一种较好的RNA分离制备方法及其在人胚RNA提取中的应用

以钒基核苷酸复合物为核酸酶抑制剂,从人胚组织中制备总RNA,所得产品几乎不含DNA和蛋白质,经过分离Poly(A)~ mRNA,证明制品有合成cDNA的完整功能,方法比较简捷,适于大量制备以满足分离mRNA 之需,并讨论了此法的优缺点。     

病毒介导造血干细胞基因转移

造血干细胞是体细胞基因治疗尝试的主要靶细胞之一，造血干细胞基因转移具极大的疾病治疗潜能，可应用于治疗造血细胞及非造血系统的遗传性和获得性疾病。     

RT-PCR检测慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞集落bcr/abl mRNA的表达

采用ＲＴＰＣＲ 技术对ＣＭＬ 患者骨髓细胞１４ ｄ 的细胞集落群和部分１４ ｄ 或２８ ｄ 的单个细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ ｍ ＲＮＡ 表达进行分析。结果显示：所检测的骨髓细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ 基因的表达均呈阳性,即为ＣＭＬ 集落,与细胞遗传学分析结果一致。该方法为研究ＣＭＬ 造血前体细胞基因表达及其诊断、治疗监测提供了灵敏、有效的分析手段;并可作为研究ＣＭＬ 发病、治疗及筛选抗ＣＭＬ 药物较为理想的方法。     

干扰素诱导肿瘤凋亡的分子机制

干扰素(interferons,IFNs)是一类重要的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节细胞因子。IFNs广泛用于造血系统恶性肿瘤、淋巴瘤及多种实体瘤的临床治疗。IFNs与细胞表面受体结合后,主要通过JAK/STAT信号途径,调节一系列干扰素刺激基因(IFN-sti mulated genes,ISGs)表达,这些功能性基因包括凋亡相关分子Fas/FasL、TRAIL/APO-2、抑癌基因bax、bak及p53等,这些ISGs与细胞凋亡及抑制细胞周期密切相关。此外,IFN还可放大由caspase诱导的线粒体功能紊乱效应,诱导细胞经线粒体途径凋亡。因而,IFNs主要通过抑制细胞周期、诱导抑癌基因的表达及增强肿瘤细胞对凋亡信号敏感性,诱导肿瘤细胞凋亡,而发挥其抗肿瘤生物学活性。     

临床医学八年制早期培养方案探索?

我国八年制医学生培养质量参差不齐,各校培养方案不尽相同。经过十余年八年制教育的实践,中南大学湘雅医学院制定了全新的早期培养方案。开设新生课程,让学生入学后尽快由中学生转变为大学生;进行早期科研训练,帮助学生熟悉科研流程;为每位学生配备学业导师,以尊重其个性发展为前提,采用"大手拉小手"的方式,培养学生的科研素养;采用双语式、研讨式、参与式教学,全面提高学生的专业英语水平和综合素质;进行前期综合考试,实施精英教育,提高整体水平。通过以上教学改革,学生的自主学习能力明显提升。     

开展生物化学双语教学提高医学生综合素质

生物化学是生命科学领域的一门前沿学科，更是医学和生物学各专业的主干课程，其理论和技术的发展十分迅速。为了给学生传授生物化学的最新理论和概念，我们组建了一支高质量的双语教师队伍，选择了新版的生物化学英文教材，在临床医学及生物科学专业学生中进行了生物化学双语教学；在其教学过程中开辟了师生角色互换第二课堂，由学生自制多媒体课件、讲课和书写英文论文；课程结束后采用全英文试题考试；建立了一套灵活多样的生物化学中英文双语教学及第二课堂教学模式：全面提高了学生的专业英语水平和综合素质。     

人类疾病的基因诊断策略与技术

基因诊断的问世使人类疾病的诊断从传统的表型诊断步入基因型诊断的新阶段，是诊断学领域的一次革命。相对于传统的表型诊断，基因诊断具有高特异性、高灵敏性、早期诊断性和应用广泛性等特点，因此逐步得到运用和普及。基因诊断不仅能对某些临床特定疾病做出诊断，而且能对肿瘤及其它多因素常见病(如心血管疾病和内分泌疾病等)进行易感性预测；可以对传染性及流行性疾病进行诊断和普查。以及对器官移植组织的HLA基因水平配型和法医学鉴定等。其中在遗传性疾病的诊断研究中的应用最为突出。目前不但用于产前诊断，     

靛玉红对慢性髓性白血病K562细胞增殖的抑制作用

目的:改善靛玉红的溶解性,探讨其对慢性髓性白血病K562细胞增殖的抑制作用及机制.方法:采用二甲基亚砜为复溶剂增加靛玉红的溶解度,用MTF法和流式细胞法等技术检测靛玉红对K562细胞生长的抑制作用.结果:靛玉红在细胞培养液中的最高药物浓度为10 mg·L-1,与阴性对照组比较,在最高药物浓度作用下K562细胞增殖并未受到抑制.结论:靛玉红并非直接抑制白血病细胞的生长,可能通过靛玉红次级代谢产物起作用.     

K562细胞消减cDNA文库的构建

目的：构建氯化血红素诱导性K562细胞抑制消减cDNA文库，以期鉴定出K562细胞中氯化血红素诱导性表达的珠蛋白合成调节因子cDNA基因。方法：采用不同浓度的氯化血红素诱导培养K562细胞，经联苯胺阳性细胞百分率及血红蛋白浓度分析，选择其最佳诱导浓度。分别提取氯化血红素诱导培养的K562细胞（tester，检测子）和未加诱导剂培养的K562细胞（driver，驱赶子）mRNA，逆转录合成双链cDNA。经两轮消减杂交，两轮PCR扩增后，正向消减的PCR产物与T载体连接，构建K562细胞抑制消减cDNA文库，文库经蓝-白筛选后，纯化阳性克隆质粒，EcoR I酶切及PCR扩增插入片段。结果：以50μmol/L氯化血红素诱导K562细胞，其联苯胺阳性细胞百分率及血红蛋白浓度均达到最大值，故选择50μmol/L氯化血红素诱导培养K562细胞并构建K562细胞抑制消减cDNA文库。文库鉴定证实其阳性克隆中分别含有不同长度的插入片段。结论：成功构建了氯化血红素诱导性K562细胞抑制消减cDNA文库，该消减cDNA文库结合生物信息学（Bioinformatics）分析可用于深入研究K562细胞内氯化血红素诱导性表达基因的结构和功能。     

诱导分化剂对急粒白血病体外珠蛋白生物合成的影响

急粒白血病外周血网织红细胞珠蛋白链生物合成异常,表现为β链合成相对减少的获得性β地中海贫血状态。维甲酸及小剂量的阿糖胞苷、三尖杉酯碱能部分纠正这种失衡状态,使α/β链合成比趋向于平衡,提示白血病患者伴有红系异常,诱导分化剂对此有纠正作用。