88,P〉0．05）和24个月时（X^2=3．21和3．24,P〉0．05）差异均无统计学意义;治疗24个月时HBeAg血清学转换率分别为43．5％（10／23）和36．4％（8／22）,差异有统计学意义（X^2=4．09,P〈0．05）。治疗12个月和24个月后,LAM和ADV初始联合组分别有2例（4．4％）和3例（6．7％）发生病毒学突破,但均未检测到病毒学变异;ETV单药组分别有I例（2．2％）和2例（4．4％）发生病毒学突破,并在24个月检测到1例（2．2％）发生病毒变异。LAM＋ADV初始联合组和ETV组治疗24个月后分别与治疗前（基线）相比,Alb水平上升（F=18．9和17．3,P〈0．05）,TBil和ALT下降（F=16．5、17．1和23．7、24．8,P〈0．05）,PT缩短（F=22．7和24．5,P〈0．05）,CTP评分和MELD评分下降（F=18．5、17．8和24．2、23．8,P〈0．05）。LAM和ADV初始联合治疗组累计病死率（或肝移植）为16．7％（10／60）,ETV单药组累计病死率（或肝移植）为18．3％（11／60）。两组均未发现有血清肌酐超过正常值上限的病例。结论LAM与ADV初始联合或ETV单药治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化患者均能明显抑制HBV复制,改善肝功能,降低病死率,且耐药变异率低;联合组HBeAg血清学转换率在24个月时高于单药组,两种方案在临床上均可使用。     

一起聚集性发病的新型冠状病毒肺炎患者临床和流行病学特征分析

目的 分析浙江一起宗教大型集会活动导致的聚集性新型冠状病毒肺炎的临床表现及流行病学特征,加强对新型冠状病毒感染具有聚集、暴发流行性的认识,从而有效控制其传播。方法 收集浙江2020年1-2月份新型冠状病毒肺炎聚集性发病中21例肺炎病例并回顾性分析其临床及流行病学特征。结果 21例患者均为中老年女性,年龄（58.94±7.45）岁,10例（47.6%）有基础疾病,仅有1例患者被诊断为重症病例,其余均为轻症,期间没有患者死亡。发病时最常见的症状为发热［19（90.5%）］,咳嗽［15（71.4%）］,咳痰［9（42.8%）］,少见症状包括乏力［1（4.7％）］、腹泻［1（ 4.7％）］及头疼［1（4.7％）］,从接触到疾病发作的中位时间为7（3~11.5）天。入院时57.14%（12/21）的患者白蛋白减少, 42.85%（9/21）的患者钠离子减少,38.09%（8/21）的患者尿素氮降低,28.57％（6/21）的患者淋巴细胞减少及各14.28%（3/21）的患者钾离子、白细胞减少,另外,血糖、C反应蛋白、血清乳酸脱氢酶、转氨酶升高的患者分别占61.90%（13/21）、61.90%（13/21）、33.33%（7/21）、23.80%（5/21）. 所有患者入院时肺部CT检查均有异常改变,影像学多表现为以磨玻璃/斑片样改变为主的双侧肺部感染。结论 本起聚集性病例起病以中老年女性为主,群体聚集可导致新型冠状病毒的传播扩散,且新型冠状病毒老年人更加易感,非常时期应限制大型集会,减少人员流动、减少接触,有助于疾病控制。     

不同基因融合方式对HIV-1AE2f Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响

目的 构建表达HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef融合基因的DNA疫苗,并比较gp145-tat-rev-nef(AE-Gp145TRN)和tat-rev-integrase(c-half)(AE-TRIVN)两种不同基因融合方式对Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响.方法 按人源密码子使用频率对HIV-1 AE2f的gp145、tat、rev和nef基因序列进行优化并构建DNA疫苗.经Western blot进行体外表达检测后,利用小鼠模型比较AE-Gp145TRN与AE-TRIVN的免疫原性.结果 限制性酶切及DNA测序结果表明AE-Gp145TRN融合基因表达重组质粒构建正确;Western blot结果显示其能够在体外表达相应的融合蛋白.小鼠免疫后IFN-γ ELISPOT检测结果显示:AE-TRIVN所活化的针对Tat、Rev和Nef蛋白的总T细胞反应强度[(148±91)SFCs/106脾细胞]显著高于Gp145TRN[(55±28)SFCs/106脾细胞,P=0.017].T细胞反应分布情况显示:AE-TRIVN所活化的T细胞反应主要集中在Rev蛋白上;而Gp145TRN则可以显著提高对Nef蛋白的免疫识别.结论 AE-TRIVN与Gp145TRN在小鼠体内所活化的T细胞反应特征有明显区别,提示不同的抗原融合方式可能影响融合基因DNA疫苗的免疫结果.

Abstract：

Objective To construct DNA vaccine expressing HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef fusion gene( AE-Gp145TRN) and to compare the immunogenicities of DNA vaccines expressing Tat, Rev and Nef in gene fusion formulations of tat-rev-integrase(c-half)-vif-nef( AE-TRIVN) and AE-Gpl45TRN. Methods DNA vaccine was constructed by inserting the codon optimized HIV-1 AE2( gp145-tat-rev-nef fusion gene into mammalian expression DNA vector. In vitro expression efficiency of the constructed DNA vaccine was determined by Western blot and the immunogenicities of AE-Gpl45TRN and AE-TRIVN were compared by immunizing female BALB/c mice. IFN-r ELISPOT assay was used to read out the specific T cell immunity. Results Western blot assay showed the constructed DNA vaccine could be expressed efficiently in vitro. After vaccination, AE-TRIVN mounted significantly higher T cell responses against Tat, Rev and Nef[(148±91)SFCs/106 splenocytes]than Gpl45TRN[(55±28) SFCs/106 splenocytes]. Specific T cell responses elicited by AE-TRIVN predominantly targeting Rev, whereas Gpl45TRN could significantly enhance T cell responses against Nef. Conclusion AE-TRIVN and Gpl45TRN induced distinct T cell response modalities, which implied different gene fusion formulations may affect the immunogenicity of specific DNA vaccines.     

不同基因融合方式对HIV-1AE2f Tat、Rev和Nef蛋白免疫原性的影响

Objective To construct DNA vaccine expressing HIV-1 AE2f gp145-tat-rev-nef fusion gene( AE-Gp145TRN) and to compare the immunogenicities of DNA vaccines expressing Tat, Rev and Nef in gene fusion formulations of tat-rev-integrase(c-half)-vif-nef( AE-TRIVN) and AE-Gpl45TRN. Methods DNA vaccine was constructed by inserting the codon optimized HIV-1 AE2( gp145-tat-rev-nef fusion gene into mammalian expression DNA vector. In vitro expression efficiency of the constructed DNA vaccine was determined by Western blot and the immunogenicities of AE-Gpl45TRN and AE-TRIVN were compared by immunizing female BALB/c mice. IFN-r ELISPOT assay was used to read out the specific T cell immunity. Results Western blot assay showed the constructed DNA vaccine could be expressed efficiently in vitro. After vaccination, AE-TRIVN mounted significantly higher T cell responses against Tat, Rev and Nef[(148±91)SFCs/106 splenocytes]than Gpl45TRN[(55±28) SFCs/106 splenocytes]. Specific T cell responses elicited by AE-TRIVN predominantly targeting Rev, whereas Gpl45TRN could significantly enhance T cell responses against Nef. Conclusion AE-TRIVN and Gpl45TRN induced distinct T cell response modalities, which implied different gene fusion formulations may affect the immunogenicity of specific DNA vaccines.     

恩替卡韦分散片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效观察

目的研究恩替卡韦分散片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的临床治疗效果,为提高治疗效果提供参考。方法选取2013年1月-2015年1月医院诊治的50例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者资料进行分析,采用随机对照方法将患者分为对照组和试验组,每组各25例;对照组采用阿德福韦酯治疗,试验组采用恩替卡韦分散片治疗,比较两组疗效,采用SPSS18.0软件对数据进行统计分析。结果试验组治疗总有效率为92.0%,显著高于对照组的76.0%(P0.05);两组治疗前谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白/球蛋白比值(A/G)及总胆红素(TBIL)指标差异无统计学意义;试验组患者治疗后ALT、AST等指标显著低于对照组(P0.05);试验组治疗后A/G及TBIL指标,显著高于对照组(P0.05);试验组HBV-DNA、HBeAg转阴率及HBeAg/抗HBe转换率,显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者采用恩替卡韦分散片治疗效果理想,能够提高临床疗效,改善患者肝功能。     

血清中对氧磷酯酶1活性的自动化检测

目的血清对氧磷酯酶1(PON1)的自动化检测方法建立及评价.方法在Hitachi 7600上建立自动化测定血清PON1的参数,对该方法的重复性、线性、干扰分析进行评估.并对正常人血清PON1活性进行分析.结果低、中、高3个浓度PON1的总变异分别为6.5%、4.2%、1.7%,测定线性可达800 U/ml.标本中胆红素浓度在430 μmol/L以下,血红蛋白浓度在5.5 g/L以下以及三酰甘油浓度在25.0 mmol/L以下对血清PON1的测定均无明显影响.正常人血清PON1活性呈正态分布,参考范围为45.5～268.8 U/ml.结论建立的血清PON1自动化检测方法简单、可靠、快速、廉价,适合临床实验室常规测定需要.     

白细胞介素-1O启动子区域627位基因多态性与乙型肝炎肝硬化的关系

目的研究IL-10启动子区627位点多态性与乙型肝炎肝硬化的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—PFLP）等技术检测220例乙型肝炎肝硬化患者及200名健康对照者IL—10启动子627位等位基因及基因型频率的分布情况，分析其与肝硬化发病风险的相关性。结果IL—10启动子627位点AA和CA基因型及等位基因A在乙型肝炎肝硬化中的分布明显高于对照组（x^2=7．46、5．72和13．78，P值〈0．01或0．05）。结论IL-10启动子627位点基因多态性与乙型肝炎肝硬化相关。     

内毒素致病机理研究进展

内毒素血症与内毒素性休克是临床常见的顽症。目前认为内毒素引起的病理生理学改变是通过其诱导的一系列炎症介质和细胞因子所介导。新的研究表明,针对这些生物活性物质的拮抗剂在一定程度上能减轻内毒素的毒性作用。这不仅对探讨内毒素的致病机理大有裨益,而且为临床上治疗内毒素有关疾患提供了理论依据。本文着重介绍这些物质的生物活性以及与内毒素致病机理的相互关系。     

细菌性脑膜炎患者脑脊髓液中肿瘤坏死因子含量测定

为探讨肿瘤坏死因子(TNFa)在细菌性脑膜炎致病机理中的作用,测定了50例细菌性脑膜炎患者脑脊髓液(CSF)中TNFa的含量,结果表明90％(45/50)细菌性脑膜炎患者CSF中TNFa含量升高(>64pg/ml),其中以化脓性脑膜炎升高最为显著,提示TNFa直接参与了细菌性脑膜炎的致病过程。而非细菌性脑膜炎患者CSF中TNFa含量并不上升。因此检测中枢神经系统感染患者CSF中TNFa含量不失为一项较好的鉴别细菌性和非细菌性脑膜炎的指标。