成人表皮干细胞和汗腺细胞的体外分离和培养

背景：人表皮干细胞和汗腺细胞的分离培养及鉴定,为探讨人表皮干细胞再生汗腺的可行性打下基础。目的：探讨体外分离培养人表皮干细胞及汗腺细胞的有效方法。方法：采集不同年龄段的泌尿外科患者术后包皮组织,充分清洗消毒后去除皮下组织,将其修剪成0.5cm×0.5cm的皮片,用Ⅳ型胶原纯化、富集成人表皮干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态：使用免疫荧光染色对成人表皮干细胞表型进行分析;CCK-8检测细胞的增殖曲线;采用胶原酶消化法从人全层无损伤皮肤中分离提取汗腺细胞,并进行扩增和鉴定。结果：倒置相差显微镜下见分离培养的成人表皮干细胞呈卵圆形、细胞之间紧密相连,呈铺路石状,免疫荧光染色显示细胞表达CK19、β1整合素。倒置相差显微镜下见汗腺细胞呈扁平多角形,表达汗腺细胞标志细胞CK7、18、19及CEA。结论：本实验结果说明胶原酶消化法分离培养成人表皮干细胞及汗腺样细胞是可行的。     

呼吸机在ICU应用中的管理与维护

本文全面介绍加强ICU中呼吸机的质量管理,应用前例行检查、使用过程中的维护及管理、使用后的预防性维护及消毒、呼吸机外围设备的质量管理、呼吸机临床操作学习与培训对提高临床救治的成功率的意义。     

3种微小隐孢子虫卵囊检测方法的比较研究

目的比较3种方法检测鼠粪中微小隐孢子虫卵囊的效果。方法应用改良抗酸染色法(MAFS)、免疫荧光单克隆抗体(IFA-McAb)检测法和PCR检测法分别对含有不同数量隐孢子虫卵囊的鼠粪样品、隐孢子虫病模型小鼠的粪样品和奶牛粪样品进行检测。结果MAFS检测法I、FA-McAb检测法和PCR检测法的检测域值分别为10 g鼠粪中含有隐孢子虫卵囊2.0×104、2.0×104、2.0×102个,操作用时分别为35 min6、0 min3、h,检测鼠粪样品的阳性率分别为65.00%、70.00%、85.00%,检测牛粪样品的阳性率分别为21.21%、18.18%、27.27%。3种方法的阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论MAFS检测法简单、快速,费用低,试验条件要求不高,适合对大量样品的检测和流行病学调查;IFA-McAb检测法、PCR检测法更适合用于隐孢子虫的鉴定。     

纳米氧化铜对小白鼠的急性毒性及蓄积毒性试验研究

目的:观察纳米氧化铜对小白鼠的急性毒性及蓄积毒性,为临床提供依据。方法:1.急性毒性试验:给试验小鼠灌服不同浓度的纳米氧化铜混悬液,观察14 d内小鼠的活动情况及死亡情况,测定小鼠灌胃的LD50,采用改良寇氏公式计算LD50及可信限;2.蓄积毒性试验:依据20 d蓄积毒性试验法设计,取20~22 g小白鼠,共设5组,每组10只,雌雄各半,第1组为空白对照组,给试验小鼠灌服不同浓度的纳米氧化铜混悬液分别为28.90(1/20LD50)、57.81(1/10LD50)、115.62(1/5LD50)和298.05(1/2LD50)mg/(kg.bw)剂量,每日灌胃1次,连续灌胃20 d,通过对小白鼠灌服纳米氧化铜进行了蓄积毒性试验。结果:1.急性毒性试验:纳米氧化铜对小白鼠的LD50为578.09 mg/(kg.bw),其95%可信限343.92~971.63 mg/(kg.bw)。2.蓄积毒性试验:试验结果表明0和1/20LD50剂量组小白鼠全部存活,1/2LD50剂量组10只小白鼠全部死亡;1/5LD50剂量组小白鼠死亡5只,存活5只;1/10LD50剂量组小白鼠死亡2只,存活8只。结论:高剂量纳米氧化铜可对小鼠的肾脏、小肠、肝脏等组织器官造成广泛性损伤,并引起严重的淤血、出血等病理变化。依据判定标准,证明纳米氧化铜对小白鼠有中等蓄积毒性作用。     

脑电双频指数指导依托咪酯在老年患者逆行胰胆管造影手术麻醉的价值

目的 研究脑电双频指数（BIS）指导依托咪酯在老年患者逆行胰胆管造影手术麻醉的可行性。方法选择择期行逆行胰胆管造影手术的老年患者36例,ASAⅡ、Ⅲ级,随机分为对照组和BIS组,每组18例。对照组由同一麻醉医生根据经验调节术中依托咪酯浓度;BIS组术中维持BIS值在65—70,手术结束前10min,BIS值维持在70～80。记录麻醉前、麻醉期间的BIS值、依托咪酯实际使用剂量;麻醉清醒时间和定向力恢复的时间。结果与对照组比较BIS组手术时间差异无显著性,麻醉期间对照组BIS值较BIS组低,依托咪酯使用总量较BIS组高;BIS组麻醉清醒时间和定向力恢复时间较对照组缩短。两组患者麻醉后血压均低于麻醉前,其中对照组血压低于BIS组。结论BIS指导依托咪酯用于老年逆行胰胆管造影手术麻醉能减少依托咪酯使用量,并能加快逆行胰胆管造影手术患者麻醉后的恢复。     

微小隐孢子虫感染犬肾细胞模型的建立及生长发育过程的研究

目的 建立微小隐孢子虫体外感染犬肾细胞（MDCK细胞）模型, 并观察其生长发育过程。 方法 利用MDCK细胞为隐孢子虫感染对象, 优化隐孢子虫感染MDCK细胞的培养条件, 观察隐孢子虫在MDCK细胞中的生长发育过程。将体外感染48 h的细胞培养上清接种小鼠, 观察其感染情况。 结果 在含有5%胎牛血清的DMEM培养基中, 用1×10⁵隐孢子虫卵囊感染2.0×10⁵个MDCK细胞, 培养12 h为最佳培养条件。在感染后72 h内, 隐孢子虫出现连续发育阶段, 包括脱囊、子孢子、裂殖子、裂殖体、滋养体、配子体、合子、薄壁卵囊和厚壁卵囊, 在60～72 h内形成卵囊;用感染48 h的细胞培养上清接种于免疫抑制小鼠, 10 d后有隐孢子虫卵囊排出。 结论 建立了能稳定用于微小隐孢子虫体外感染的MDCK细胞模型, 观察到隐孢子虫的生长发育全过程。     

PGT-A及PGT-SR在辅助生殖中的应用

目的探讨胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)在辅助生殖中应用的价值,为PGT的临床应用提供依据。 方法回顾性分析行非整倍体筛查（PGT for aneuploidies,PGT-A）和染色体结构异常检测（PGT for structural rearrangements,PGT-SR）助孕夫妇的临床资料、实验室资料及妊娠结局资料。采用囊胚期外滋养层细胞活检及基因检测技术,挑选检测结果正常的胚胎行单囊胚移植。比较年轻女性（＜35岁）组与高龄女性（≥35岁）组的一般资料、胚胎培养情况、胚胎活检结果及妊娠结局。 结果共纳入PGT-A 194个周期,635个胚胎,101个移植周期;共纳入PGT-SR 92个周期,399个胚胎,40个移植周期。PGT-A及PGT-SR中≥35岁组获卵数均少于＜35岁组(P＜0.05),胚胎发育情况差异无统计学意义(P＞0.05),PGT-A及PGT-SR中≥35岁组正常胚胎率明显低于＜35岁组(P＜0.05)。随着年龄的增加,PGT-A胚胎活检正常率逐渐下降;PGT-A 101个移植周期中活产44例（43.56%）,各组间妊娠结局差异无统计学意义（P＞0.05）;PGT-SR 40个移植周期中活产19例（47.50%）,妊娠结局差异无统计学意义（P＞0.05）;子代均健康。 结论PGT是解决复发性流产、高龄女性、染色体异常夫妇的有效治疗手段,能够有效改善高龄女性的生育状况,但40岁以后的女性是否行PGT助孕,应权衡利弊后决定。     

OEYMPUS—CHB型显微镜照明器的代用

本院一台 OLYMPUS—CHB 型显微镜,1984年启用,最近照明器只发强光。调整变阻微调和粗调均不起作用,无法使用。检查发现,照明器的控制部分烧坏,0.022μF、400V 电容短路,导致电路失控。该照明控制器为一个无极调压器,为了修复该镜,将