CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制研究

摘要：目的 研究CVB3损伤Hela细胞高尔基体结构的机制,为进一步探讨CVB3的致病机制奠定基础。方法 采用MOI为5的CVB3感染Hela细胞,免疫荧光双标法检测病毒感染后不同时间点VP1和GM130在细胞中的定位情况,观察细胞高尔基带的变化;同时,选择CVB3感染后不同时间点收集细胞,Bradford法蛋白定量后,Western blot测定VP1、GM130和GRASP65蛋白的表达变化。结果 正常Hela细胞中GM130 和GRASP65免疫荧光呈带状分布,高尔基体结构正常;而CVB3病毒感染Hela细胞3h后,GM130的荧光呈现散点状分布,高尔基体结构损伤。与此同时,GM130和GRASP65蛋白表达量逐渐下降;而VP1蛋白表达量持续上升,且6 h后一直维持在较高水平。结论 CVB3感染引起Hela细胞蛋白GM130和GRASP65表达量下调,导致GM130和GRASP65荧光带弥散,高尔基带断裂,这可能是CVB3感染导致宿主细胞高尔基体结构损伤的机制之一。     

反义miR-224对人胰腺癌细胞系Aspc-1和Bxpc-3侵袭、迁移的影响及机制研究

目的分析miR-224对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响并探讨其分子机制。方法用miR-224反义寡核苷酸(ASO)降低胰腺癌细胞中miR-224的表达,通过Transwell实验和划痕实验观察miR-224 ASO对胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响,用western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9表达水平的变化。结果与空白对照组和转染无义ASO组相比,miR-224 ASO组miR-224的表达降低(P均0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示miR-224 ASO组胰腺癌细胞的侵袭、迁移能力下降(P均0.05),MMP-2和MMP-9表达水平下降(P均0.05)。结论降低miR-224的表达可有效抑制胰腺癌细胞的侵袭和迁移;miR-224有可能成为胰腺癌侵袭转移调控的新靶点。     

柯萨奇-腺病毒受体基因的原核表达和多克隆抗体制备

目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新西兰兔,ELISA检测抗血清滴度。结果重组质粒转化的大肠杆菌M15经IPTG诱导表达及亲和纯化后得到滴度较高的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot显示其分子量约为26 kd,具有特异的抗原性,主要以包涵体形式存在于菌体中。纯化的融合蛋白免疫新西兰兔后产生的抗体,经ELISA检测抗体滴度>1:32 000。结论CAR胞外段基因的克隆表达和多克隆抗体的制备,为进一步研究该受体在以腺病毒载体为基础的基因治疗中的作用及柯萨奇病毒的致病机制奠定了基础。     

南昌地区人乳头瘤病毒6／11型感染调查的初步研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对南昌地区４３５例男女生殖道尖锐湿疣可疑患者进行ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ检测,发现女性感染阳性率高于男性感染阳性率,特别是２０～２９岁,３０～３９岁两个年龄组;而且ＰＣＲ诊断的阳性率（４０．９％）比临床诊断的阳性率（２４．３７％）要提高约１５％。     

免疫记忆在炭疽杆菌保护性抗原疫苗诱导的保护性免疫中的作用

炭疽是由炭疽杆菌引起的动物源性疾病。炭疽杆菌保护性抗原（PA）疫苗是抗炭疽感染的一种有效策略。由该疫苗诱生的抗PA中和抗体水平与抗炭疽的保护作用有很好的相关性，但PA诱导的免疫记忆在抗炭疽中所起的保护性作用仍不清楚。以色列生物学研究所Marcus等在建立可确定PA免疫记忆的豚鼠模型的基础上，进行了下列研究。     

青年教师教学导师制的实践与探索

近年来,海外学者、高学位毕业生成为各高校引进师资的主流。针对这一变化,结合基础医学的教学特点,我院探索并实施了新的《青年教师教学导师制》,制定了以培养教学能力为中心的教师培养方案,构建和完善了青年教师培养体系。经过3年的实践,证实了教学导师制是提高青年教师教学质量的有效途径。     

基础医学本科教学质量监控体系的实践与思索

经过三年的实践,提出了完善和加强基础医学教学质量监控体系的措施,主要有构建"三维"教学质量监控体系、完善规章制度、突出学生评教、积极探索实践教学模式、强化教学督导和完善激励机制等.同时,结合实践工作中存在的问题,进行了一些思索.     

《医学微生物学》网络课程的探索与实践

以互动交流和拓展学习为重点,我们开设了<医学微生物学>网络课程.实践证明<医学微生物学>网络课程丰富了教学内容,为学生提供了良好的自主学习平台,加强了学生们的自主学习及创新能力,为提高教学质量提供了全新的模式.     

当今高校学生评教工作的理论及实践

高校学生评教工作有利于促进教师提高教学质量,促进教学管理,保障教学工作的顺利运行。结合学生评教的具体实践,通过完善评价体系、改进实施方案以达到促进学生评教工作,提高教学质量的目的,获得了良好的效果。