酶偶联速率法检测血清血管紧张素转换酶

血管紧张素转换酶 (ａｎｇｉｏｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｏｎｅｎｚｙｍｅ .ＡＣＥ .Ｐｅｐｔｉｄｙｌｄｉｐｅｐｔｉｄａｓｅ ;ＥＣ3.4 .15 .1)也叫激肽酶Ⅱ ,是一种构成血管内皮细胞的膜性糖蛋白 ,属于内皮细胞的外分泌酶 ,在血管紧张素Ⅱ的产生及缓激肽的分解代谢中均起到关键作用。近年来由于几项研究显示出ＡＣＥ、ＡＣＥ基因可能参与了心血管疾病的发生而引起人们对此酶的重视 ,因此建立一种灵敏、准确的检测方法将会对心血管疾病的研究及临床应用均有重要价值。另外 ,随着一类抗高血压新药—ＡＣＥ抑制剂开始在临床上的应用 ,测定血…     

RT-PCR检测慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞集落bcr/abl mRNA的表达

采用ＲＴＰＣＲ 技术对ＣＭＬ 患者骨髓细胞１４ ｄ 的细胞集落群和部分１４ ｄ 或２８ ｄ 的单个细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ ｍ ＲＮＡ 表达进行分析。结果显示：所检测的骨髓细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ 基因的表达均呈阳性,即为ＣＭＬ 集落,与细胞遗传学分析结果一致。该方法为研究ＣＭＬ 造血前体细胞基因表达及其诊断、治疗监测提供了灵敏、有效的分析手段;并可作为研究ＣＭＬ 发病、治疗及筛选抗ＣＭＬ 药物较为理想的方法。     

HL—60细胞内同源盒HOXA、cDNA基因的克隆

目的：研究同源盒ＨＯＸ基因的表达在ＡＴＲＡ诱导白血病细胞分化中的作用方法：利用我们建立的一种高效、简单的ｃＤＮＡ克隆方法－ＨＯＸ家诞基因指纹图技术,克隆ＨＬ－６０细胞内的ＨＯＸ ｃＤＮＡ基因。采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ技术初步探讨ＡＴＲＡ对所克隆的ＨＯＸ基因表达的影响。结果：筛选出一个在ＨＬ－６０细胞内有表达的同源盒基因－ＨＯＸＡ１基因ｃＤＮＡ片段。初步研究证实,此基因的ｍＲＮＡ水平在ＡＴＲＡ的作用下     

同源盒蛋白与人类白血病

同源盒蛋白是一类具有特定的时空表达模式的转录调控因子。本文对造血细胞内同源盒基因的表达特点及因同源盒蛋白表达异常所致白血病的各种分子机制加以综述,提出同源盒基因的结构与功能异常是人类肿瘤发生的重要原因之一。     

乙肝病毒HBx蛋白具有激活胞浆Ras蛋白及胞核转录因子的双重特性

研究表明,HBV的HBx蛋白可凭藉广泛的病毒和细胞调节元件反式激活基因的表达。HBx蛋白能在体内激活Ras蛋白形成Ras-GTP复合物,迅速诱发Ras-Raf-MAP激酶胞浆信号转导的级联反应,导致细胞复制增加及转录因子AP-1和NF-κB的反式活化。另外,HBx蛋白还可直接与转录复合体的核因子相互作用激活转录。 利用激光共焦扫描免疫显微镜及遗传学方法,     

人类剪接因子ASF/SF2及SC35具有不同的、重要功能的RNA结合特性

高等真核细胞前体mRNA的剪接需要某些辅因子的参与,其中包括高度保守的SR核蛋白家庭。SR蛋白家族成员ASF/SF2及SC35蛋白质涉及体外前体mRNA剪接位点的选择,但尚不清楚它们是否具有不同的RNA结合特性。如有,这种差异是否影响其与前体mRNA的相互作用? 作者以含ASF/SF2或SC35蛋白质RNA结合     

K562细胞消减cDNA文库的构建

目的：构建氯化血红素诱导性K562细胞抑制消减cDNA文库，以期鉴定出K562细胞中氯化血红素诱导性表达的珠蛋白合成调节因子cDNA基因。方法：采用不同浓度的氯化血红素诱导培养K562细胞，经联苯胺阳性细胞百分率及血红蛋白浓度分析，选择其最佳诱导浓度。分别提取氯化血红素诱导培养的K562细胞（tester，检测子）和未加诱导剂培养的K562细胞（driver，驱赶子）mRNA，逆转录合成双链cDNA。经两轮消减杂交，两轮PCR扩增后，正向消减的PCR产物与T载体连接，构建K562细胞抑制消减cDNA文库，文库经蓝-白筛选后，纯化阳性克隆质粒，EcoR I酶切及PCR扩增插入片段。结果：以50μmol/L氯化血红素诱导K562细胞，其联苯胺阳性细胞百分率及血红蛋白浓度均达到最大值，故选择50μmol/L氯化血红素诱导培养K562细胞并构建K562细胞抑制消减cDNA文库。文库鉴定证实其阳性克隆中分别含有不同长度的插入片段。结论：成功构建了氯化血红素诱导性K562细胞抑制消减cDNA文库，该消减cDNA文库结合生物信息学（Bioinformatics）分析可用于深入研究K562细胞内氯化血红素诱导性表达基因的结构和功能。     

活化的人P53蛋白对核DNA复制的一种直接效应

P53蛋白是一种转录的激活物和阻遏物,但新近的证据表明,P53蛋白的某些生物学功能与转录过程无关。为了解P53是否直接影响核DNA的复制,将纯化的重组人类全长野生型(wt)P53蛋白和C末端缺乏30个氨基酸的P53Δ30重组蛋白,分别加入到含精子染色质的非洲爪蟾卵细胞抽提物内。通过[α-~(32)P]αATP的掺入量的测定发现,在不转录     

从同源异构盒亮氨酸锌指基因的结构中提出一种基因家族进化模式

高等生物的基因家族十分复杂,其基因家族的大小与调节的复杂性有关。众多家族成员是通过一系列基因复制、染色体易位等过程从一个祖基因进化而来。基因转换、外显子移位(exon shuffling)和不等交换等过程也与动物基因的进化有关。同源异构盒基因家族广泛存在于动、植物体内,不同物种具有各自的基因组成。其中一类仅见于少数芥子类植物Arbidopsis thaliana中的同源异构盒基因,因其所     

培养基耗竭时TAL-1蛋白质活性丧失可诱导Jurkat白血病T细胞过早凋亡

tal-1基因(又称SCL)编码一类碱性的螺旋-环-螺旋(bHLH)蛋白质家族,此类蛋白大多与细胞的增殖与分化调控有关。已知约有30％ T-ALL患者出现tal-1基因的转录激活,推测可能它与人T细胞白血病发生有关,但迄今尚不清楚TAL-1蛋白质在此过程中产生何种作用。