慢病毒介导shRNA沉默YAP基因对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响

目的:探讨慢病毒介导sh RNA沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因对人激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞增殖、凋亡及其雄激素受体(androgen receptor,AR)的影响。方法:3条针对YAP基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,real-time PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;选取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干扰载体组,以细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成实验(colony formation)检测LNCa P细胞增殖能力;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测LNCa P细胞凋亡改变。结果:重组慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后感染效率达95%以上,获得稳定沉默YAP基因LNCa P细胞系。与空白对照组和阴性对照组比较,感染sh RNA慢病毒干扰载体各组中YAP、AR m RNA及蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞增殖受到明显抑制(P=0.000),细胞凋亡明显增加(P=0.000)。结论:慢病毒介导sh RNA沉默YAP基因能有效下调YAP在LNCa P细胞中表达,并抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡;YAP可能作为AR配体参与AR信号通路的调节。     

单用吉奥及阿帕替尼二线治疗晚期胃癌伴肝转移临床对比研究

目的:探讨单用替吉奥与阿帕替尼二线治疗晚期胃癌伴肝转移临床疗效及安全性差异。方法:研究对象选取晚期胃癌伴肝转移规范一线化疗失败后患者共130例,以随机数字表法分为对照组(65例)和观察组(65例),分别行单用替吉奥和阿帕替尼进行二线治疗;比较2组客观缓解率(objective response rate,ORR)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)、中位总生存期(overall survival,OS)、治疗前后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、白细胞计数(white blood cell count,WBC)、血小板计数(platelet count,PLT)水平及不良反应发生率。结果:观察组ORR和DCR均显著高于对照组(P<0.05);观察组中位PFS和OS均显著长于对照组(P<0.05);观察组治疗后VEGF和MMP-9水平均显著低于对照组和治疗前(P<0. 05);观察组治疗后WBC和PLT水平均显著高于对照组(P<0.05);2组恶心呕吐发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组Ⅰ～Ⅱ级腹泻、皮肤过敏及口腔炎发生率均显著低于对照组(P<0.05);但观察组Ⅰ～Ⅱ级手足综合征和血压异常升高发生率均显著高于对照组(P<0.05)。结论:与替吉奥相比,阿帕替尼单用二线治疗晚期胃癌伴肝转移可有效延缓病情进展,提高生存率,降低MMP-9和VEGF水平,减轻骨髓抑制程度,并有助于避免腹泻、皮肤过敏及口腔炎发生,但也可能导致手足综合征和血压异常升高。     

两种新辅助治疗方案对ⅢA期EGFR突变肺腺癌疗效及安全性的影响

目的探讨化疗和EGFR-TKI新辅助治疗方案对ⅢA期EGFR突变肺腺癌疗效及安全性的影响。方法研究对象选取我院2013年2月-2016年2月收治ⅢA期EGFR突变肺腺癌患者共106例,以随机数字表法分为化疗组(53例)和靶向治疗组(53例),分别采用培美曲塞+铂类和厄洛替尼行新辅助治疗;比较两组缓解率、组织学评级有效率、不良反应发生率,手术相关临床指标水平,术后并发症发生率及随访生存率。结果靶向治疗组缓解率和组织学评级有效率均显著高于化疗组(P0.05);靶向治疗组消化道反应和骨髓抑制发生率均显著低于化疗组(P0.05);靶向治疗组皮疹发生率显著高于化疗组(P0.05);两组口腔黏膜炎、周围神经炎及甲沟炎发生率比较差异无显著性(P0.05);两组手术切除率、术中出血量及引流管拔除时间比较差异无显著性(P0.05);两组术后并发症发生率比较差异无显著性(P0.05);同时靶向治疗组中位总生存时间均显著长于化疗组(P0.05)。结论相较于化疗方案,EGFR-TKI方案用于ⅢA期EGFR突变肺腺癌新辅助方案,能够显著提高总体疗效,降低消化道和骨髓抑制发生率,并有助于延长生存时间。     

CCM联合HCPT对人膀胱癌BIU-87细胞YAP、TEAD1表达及生物学功能的影响

目的 探讨姜黄素(CCM)联合羟基喜树碱(HCPT)对人膀胱癌BIU-87细胞中YAP、TEAD1表达及凋亡的作用.方法 CCM和HCPT分别单独与联合用药处理膀胱癌BIU-87细胞.免疫组织化学检测膀胱癌组织及癌旁组织中YAP和TEAD1表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot检测YAP及TEAD1基因的mRNA和蛋白的表达变化.结果 YAP和TEAD在膀胱癌组织及癌旁组织中均有阳性表达,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示CCM和HCPT均可有效诱导膀胱癌细胞BIU-87的凋亡.CCM组和HCPT组BIU-87细胞中YAP及TEAD1 mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.05),联合用药组YAP及TEAD1 mRNA和蛋白表达更低(P＜0.05).结论 CCM和HCPT联合用药抗癌机制可能是通过抑制Hippo信号通路中YAP癌基因表达,下调TEAD1,并诱导膀胱癌细胞凋亡产生.     

shRNA 沉默YAP基因对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨慢病毒干扰载体沉默Yes-相关蛋白（Yes-associated protein,YAP）对人肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响。方法：用细胞免疫荧光法检测肾癌786-O细胞中YAP蛋白表达情况;构建针对YAP基因的shRNA慢病毒干扰载体转染786-O细胞。RT-PCR和Western blot分别检测干扰786-O细胞前后 YAP mRNA及蛋白的表达情况;CCK-8（cell counting kit-8）法检测沉默YAP后细胞增殖的改变;流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测细胞凋亡和周期的变化。结果：786-O细胞中YAP蛋白表达于细胞浆和细胞核;shRNA-YAP慢病毒干扰载体转染4 d后,可明显下调786-O细胞YAP mRNA及蛋白表达水平（P=0.000）,并且明显抑制细胞增殖和促进细胞凋亡（P=0.000）;细胞周期紊乱,G1 期细胞明显增加,S期细胞明显降低（P=0.000）。结论：YAP-shRNA慢病毒干扰载体能有效抑制YAP基因在786-O细胞中表达,进而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。     

洛铂联合多西他赛行肿瘤细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗原发腹膜癌的临床观察

目的探究分析洛铂联合多西他赛行肿瘤细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗腹膜癌的临床效果。方法从2013年3月‐2016年3月该院收治的腹膜癌患者中选取61例作为临床研究对象,随机分为试验组和对照组,试验组30例,对患者同时使用洛铂联合多西他赛行肿瘤细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗,对照组31例接受常规治疗。研究两组患者的总生存期以及患者围手术期的安全性。结果手术后,对患者进行随访,患者的具体随访时间在5.2~51.3个月。第1年,试验组生存率为56.67%,对照组生存率29.03%;第2年,试验组生存率为40.00%,对照组生存率16.13%;第3年,试验组生存率为30.00%,对照组生存率9.68%;第4年,试验组生存率为13.33%,对照组生存率0.00%。试验组生存情况明显优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。该次研究过程中,没有出现围手术期死亡病例,发生严重不良反应事件有7例,严重不良反应发生概率为23.33%。其中,低蛋白血症2例,占总不良反应病例的28.57%;感染败血症1例,占总不良反应病例的14.29%;感染口瘘2例,占总不良反应病例的28.57%;出现严重腹泻2例,占总不良反应病例的28.57%。结论对腹膜癌患者采取洛铂联合多西他赛行肿瘤细胞减灭术加腹腔热灌注化疗能够有效延长患者总生存期,安全性比较高,临床治疗效果显著,值得推广使用。