不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠毒性的影响

目的:比较不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠的毒性反应,探讨临床上牛黄解毒片引起慢性砷中毒的机制。方法:按2015年版《中国药典》的配方用天然牛黄、人工牛黄、体外培育牛黄分别制成牛黄解毒片,并用同法制成无牛黄成分、无雄黄成分的缺味组,另设同剂量单味雄黄作为对照,每种牛黄解毒片组再分为0.5,1.0,2.0 g·kg~(-1)剂量组,单味雄黄组分为0.06,0.12,0.24 g·kg~(-1)剂量组,对ICR小鼠进行灌胃给药28 d,观察毒性反应;给药结束后解剖取血,分离血清检测肝肾功能,取心、肝、脾、肺、肾做组织病理学检查和电镜下超微结构观察。结果:给药期间各给药组未观察到毒性反应,给药结束亦未观察到大体内脏及体表皮肤病变,血液生化指标检查未能明确雄黄对肝肾的毒性作用。组织病理学和电镜下超微结构检查各牛黄解毒片组未发现异常毒性病理改变,但苏木素-伊红(HE)染色显示单味雄黄高剂量组肝脏出现小叶中心性肝细胞肥大和糖原聚集,过碘酸希夫(PAS)染色表明肝细胞内糖原聚集,电镜下超微结构检查发现肝细胞内局灶性胞浆溶解,内有数量不等糖原颗粒,提示雄黄可致小鼠肝脏毒性。结论:用不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠进行28 d灌胃给药,均未发现对小鼠有明显的毒性反应。而用单味雄黄却引起肝脏毒性,提示牛黄解毒片中的其他成分与雄黄配伍能显著降低可溶性砷和价态砷的含量,从而降低雄黄的毒性。     

两种绝经状态大鼠模型性激素水平和下丘脑线粒体衰老的比较研究

目的：通过观察去势5月龄SD雌性大鼠和18月龄SD雌性大鼠的性激素水平和下丘脑线粒体衰老变化,对两种绝经状态大鼠模型进行比较研究。方法：分别以去势5月龄和18月龄大鼠模拟绝经状态模型,以5月龄大鼠为青年对照组,24月龄大鼠为老年对照组,比较两种大鼠模型与5月龄大鼠血清和下丘脑促卵泡成熟激素（folliclestimulating hormone,FSH）,促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）,雌二醇（estradiol,E2）,下丘脑超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）,丙二醛（malondialdehyde,MDA）和总抗氧化能力（total anti-oxidative capacity,T-AOC）的变化,两种大鼠模型与5月龄、24月龄大鼠下丘脑mt-DNA损伤基因CoⅠ、CoⅢ表达和电镜下丘脑组织线粒体形态变化。结果：与5月龄大鼠相比,去势5月龄和18月龄大鼠血清和下丘脑FSH、LH水平均显著升高（P〈0.05）,E2水平均显著降低（P〈0.05）;去势5月龄和18月龄大鼠下丘脑SOD、T-AOC水平均显著降低（P〈0.01）。各组大鼠下丘脑mt-DNA损伤基因CoⅠ、CoⅢ表达差异显著,两种基因均呈现5月龄大鼠〈去势5月龄大鼠〈18月龄大鼠〈24月龄大鼠的规律（P〈0.001）。电镜下去势5月龄和18月龄大鼠下丘脑神经元细胞的线粒体呈明显损伤状态。结论：去势5月龄和18月龄两种大鼠模型均存在类似女性绝经后血清高FSH、LH、低E2的内分泌表现;同时,去势5月龄大鼠切除卵巢8周以后,随着雌激素水平的急剧下降,生殖轴中枢下丘脑线粒体和18月龄大鼠同样存在衰老变化。因此,这两种大鼠模型均可以模拟女性绝经后生殖轴内分泌紊乱和下丘脑衰老的状态。     

调更汤改善去势大鼠下丘脑线粒体氧化损伤的实验研究

目的:研究调更汤改善去势SD大鼠下丘脑线粒体氧化损伤的作用。方法:去势3月龄SD大鼠随机分为中药组(调更汤)、西药组(倍美力)、模型组,并设立未去势3月龄大鼠为青年组,实验8周。比较各组大鼠下丘脑E2、FSH、MDA、SOD、T-AOC、LDH含量,Mt-DNA损伤基因的mRNA表达,下丘脑神经元细胞线粒体微观结构变化。结果:①与青年组比较,模型组大鼠下丘脑E2水平显著降低(P<0.01),FSH水平显著升高(P<0.01);中药组大鼠下丘脑E2、FSH水平与模型组无显著差异(P>0.05);西药组大鼠下丘脑E2水平较模型组升高(P<0.01),FSH降低水平(P<0.01)。②模型组大鼠下丘脑MDA、LDH含量均较青年组显著升高(P<0.01),SOD、T-AOC水平显著降低(P<0.01);中药组和西药组MDA、LDH含量显著降低(P<0.01),SOD、T-AOC水平显著提高(P<0.05)。③模型组大鼠下丘脑线粒体损伤相关基因CoImRNA、CoIII mRNA的表达显著升高(P<0.01);中药组和西药组CoI mRNA、CoIII mRNA表达降低(P<0.01)。④中药组和西药组大鼠下丘脑线粒体微观结构均较模型组改善。结论:调更汤具有改善下丘脑线粒体氧化损伤作用。     

补肾中药对老龄大鼠睾丸功能影响的比较研究

目的：比较研究补肾中药六味地黄汤和八味地黄汤对老龄大鼠睾丸功能的影响。方法：8只3月龄成年雄性SD大鼠为正常对照组；24只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为3组，每组8只，分别为老龄组（SC）、六味地黄汤组（LW）、八味地黄汤组（BW）。LW组灌胃给药六味地黄汤，BW组灌胃给药八味地黄汤，连续用药60天。应用精子运动CASA分析和流式细胞仪检测技术，比较研究六味地黄汤和八味地黄汤对衰老大鼠精子运动能力、生殖细胞凋亡率和增殖指数的影响。结果：老龄组大鼠与成年组比较，精子密度明显下降（P〈0．05）；活动率、直线活动率、细胞凋亡率下降非常显著（P〈0．01）；细胞增殖指数明显增加（P〈0．05）。六味地黄汤和八味地黄汤对运动精子百分率有非常显著的提高（P〈0．01），生殖细胞凋亡率明显下降（P〈0．05，P〈0．01）。八味地黄汤组与六味地黄汤组比较，精子直线活动率明显增加（P〈0．05），生殖细胞凋亡率明显下降（P〈0．05）。结论：六味地黄汤和八味地黄汤在改善老龄大鼠睾丸功能方面，均有提高精子运动能力，减少其生殖细胞凋亡的作用。八味地黄汤在降低老龄大鼠睾丸生殖细胞凋亡率．提高精子直线活动率等方面优于六味地黄汤．     

朱砂对雄性大鼠精子质量影响的研究

目的观察朱砂灌胃给药对雄性大鼠精子活力及相关运动参数的影响。方法利用生殖毒性Ⅰ段雄性大鼠,按体质量随机分为阴性对照组(0.5%CMC-Na)、朱砂低剂量组(100μg/g)、朱砂中剂量组(300μg/g)、朱砂高剂量组(1 000μg/g)、阳性对照组(雷公藤多苷10μg/g),分别给予相应的干预措施,共6周。给药结束后,取大鼠一侧附睾制备精子悬液,吸取10μl精子悬液至大鼠专用精子计数池,用计算机辅助精子分析系统(CASA)进行精子数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾HE染色观察病理情况。结果与阴性对照组比较,朱砂各剂量组的精子活率、精子活力、有效精子数和精子密度均有所下降,其中朱砂中剂量组的精子活率、精子活力和精子密度、低剂量组的有效精子数的差异有统计学意义(P<0.01),朱砂低剂量组的精子活力、中高剂量组的有效精子数的差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多苷组的精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组比较,雷公藤多苷组除精子的鞭打频率升高外,其余各运动参数均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);朱砂低中剂量组精子的直线运动速度、曲线运动速度、平均路径速度、侧摆幅度降低,鞭打频率升高,差异有统计学意义(P<0.01);朱砂低剂量组精子的平均移动角度、前向性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。但朱砂高剂量组的各个运动参数与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论朱砂对大鼠精子的活力、活率、精子密度、运动能力等方面均有一定的影响;提示朱砂长期给药对雄性生育力有潜在的损害作用。     

苦参素对巨细胞病毒感染小鼠脑组织损害的影响

目的:研究苦参素对巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)感染乳鼠脑组织病理损伤的影响.方法:乳鼠脑内接种半数感染剂量的CMV,运用光学显微镜和透射电镜观察苦参素对脑组织病理形态的影响.结果:接种CMV后,乳鼠脑组织出现炎性细胞浸润、灶性坏死;脑组织超微结构出现神经细胞核膜凹陷、染色质聚集成团块状、细胞质透明样改变呈显著空泡化、内质网排列不整齐、尼氏小体变小并逐渐消失等.经苦参素注射液50 mg/kg腹腔注射治疗15 d后,上述病理性改变状况比模型组小鼠明显减轻或好转.结论:苦参素对CMV感染后乳鼠脑组织的病理损伤有明显的保护作用.     

体内外染色体畸变实验检测朱砂的遗传毒性

目的:用仓鼠的骨髓细胞与CHL细胞经行体内外染色体畸变实验评价朱砂的遗传毒性。方法:体内染色体畸变实验用毛足属仓鼠给予朱砂混悬液(2.0,4.0,8.0 g·kg-1)连续灌胃5 d,处死前2 h腹腔注射秋水仙素。处死后取骨髓细胞制备染色体。油镜下观察每只动物骨髓细胞的有丝分裂指数和100个中期分裂相细胞的畸变类型。CHL细胞染色体畸变实验用朱砂浸出液终质量浓度为6.3,12.5,25.0 g·L-1作用于CHL细胞,培养24,48 h,终止培养前4 h加入秋水仙素。收获细胞,制备染色体,油镜下观察CHL细胞的200个中期分裂相细胞的畸变类型。结果:(1)与空白组比较,朱砂浸出液12.5,25.0 g·L-1给药组的CHL细胞染色体畸变率均升高(P0.05,P0.01),且有明显的量效关系。(2)仓鼠体内实验与朱砂血清给药CHL细胞的畸变率无显著性差异。结论:(1)在本实验中朱砂浸出液在12.5 g·L-1以上时能致体外CHL细胞染色体畸变,而朱砂混悬液在8.0 g·kg-1下仓鼠体内染色体畸变实验未出现阳性结果。(2)仓鼠体内染色体畸变实验可作为研究中药新药遗传毒性评价实验方法之一。     

调更汤对老年雌性大鼠卵巢功能衰退的影响

目的探讨调更汤对自然衰老大鼠卵巢机能衰退的作用。方法16月龄雌性SD大鼠随机分成模型组、中药高、中、低剂量组和倍美力组,设立3月龄雌性SD大鼠为青年组,观察药物干预2个月后卵巢FSH、LH、FSH/LH、SOD、MDA变化情况。结果模型组卵巢FSH比青年组显著升高（P〈0.05）,中药高、中剂量组的卵巢FSH显著下降（P〈0.05）,模型组的卵巢FSH/LH显著高于青年组（P〈0.05）,中药中、高剂量组、倍美力组卵巢FSH/LH显著降低（P〈0.05）;模型组卵巢活力SOD水平显著低于青年组（P〈0.05）,模型组卵巢MDA显著升高（P〈0.05）,中药高、中、低剂量组卵巢MDA显著降低（P〈0.05）。结论调更汤能够有效减少卵巢MDA,提高卵巢储备功能。