逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

目的探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA（shRNA）干扰迁移诱导基因7（Mig-7）对肝细胞癌（HCC）细胞血管生成拟态 （VM）形成及体外侵袭转移能力的影响。方法设计2条Mig-7 mRNA寡核苷酸序列（Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2）和1条 作为负对照的无关序列（Mig-7 shRNA-N）。构建Mig-7shRNA 逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞 MHCC-97H分为6组：转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组（Vector）;重 组人血管内皮抑素（ES,商品名：恩度）组;MHCC-97H细胞对照组（Control）。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的 影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移 能力的影响。结果转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 mRNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM 能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低（P<0.05）,细胞间粘附能力明显增加（P<0.05）;Mig-7 shRNA-N 组、Vector 组、ES 组中 MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论逆转录病毒 介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对 HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。     

改良舌根牵引术与颏前徙术治疗OSAHS患者舌后坠的临床疗效分析

目的 探讨并比较改良舌根牵引术与颏前徙术在治疗合并舌后坠的OSAHS患者的手术特点及手术的疗效.方法 对我院33例合并舌后坠的OSAHS患者分别进行改良的舌根牵引术及颏前徙手术前后的疗效进行回顾性研究.结果 两种术式患者手术前后AHI、SaO2、呼吸暂停次数差异均有统计学意义(P<0.05);而舌根牵引术的显效率明显高于颏前徙术.结论 舌根牵引术在治疗舌后坠患者中更具有推广性.     

肿瘤相关静脉血栓栓塞症预防和治疗的现状与挑战肿瘤相关静脉血栓栓塞症预防和治疗的现状与挑战

静脉血栓栓塞症是肿瘤患者死亡的第二大原因。尽管出版了预防和治疗肿瘤相关静脉血栓栓塞症的共识及指南,但这些共识及指南和临床实践之间仍存在差距,且某些方面仍存在争议。肿瘤相关静脉血栓栓塞症的病理生理机制仍未被阐明,在这种情况下如何实施最佳抗凝预防和治疗对临床医生来说是一个重大挑战。     

祛痹消痛膏中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定

目的 建立祛痹消痛膏中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定方法及限度标准.方法采用高效液相色谱(HPLC)法,Hedera ODS-2色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),以乙腈 0.1%磷酸(5:95)为流动相,流速:1 mL.min^-1,柱温30 ℃,检测波长210 nm.结果3批正式样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的平均含量分别为0.084 97和 0.030 94 mg.g^-1,盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱平均总含量为0.115 9 mg.g^-1.根据测定结果,暂定本品每1 g含药膏体中含盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量应为0.090～0.230 mg.结论所建立的含量测定方法科学客观,专属性强.     

不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展

侵袭性纤维瘤病是一种发病率较低的交界性肿瘤,扩大切除是最有效的治疗方式,但其无包膜浸润性生长特性导致手术不易达到切缘阴性,而且累及重要脏器时常难以切除,甚至危及生命.对于难以切除、不能切除和切除后复发的患者,仍寄希望于药物治疗.药物治疗是腹腔内和多发性侵袭性纤维瘤病的一线治疗方案.目前,应用于侵袭性纤维瘤病的药物主要包括非细胞毒性药物和细胞毒性药物.本文就不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展做一综述.     

小针刀挑割法配合中药熏洗治疗跖管综合征的临床观察

目的 :探讨小针刀挑割法配合中药熏洗治疗跖管综合征临床疗效。方法 :将60例跖管综合征患者随机分为两组,治疗组应用小针刀挑割法配合中药熏洗治疗,对照组应用局部封闭治疗,治疗结束后进行治疗效果对比分析。结果 :治疗组临床有效率为96.6%,对照组临床有效率76.6%。两组比较有统计学差异(P0.05)。结论:小针刀挑割法配合中药熏洗治疗跖管综合征具有安全性好,创口小,疗效显著,恢复速度快,费用较低等优势,符合价值医学规律,值得推广。     

器官捐献供者多重耐药菌感染对移植受者的影响

目的 分析携带多重耐药菌器官捐献供者感染状态对移植受者的影响.方法 回顾性分析进行器官捐献且携带多重耐药菌的供者以及对应肝、肾移植受者的相关临床资料,探讨应用此类器官的安全性及相应的干预措施.结果 71例携带多重耐药菌供者中,分离菌株依次为耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(49.3％)、耐碳青霉烯类绿脓杆菌(22.5％)、耐碳青霉烯类肠杆菌(19.7％)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(7.0％)及耐万古霉素肠球菌(1.4％);分离部位依次为痰(59.2％)、器官保存液(26.8％)、尿(11.3％)、血(7.0％)、深静脉导管尖端(2.8％).共随访移植受者198例;其中,83例受者(41.9％)的移植器官可能有供体细菌累及.术后共发生供者来源性感染2例,均为细菌可能累及捐献器官的肝移植受者,术后经过3周以上抗感染治疗后均治愈.结论 当供者分离出多重耐药菌时,如无明确累及捐献器官的证据时,应用此类器官是安全、可靠的;而对于可能有细菌累及的捐献器官,并非一定是捐献的绝对禁忌证,仔细评估感染风险和适时的抢先治疗可以在最大化应用器官的同时保证受者的安全性.     

肿瘤血管生成拟态研究的希望与挑战

血液供应是肿瘤生长和转移的必要条件,已报道的肿瘤血液供应模式中,VM作为一种崭新的肿瘤微循环模式,参与多种恶性肿瘤的生长、侵袭和转移,是恶性肿瘤患者预后不良的一个独立的标志物。VM可能是一个潜在的肿瘤治疗新靶点,但其形成的分子机制仍不清楚,以下两个问题一直伴随着对 VM的研究：VM形成的具体机制、VM是如何影响肿瘤的生长、转移和浸润的。本文就近年来VM的研究进展做一综述,探讨当前研究中存在的问题,展望未来的发展方向。     

TK1在肺癌诊断和预后判断中的研究进展

肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一.随着各种新型化疗药物及分子靶向药物的出现,肺癌的治疗手段不断增多,但由于缺乏有效的早期诊断方法以及预后评估指标,无法制定个体化的治疗方案,其预后仍不理想.胸苷激酶(TK1)是一种新近发现的国际公认的细胞增殖特异性标记物,其与传统的肿瘤标志物及CT结合能有效评估肿瘤放化疗疗效及预后,有助于指导肿瘤患者个体化治疗方案的制定.本文通过查阅国内外最新相关文献,拟对TK1和传统检测指标在肺癌预后评估方面的研究进展做一综述.     

MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞株的建立

目的:构建迁移诱导基因（migration inducing gene 7,MIG7）的逆转录病毒表达载体并测序,初步建立其包装细胞株。方法:根据MIG7已知序列设计合成所需脱氧寡核苷酸序列,并与线性RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体连接。PCR扩增热转化后的连接产物,检测和挑取阳性克隆和阳性菌落,提取质粒后测序,与Gen-Bank中特异性MIG7-shRNA基因序列对比。包装并获取MIG7-shRNA重组逆转录病毒,qRT-PCR测定MIG7-shRNA重组逆转录病毒滴度并转染MHCC-97H细胞株。结果:构建的MIG7-shRNA表达载体与设计的完全一致,成功获得MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体质粒CTC698-1-1和CTC698-2N-1转染的PT67细胞克隆株,pSIREN-M1病毒和pSIREN-MN病毒颗粒数约为1.0×108v.p/ml,能高效转染MHCC-97H细胞株。结论:成功构建了MIG7的逆转录病毒表达载体并建立其包装细胞株。