Astep Plus特定蛋白分析仪测定超敏C反应蛋白的性能验证

目的:验证国赛Astep Plus特定蛋白分析仪测定超敏C反应蛋白(hs-CRP)的性能。方法:对Astep Plus特定蛋白分析仪测定hs-CRP的精密度、准确度、线性、携带污染率等性能指标进行验证。结果:批内精密度为3.64%、2.46%、2.33%,批间精密度为9.67%、4.95%,均符合厂家要求;准确度与厂家校准品的偏倚4.47%,与国际参考品的偏倚-2.72%,均符合偏倚≤5%的要求;血清模式线性范围是1.6~320 mg/L,全血模式线性范围是0.5~225 mg/L。携带污染率为0.48%,符合≤1%的要求;20份全血标本中,80%(16/20)偏倚≤12.5%,符合实验要求。结论:Astep Plus特定蛋白分析仪测定hs-CRP的各项性能指标均能达到厂家声明的性能,结果准确、稳定,符合临床质量要求,满足实验室和临床需要。     

双酚A和邻苯二甲酸二丁酯暴露对雌性幼鼠青春期发育的影响

目的 研究双酚A(BPA)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对雌性幼鼠青春期发育的影响.方法 将64只21日龄SD雌性幼鼠用随机数字表法分为BPA干预组(BPA 0.25 mg/kg灌胃10 d)、DBP干预组(DBP 50 mg/kg灌胃10 d)、BPA+DBP干预组(BPA 0.20 mg/kg+DBP 40 mg/kg灌胃10 d)、雌二醇(E2)组(E20.1 mg/kg灌胃10 d)、BPA空白对照组(10 mL/kg不含BPA的玉米油溶液灌胃10 d)、DBP空白对照组(10 mL/kg不含DBP的玉米油溶液灌胃10 d)、正常对照组(不做任何处理)和溶剂组(10 mL/kg玉米油溶液灌胃10 d),每组8只.观察幼鼠阴道开口时间(VOD),收集子宫、卵巢进行病理学检查,采用酶联免疫吸附试验检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和Kisspeptin水平,采用实时荧光定量PCR检测下丘脑KISS-1、G蛋白偶联受体54(GPR54)和卵巢雌激素受体(ER)α、ERβmRNA表达水平.结果 与正常对照组和溶剂组相比,BPA干预组和E2组VOD提前,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组血清LH、FSH、LH/FSH、E2、Kisspeptin水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组血清LH、FSH和Kisspeptin水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组下丘脑KISS-1和卵巢ERβmRNA表达水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BPA暴露可致雌性幼鼠性早熟,其致病机制可能与下丘脑Kisspeptin-KISS-1/GPR54-促性腺激素释放激素信号传导和下丘脑-垂体-性腺轴提前激活有关.     

双酚A暴露诱导雌性大鼠性早熟的下丘脑KISS-1和GPR54基因甲基化分子机制探讨

目的 探讨双酚A(BPA)暴露诱导雌性大鼠性早熟的下丘脑KISS-1和GPR54基因甲基化分子机制.方法 将SD雌性幼鼠(21 d龄)分为4组,即BPA干预组(0.25 mg/kg)、BPA空白对照组(与BPA组同时处死)、17β-雌二醇组(E2,0.1 mg/kg)、溶剂对照组(直至大鼠出现阴道开口再处死),每天以灌胃方式持续给药10 d,以大鼠阴道开口时间(VOD)为观察终点(VOD当天处死),BPA干预组阴道开口当天处死时,按1:1比例处死BPA空白对照组.收集大鼠卵巢和下丘脑组织,采用real-time PCR方法检测卵巢ERα、ERβ mRNA和下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA相对表达水平,焦磷酸测序PCR方法检测KISS-1、GPR54基因甲基化水平.结果 BPA干预组和E2组VOD较溶剂对照组提前(P＜0.05),BPA空白对照组处死时未出现阴道开口,BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组(P＜0.05),但与溶剂对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).E2组下丘脑KISS-1 mRNA和卵巢ERβ mRNA表达水平明显低于溶剂对照组(P＜0.05).BPA干预组、BPA空白对照组、E2组和溶剂对照组4组间比较,下丘脑KISS-1基因CpG位点甲基化水平差异无统计学意义,而GPR54基因CpG位点甲基化水平存在显著性差异,其中BPA干预组、E2组和溶剂对照组GPR54片段1 CpG位点甲基化水平显著低于BPA空白对照组(P＜0.05),且其甲基化水平与VOD呈正相关(rs=0.245,P=0.009).BPA干预组GPR54片段2 CpG位点甲基化水平显著低于溶剂对照组,而E2组卵巢ERβ基因甲基化水平显著高于溶剂对照组(P＜0.05).结论 BPA暴露可导致雌性幼鼠阴道开口(性早熟)提前,其下丘脑GPR54基因甲基化水平改变可能是毒性机制之一.