深圳市甲型病毒性肝炎血清流行病学调查

目的 了解深圳市常住人口抗HAV-IgG水平现状,为政府部门制订甲型病毒性肝炎防治措施提供依据.方法 采用多阶段随机抽样方法在全市1 ～59岁常住居民(居住时间＞6个月)中进行抽样,收集有效调查问卷和血清标本3 371份,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对血清中抗HAV-IgG 进行血清学检测.结果 深圳市常住人群抗HAV-IgG阳性率为63.2％;抗HAV-IgG阳性率女性高于男性,且随年龄增长而升高,随文化程度升高而降低;深圳出生的15岁以下儿童甲肝疫苗接种率和抗HAV-IgG阳性率均高于非深圳出生;但甲肝疫苗免疫效果在甲肝疫苗初种后5 ～10年后逐渐下降.结论 虽然深圳市常住人口中甲肝抗HAV-IgG阳性率低于全国和全省平均水平,但应加强甲肝防治知识的健康教育,重视6～15岁年龄组人群甲肝疫苗的补种.     

深圳市龙岗区人群华支睾吸虫感染现状及健康干预对策

目的了解深圳市龙岗区人群华支睾吸虫感染现状和流行病学特征,为制定防治策略提供依据。方法采用整群抽样方法对不同职业人群进行华支睾吸虫血清学检测和知识行为问卷调查。结果共调查1 141名居民,检出血清华支睾吸虫IgG抗体阳性90例,感染率为7.89%,男性为9.93%,女性为5.82%,差异有统计学意义(χ2=6.632,P=0.010);31~40岁年龄组感染率最高(9.59%);机关干部感染率最高(14.02%),商服人员感染率最低(4.17%),不同职业间感染率差异有统计学意义(χ2=24.886,P=0.000);机关干部和本地企业人群华支睾吸虫感染途径、健康危害和预防措施的知晓率明显高于商服人群和劳务工,且家庭生熟砧板分开行为率较高,但不吃未煮熟鱼类的健康行为形成率低于商服人群和劳务工人群;检出感染的人群防制知识知晓率和健康行为形成率都稍低于总体水平。结论龙岗区人群华支睾吸虫感染有上升趋势,应广泛宣传食源性寄生虫病防治知识,继续倡导健康饮食行为。     

间日疟原虫海南株SSUrRNA编码基因的克隆及其序列分析

目的克隆间日疟原虫海南株红内期小亚基核糖体核糖核酸（SSUrRNA）编码基因片段,并进行序列特征分析。方法采用聚合酶链反应技术从海南间日疟患者血样DNA中扩增出间日疟原虫SSUrRNA基因片段,纯化后与pGEM-Teasy质粒连接构建重组子并转化大肠杆菌JM109;阳性克隆以双酶切和PCR鉴定后,进行序列测定,采用BLAST软件分析其特征。结果 PCR扩增出间日疟原虫红内期SSUrRNA基因特异性片段大小约为998 bp;阳性克隆重组质粒经双酶切及PCR鉴定与预期结果一致;核酸序列测定显示插入的SSUrRNA基因扩增片段,含有998个核苷酸,与GenBank中的间日疟原虫Sal 1株、Pv2008/TR/DEL株及El Salvador株相同序列进行比对,其同源性均大于99%。结论成功克隆间日疟原虫海南株红内期SSUrRNA编码基因序列,该序列在不同地理株间相对稳定保守。     

纳洛酮对急性有机磷中毒患者肾脏保护作用的研究

目的研究纳洛酮对急性有机磷中毒患者肾脏功能的影响及其意义。方法按国家标准（GB7794—87）选择急性有机磷中毒患者84例,随机分为纳洛酮治疗组42例和常规治疗组42例。两组病例均进行洗胃,静注阿托品、氯磷定和综合治疗。纳洛酮治疗组给予纳洛酮0．8～1．2mg静脉注射,疗程3～10d。分别动态监测各组血清BUN、SCr、24h尿蛋白定量的变化。结果纳洛酮治疗组治疗72h后血清BUN、Cr、24h尿蛋白定量均比对照组明显下降（P〈0．05）,治疗总有效率也明显高于常规治疗组。结论纳洛酮对急性有机磷中毒患者。肾脏具有保护作用。     

纳洛酮对急性有机磷中毒患者肾脏保护作用的研究

目的 研究纳洛酮对急性有机磷中毒患者肾脏功能的影响及其意义.方法 按国家标准(GB7794-87)选择急性有机磷中毒患者84例,随机分为纳洛酮治疗组42例和常规治疗组42例.两组病例均进行洗胃,静注阿托品、氯磷定和综合治疗.纳洛酮治疗组给予纳洛酮0.8～1.2 mg静脉注射,疗程3～10 d.分别动态监测各组血清BUN、SCr、24 h尿蛋白定量的变化.结果 纳洛酮治疗组治疗72 h后血清BUN、Cr、24 h尿蛋白定量均比对照组明显下降(P＜0.05),治疗总有效率也明显高于常规治疗组.结论 纳洛酮对急性有机磷中毒患者肾脏具有保护作用.     

基于SSUrRNA基因序列的间日疟原虫LAMP检测技术的建立

目的克隆分析间日疟原虫小亚基亚单位核糖体核糖核酸(SSUrRNA)特异性基因序列,建立间日疟原虫环介导等温扩增(LAMP)检测技术。方法针对间日疟原虫SSUrRNA种特异性基因序列设计1对引物,采用聚合酶链反应(PCR)从血样核酸提取物中扩增SSUrRNA基因片段,纯化后与pGEM-Teasy载体连接,构建重组质粒并转化大肠埃希菌JM109,PCR与双酶切鉴定筛选阳性克隆并测序,设计6条寡核苷酸片段,LAMP检测感染血样中间日疟原虫DNA,扩增产物作琼脂糖电泳分析或直接荧光染色肉眼观察。结果间日疟原虫SSUrRNA基因扩增片段大小约为235 bp;阳性克隆重组质粒插入的SSUrRNA基因扩增片段含有235个核苷酸,与GenBank中的Sal-1株、Belem株间日疟原虫相同序列进行比对,同源性为100%,与PV2008/TR/DEL株、PVK1294株、E1 Salvador株的同源性均为99%,与三日疟原虫、卵形疟原虫及恶性疟原虫的序列同源性均低于95%。将含有SSUrRNA靶基因的重组质粒以蒸馏水倍比稀释后做LAMP,试验的灵敏度为10 copy/μl;特异性检验显示间疟原虫患者血样DNA呈阳性反应,恶性...     

结核分枝杆菌Ag85B基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

目的体外扩增结核杆菌Ag85B基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-Ag85B,并重组耻垢分枝杆菌(Mycobacteriums megmatis mc2155)。方法采用聚合酶链式反应(PCR)方法,体外扩增结核杆菌Ag85B基因,克隆入pGEMT载体;构建亚克隆ps3000-Ag85B大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,电转化方法将有Ag85B基因的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌中。热诱导此重组耻垢分枝杆菌,用SDS-PAGE电泳观察Ag85B蛋白的表达,Western blot鉴定其生物学活性。结果PCR扩增结核杆菌Ag85B基因片段大小为990bp,构建的穿梭质粒ps3000-Ag85B酶切片段为990bp,与理论值相符。经Western blot检测,该重组耻垢杆菌表达蛋白能被结核病患者血清识别。结论Ag85B重组耻垢分枝杆菌构建成功,为下一步表达Ag85B蛋白的重组BCG(Bacilli Calmette-Guérin)疫苗的研究奠定了基础。     

两种血清学指标联合检测对Ⅰ型糖尿病肾病早期诊断的临床意义

目的探讨血清中糖化血红蛋白和胱抑素-C 的联合检测对Ⅰ型糖尿病肾病早期诊断的价值。方法选择2012年1～11月在宁强县天津医院住院并确诊为Ⅰ型糖尿病肾病患者100例（实验组）和同期健康体检者100例（对照组），同时检测对象血清中糖化血红蛋白和胱抑素-C 的含量。结果Ⅰ型糖尿病肾病各期患者血清中糖化血红蛋白和胱抑素-C 浓度水平与对照组相比明显升高，差异有统计学意义（P ＜0．05或 P＜0．01）。不同程度Ⅰ型糖尿病肾病血清中糖化血红蛋白和胱抑素-C 浓度水平均明显增高，趋势呈正相关，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论血清中糖化血红蛋白和胱抑素-C 测定有助于Ⅰ型糖尿病肾病早期诊断，能为临床医生提供有价值的诊断指导依据。     

德国小蠊细胞色素P450 CYP4G19基因的原核表达及多克隆抗体制备

目的 构建细胞色素P450 CYP4G19基因部分片段的原核表达载体并诱导其表达,纯化表达的融合蛋白并制备CYP4G19多克隆抗体.方法 应用RT-PCR扩增CYP4G19基因部分片段,产物经T-A克隆、测序鉴定,亚克隆入原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,镍离子亲和层析法纯化重组蛋白后,免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA及Western.blot检测多抗的效价及特异性.结果 从德国小蠊cDNA中克隆出一段771bp的亲水性基因片段,在大肠杆菌中诱导表达出约32000 Mr、以包涵体形式存在的P450重组蛋白.将纯化、复性的重组蛋白免疫 9,得到了滴度高于1:10<'6>的高效价多克隆抗体.Western-blot显示此多抗能与32000 Mr的重组蛋白特异结合.并能识别天然的德国小蠊微粒体P450蛋白.结论 利用原核表达的CYP4G19融合蛋白具有良好的免疫原性.制备出效价高、特异性强的抗德国小蠊CYP4G19多克隆抗体,为下一步关于德国小蠊CYP4G19蛋白表达特性及其抗药性功能的深入研究提供了重要的实验工具.     

深圳市2010-2011年人群土源性线虫感染状况调查

目的 了解深圳市土源性线虫人群感染状况,为制订防治措施提供科学依据.方法 选取3周岁以上常住居民作为调查对象,采集粪便标本,应用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz)一送三检查蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫等土源性寄生虫虫卵,分析其感染率和感染度.结果 在宝安、龙岗、福田、南山、光明5个区总计调查3 935人,感染人数19人,平均感染率为0.48％,其中蛔虫、鞭虫、钩虫和蛲虫感染率分别为0.13％、0.28％、0.05％和0.03％;蛔虫、鞭虫、钩虫感染者每克粪便算术平均虫卵数分别为242、81.6和120,均为轻度感染.5个区中感染率最高的是宝安区,为0.86％,最低的是福田区,为0.13％,各区感染率差异无统计学意义(x2=6.81,P＞0.05).男女平均感染率分别为0.56％和0.40％,差异无统计学意义(x2=0.59,P＞0.05).感染率以＜20岁(0.55％)、20～岁(0.60％)和30～岁(0.65％)这3个年龄组最高.结论 深圳市土源性线虫人群感染状况处于较低水平,感染率低于2001-2004年广东省人体重要寄生虫病感染状况调查水平.