过表达TrxR1重组HEK293细胞株的构建和鉴定

目的 构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）的HEK293细胞株,为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。方法 通过PCR扩增,连接转化以及Sanger双脱氧测序构建并筛选出TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-PuroTXNRD1,转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞株。后续研究分为3组进行：①TrxR1过表达HEK293细胞：pLVX-Puro-TXNRD1载体稳定转染细胞;②对照HEK293细胞：pLVX-Puro空载病毒载体稳定转染细胞;③正常HEK293细胞;通过RT-qPCR、Western blot实验检测上述3组细胞中TrxR1的mRNA以及蛋白表达情况;通过胰岛素终点法以及TRFS-green探针成像检测上述3种细胞内TrxR1的酶活力;通过CCK8实验检测上述3种细胞对TrxR1特异性抑制剂auranofin的敏感性。结果 构建载体经DNA测序,成功获得插入TrxR1的重组慢病毒表达载体pLVX-Puro-TXNRD1。与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1的mRNA和蛋白高表达,且酶活力也同样显著上升（P<0.005）;而与HEK293以及HEK293-NC细胞相比,auranofin对HEK293-TrxR1-OE细胞中TrxR1酶活力以及细胞增殖的抑制效率均显著下降（P<0.005）。结论 通过构建pLVX-Puro-TXNRD1慢病毒载体,成功获得过表达TrxR1酶的HEK293细胞株,该细胞对特异性靶向TrxR1的抑制剂的抗增殖作用具有抵抗,因而可用于靶向TrxR1药物的筛选。     

抑制小窝蛋白－1磷酸化对机械通气所致肺损伤的保护作用

目的：研究抑制小窝蛋白－1（ Cav－1）磷酸化对机械通气所致肺损伤的效应。方法50只健康雄性SD大鼠随机分为A、B1、B2、C1及C2五组（每组10只）。 A组为正常对照组,仅做气管切开;B1组为1 h大潮气量机械通气组;B2组为2 h大潮气量机械通气组;C1组为1 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组;C2组为2 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组。 C1和C2组在机械通气前1 h腹腔注射抑制剂。各组大鼠均连续监测平均动脉压（ MAP ）。光镜观察肺组织病理改变,并做弥漫性肺泡损伤系统（ diffuse alveolar damage, DAD）评分,比色法测定髓过氧化物酶（ myeloperoxidase, MPO）活性,计算肺湿／干比（W／D）,蛋白印迹检测磷酸化小窝蛋白－1[P －Cav －1（Y14）]和小窝蛋白－1（Cav－1）表达情况,免疫组织化学染色法检测肺组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和白细胞介素－1受体相关激酶4（IRAK4）表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠肺泡灌洗液TNF－α水平,伊文思蓝（ Evans blue）法检测肺血管通透性。结果 B1、B2、C1、C2组病理损伤评分、肺湿／干比、Cav－1、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α水平、Evans blue渗出量、MPO活性、MAP及血气分析与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0．05）;与A组比较,B1、B2、C1组P－Cav－1表达升高（均P＜0.05）,而C2组P－Cav－1（Y14）表达量差异无统计学意义（P＞0．05）;C1组与B1组比较,C2组与B2组比较,病理损伤评分、肺湿／干比,P－Cav－1（Y14）、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α的水平、Evans blue含量、MPO活性、MAP、及血气分析差异均有统计学意义（均P＜0.05）;C1组与B1组比较,C2组与B2组比较,Cav－1表达量差异无统计学意义（均P＞0．05）。结论抑制Cav－1磷酸化能够降低肺毛细血管通透性,减少炎症因子和炎症细胞的迁移,从而对大鼠机械通气所致肺损伤起到保护作用。     

应用食物频率法评价高血压患者膳食结构

目的了解南宁市高血压患者膳食习惯,为进一步开展膳食指导干预提供科学依据。方法采取分层多级随机抽样方法,随机抽取参加基本公共卫生项目慢性病管理项目满1年的高血压患者700名,利用食物频率询问法调查个体主要食物摄入频率和摄入量。其结果与中国膳食宝塔推荐量进行比较分析。结果回收有效问卷699份,有效应答率99.9%。高血压患者每天摄入全谷类和新鲜蔬菜类频率高,分别为99.6%和96.1%,但每天摄入新鲜水果、蛋类、奶制品及豆制品类食物的频率相对较低,分别为50.8%、16.0%、28.6%和4.1%。从不吃奶制品的比例高达56.5%。粮谷类食物、新鲜蔬菜类人均摄入量分别为328.4、300.9g/d,在宝塔建议范围内。畜、禽肉类人均摄入量为100.8g/d,是宝塔建议量高值(75g/d)的1.34倍。水产品新鲜水果、蛋、奶及豆制品每日摄入量的P50(P25,P75)分别为11.43(3.33,25.71)、50(14.29,128.57)、11.4(1.67,28.57)、0(0,114.29)和5.7(0,16.67)。生理检查指标发现,55.1%的高血压患者属于中心型肥胖,40.9%的患者超重或肥胖,仅有56.4%的患者血压控制达标。结论高血压患者存在"低奶高红肉"不合理的膳食结构,血压及肥胖指标控制不理想,应开展实施DASH膳食模式干预,以提高患者血压控制水平和生活质量。     

可注射型富血小板纤维蛋白在年轻恒牙感染根管牙髓血管再生治疗中的临床应用

目的比较可注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)作为支架和血凝块作为支架在年轻恒牙感染根管牙髓血管再生治疗中的临床应用效果。方法选取2018年1月至2020年6月在我院口腔科就诊的患儿44例为研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,各22例。对照组将血凝块作为支架行牙髓血运重建术,观察组将i-PRF作为支架行牙髓血运重建术。所有患儿治疗后的第3、6、12个月进行复诊。评价临床疗效;根据X线片测量两组患牙术前术后根管长度、根管壁厚度、根尖孔直径,计算并比较根管长度、牙本质壁厚度及根尖孔直径的变化值;进行牙髓电活力测试。结果随访过程中,观察组失访4例,对照组失访1例,引血不足1例,最终纳入观察组18例,对照组20例,随访6～24个月。术后,两组临床疗效有效率比较,差异无统计学意义(P> 0.05);观察组根管长度增加比及根管壁厚度增加比高于对照组(P <0.05);观察组根尖孔直径缩小比与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);观察组牙髓电活力测试阳性者与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论应用i-PRF及血凝块作为支架材料进行牙髓血运重建术对年轻恒牙感染根管的治疗效果均较好,但使用i-PRF较血凝块更能促进患儿年轻恒牙根管长度增加及根管壁增厚。     

丙氨酸氨基转移酶检测方法确认

目的对献血者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)采用速率法进行检测,并对这种方法进行性能验证,证明其满足ISO15189的要求。方法按照CNSA-CL02:2012《医学实验室质量和能力认可准则》及《血站技术操作规程》(2012版)的要求对检测系统的精密度、正确度、灵敏度、可报告范围、生物学参考区间以及测量不确定度进行验证。结果 ALT质控血清和两个浓度献血者标本检测20次和20d的批内不精密度5.0%,批间不精密度6.7%;正确度估计通过2014年的原卫生部室间质评结果分析和校准品结果分析,相对偏倚均小于1/2CLIA′88允许总误差;可报告范围用直线回归得到回归方程Y=0.995 1 X-5.618 4,r=0.999 7(R2=0.999 4),该检测范围内结果准确;生物学参考区间为0.0~32.7U/L;测量不确定度为(74.90±3.32)U/L。结论 ALT检测方法的性能指标均符合ISO15189的预期要求,该方法可以作为实验室的血液筛查检测方法。     

Dick棒治疗胸腰椎不稳定性骨折脱位的护理

胸腰椎不稳定性骨折脱位的病人需进行手术固定治疗,既往采用的是Harrington器械及其改良系统,如Lugue、哈氏分离棒与椎板下钢丝固定等,但均存在着损伤大、操作复杂等缺点。而Dick棒是将杠杆螺钉经过椎弓根打入椎体,两侧螺钉在固定椎体内有一个三角形的稳定角度,只固定骨折平面上下各一个椎体,内固定本身达到稳定,故不依赖于脊柱或韧带     

手术治疗距腓前韧带距骨侧止点撕脱骨折的疗效观察

目的 探讨开放性修复手术治疗距腓前韧带距骨侧止点撕脱骨折的临床疗效。方法 回顾性研究。纳入2017年11月—2021年4月徐州仁慈医院足踝外科确诊为距腓前韧带距骨侧止点撕脱骨折的患者4例（4足）。其中男3例、女1例,年龄15~45岁（平均30.3岁）,右足2例、左足2例。患者均采用外踝前外侧小切口开放性修复手术治疗距腓前韧带的距骨侧止点撕脱骨折,术后石膏制动。观察项目：（1）记录患者骨折愈合的时间、末次随访时踝关节疼痛视觉模拟评分法（VAS）评分,美国足踝外科协会（AOFAS）踝-后足功能评分、踝关节功能评价Karlsson-Peterson评分。（2）术前及末次随访时测量距骨前移距离（ATT）、距骨倾斜角（TT）。结果 4例患者手术均顺利完成,术后均获随访8~25个月。（1）患者骨折愈合均良好,愈合时间3~5个月（平均3.8个月）。末次随访时,患者疼痛VAS评分为0~2分（平均1.3分）,AOFAS踝-后足评分为89~95分（平均92.8分）,Karlsson-Peterson评分为89~94分（平均91.5分）;患者1例踝关节疼痛消失,其余3例仅有轻微酸胀不适,不影响日常行走。（2）末次随访时ATT为（2.4±0.3）mm、TT为2.8°±0.8°,较术前（8.4±0.8）mm和10.0°±1.4°明显改善,差异均有统计学意义（t=14.40、19.62,P值均<0.001）。结论 采用开放性小切口结合2枚锚钉修复距腓前韧带的距骨侧撕脱骨折,可有效恢复患者踝关节的稳定性。手术创伤小,操作简便,有临床推广价值。     

McCune-Albright综合征多病变部位基因诊断

目的 研究1例McCune—Albright综合征（MAS）患者不同病变组织的G蛋白仅亚单位（Gsot）基因突变情况。方法 收集1例MAS患者的外周血、病变骨组织、皮肤及胸膜组织样本，分别提取基因组DNA并对目的片段进行PCR扩增和直接测序。结果 该患者外周血和骨组织中存在Gsα基因R201C突变，而其皮肤和胸膜组织中未检出突变。结论 经基因诊断证实该例临床确诊的MAS患者的Gsα基因存在经典的R201C突变，且累及多种组织。突变发生在胚胎形成早期，临床表现可呈现多样性。     

自从拥有了血糖仪

我是在2002年上半年戴上2型糖尿病这顶“帽子”的。一开始，因为我对糖尿病知识一无所知，所以干着急，束手无策，情绪很低落。2004年上半年，我在《糖尿病之友》杂志上学习到不少有关糖尿病的知识，使我对糖尿病和“五驾马车”有了一定的认识，并深刻体会到自我血糖监测的重要性。2004年11月份我买了一台血糖仪，