基于微流控芯片的动态胚胎培养

目的:在微流控芯片上模拟输卵管收缩和纤毛运动引起的流体机械刺激和生化刺激,发展一种接近生理状态的胚胎动态培养方法,探讨其在体外受精-胚胎培养中的价值。方法:按功能构建微流控芯片,优化流体速度,使小鼠受精卵在芯片微孔中接受持续的灌注培养,同时在芯片上实现胚胎发育的监测。比较用微流控芯片法和常规微滴培养法的胚胎发育情况和囊胚形成率。结果:微流控培养系统流体速度在10μl/h时胚胎发育情况较好,获得的囊胚率最高(47.9%,23/48)。体外受精胚胎在微流控培养组5~8细胞发育率、桑葚胚发育率和囊胚形成率均明显高于微滴培养组(53.1%/46.6%、50.3%/41.5%和45.5%/35.5%),两组之间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。而两种培养方法获得的2~4细胞发育率分别为63.4%和60.2%,差异无统计学意义。结论:胚胎培养过程中的物理微环境会影响胚胎质量,这种基于微流控芯片的胚胎动态培养方法可以显著改善胚胎质量,有希望成为辅助生殖技术中胚胎培养的一种新型工具。     

微流控芯片精子分选法对精子常规参数及DNA完整性的影响

目的:研究微流控芯片精子优选技术对精子常规参数及DNA完整性的影响。方法:自行设计制作微流控芯片,利用芯片处理技术和上游法对40例精液标本进行精子优选,通过计算机辅助精液分析系统及染色质扩散试验从精子常规参数及DNA完整性两个方面评价精液体外处理对精子的影响。结果:精液经微流控芯片法和上游法处理后,精子活力、精子正常形态率以及精子尾部肿胀率均有显著提高(P<0.01),精子的DNA损伤率明显降低(P<0.01)。微流控芯片法与上游法相比,优选后前者精子DNA损伤率明显低于后者[(8.4±5.8)%vs(16.4±9.2)%,P<0.01],而其他参数差异无显著性。结论:微流控芯片技术在精子优选中能获得精子DNA损伤程度小的高质量精子。     

肺炎链球菌对泰利霉素等抗菌药物的体外抗菌活性

目的了解本院分离的肺炎链球菌对泰利霉素等抗菌药物的体外抗菌活性。方法对本院2005--2007年从各种临床标本收集的97株肺炎链球菌，用K—B纸片法进行药敏试验，测定这些菌株对泰利霉素等3种新近上市和其他7种临床常用抗菌药物的耐药性。结果97株肺炎链球菌对泰利霉素和利奈唑胺的敏感率均为100％，对喹奴普丁-达福普汀也未发现耐药菌株，只是有18．8％的菌株表现为中介。其他抗菌药物的耐药情况如下：对红霉素、克林霉素、万古霉素、左氧氟沙星、氯霉素和四环素的耐药率分别为60．8%、58．8％、0％、2．1％、12．8%和64．5％，对青霉素的敏感率为85．6％。结论本院尚未用于临床的3种新近上市的抗菌药物泰利霉素、利奈唑胺和喹奴普丁-达福普汀，对本院分离的肺炎链球菌有良好的体外抗菌活性。而上述细菌对红霉素、林可霉素以及四环素有较高的耐药性。     

广州地区男性不育患者精液分析

目的对广州地区男性不育患者的精液进行常规分析,了解广州地区男性不育患者精液质量的现状。方法按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)的标准,应用西班牙人类精液分析系统(SCA)对2017年1月至2017年12月的2268例不育男性患者的精液进行常规检测和采用改良巴氏染色法分析精子正常形态率。分析指标包括精液体积,精液p H值,精子浓度,前向运动精子百分率,前向运动精子总数,精子正常形态率等参数,并根据年龄分为≤25岁、26-30岁、31-35岁、36-40岁、≥41岁共5组,分析比较各组精液参数。结果 2268例不育男性精液中正常者366例(16.1%),异常者1902例(83.9%),其中精液体积异常210例(9.26%),精液p H异常330例(14.55%),精子浓度异常289例(12.74%),前向运动精子百分率异常1038例(45.77%),精子正常形态率异常1055例(46.51%),无精子症41例(1.79%),各年龄组中36-40岁、≥41岁两组精液体积、前向运动精子百分率、前向运动精子总数明显低于其他三组,有显著性差异(P0.05),其他各组间差异无统计学意义(P0.05)。结论广州地区不育男性精液检查中,精液质量正常比例呈下降趋势,且随着年龄的增长精液质量也明显下降。     

利用微流控芯片技术进行人类精子优选的效果分析

目的:通过使用微流控芯片技术对男性不育症患者的精子进行选择,观察该方法优选精子的效果。方法:选择80例男性不育症患者,选择其中精子活力a级+b级<35%的患者30例,分别采用自行设计和制造的微流控芯片进行优选以及采用改良后的上游法进行优选,对于剩余50例患者采用微流控芯片法进行优选,观察优选后精子活力、畸形率等参数。结果:50例患者经过微流控芯片优选后,精子活力显著提高,精子畸形率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。对于30例中度弱精子症患者两种方法优选后精子活力显著提高、畸形率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),且微流控芯片法优于改良后上游法。结论:微流控芯片法优选精子效率高、操作简便、对精子几乎无损害,适合在临床辅助生殖中普及和推广。     

精液采集地点对精液质量影响的实验研究

目的:调查在医院门诊和在家中通过自慰法收集的精液质量之间的差异。方法:对342例男性患者在医院门诊和在家中通过手淫法收集的精液样本,按WHO第5版操作标准常规分析精液,并测量反映附睾、前列腺和精囊腺功能状态的精浆标志物,即精浆中性α-葡糖苷酶(NAG)、锌(Zn)和果糖(FRU)含量。按照取精地点分成两组:在医院门诊和在家中,软件分析取精地点与精液参数的关系。结果:在家中收集的精液在精液量、精子浓度、精子总数和前向运动精子百分率(PR)方面均明显优于在医院门诊收集的精液;而精子形态、NAG、Zn和FRU在两组之间无显著性差异。精子浓度异常(20×106/ml)和精子活动率异常[PR32%]的精液样本,在家中获得的样本率[18%(62/342);64%(219/342)]均明显低于在医院门诊取精室获得的样本率[30%(103/342);75%(256/342)],两组之间均有显著差异。结论:与在医院门诊取精液相比,在家中手淫法取精液能获得更好的精液质量。在不孕症评估过程中,应该考虑取精液的环境因素。     

微流控芯片在精子分选中的应用

前、后精子活力分别为(71±3.4)%和(70±2.5)%,差异无统计学意义(t=0.65,P>0.05).结论 PDMS微流控芯片在精子分选中能获得质量好的精子,且不需要对精液进行离心处理,减少了试验过程对精子的损伤,在体外受精精子的优选中有很好的应用前景.     

精子抗体对精液参数的影响

目的探讨精子抗体阳性对精液参数的实际影响。方法回顾性分析41名精子抗体检测结果异常（MAR法）者的精液分析所记录的精液量、密度、pH值、存活率、以及前向运动精子比率（a＋b）％和精子正常形态比率。结果按混合抗球蛋白反应试验（MAR法）的测定分为组1：健康体检男性20名MAR阴性：组2：27例MAR阳性;组3：14例MAR强阳性。结果在精液量、密度方面三组之间比较无显著性差异;在存活率方面：组1、组2、组3均值逐渐降低,三组之间比较有显著性差异;在前向运动精子比率（a＋b）％方面：组1、组2、组3均值逐渐降低,三组之间比较有显著性差异;在精子正常形态比率方面：组1与组2、组3之间比较有显著性差异,但组2、组3之间比较无显著性差异。精子抗体阳性对精液参数的实际影响有：随着精子抗体的阳性率增高,存活率、前向运动精子比率（a＋b）％和精子正常形态比率明显降低。