肿瘤相关静脉血栓栓塞症预防和治疗的现状与挑战肿瘤相关静脉血栓栓塞症预防和治疗的现状与挑战

静脉血栓栓塞症是肿瘤患者死亡的第二大原因。尽管出版了预防和治疗肿瘤相关静脉血栓栓塞症的共识及指南,但这些共识及指南和临床实践之间仍存在差距,且某些方面仍存在争议。肿瘤相关静脉血栓栓塞症的病理生理机制仍未被阐明,在这种情况下如何实施最佳抗凝预防和治疗对临床医生来说是一个重大挑战。     

逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

目的探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA（shRNA）干扰迁移诱导基因7（Mig-7）对肝细胞癌（HCC）细胞血管生成拟态 （VM）形成及体外侵袭转移能力的影响。方法设计2条Mig-7 mRNA寡核苷酸序列（Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2）和1条 作为负对照的无关序列（Mig-7 shRNA-N）。构建Mig-7shRNA 逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞 MHCC-97H分为6组：转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组（Vector）;重 组人血管内皮抑素（ES,商品名：恩度）组;MHCC-97H细胞对照组（Control）。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的 影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移 能力的影响。结果转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 mRNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM 能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低（P<0.05）,细胞间粘附能力明显增加（P<0.05）;Mig-7 shRNA-N 组、Vector 组、ES 组中 MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论逆转录病毒 介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对 HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。     

不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展

侵袭性纤维瘤病是一种发病率较低的交界性肿瘤,扩大切除是最有效的治疗方式,但其无包膜浸润性生长特性导致手术不易达到切缘阴性,而且累及重要脏器时常难以切除,甚至危及生命.对于难以切除、不能切除和切除后复发的患者,仍寄希望于药物治疗.药物治疗是腹腔内和多发性侵袭性纤维瘤病的一线治疗方案.目前,应用于侵袭性纤维瘤病的药物主要包括非细胞毒性药物和细胞毒性药物.本文就不可切除侵袭性纤维瘤病药物治疗进展做一综述.     

Fractalkine在大鼠肝硬化中全肝血流阻断致肺损伤中表达

目的探讨趋化因子Fractalkine(Fkn,CX3CL1)在大鼠肝硬化模型中全肝血流阻断致肺损伤中表达及意义。方法选择80只雄性成年SD大鼠,鼠龄2.0～2.5个月,体质量160～200 g。随机分为4组(n=20),即对照组(A组),阻断肝门、肝上下腔静脉及肝下下腔静脉15 min(B组)、30min(C组)、45 min(D组);制作肝硬化大鼠全肝血流阻断模型。取右肺下叶肺组织常规苏木精-伊红(HE)染色病理检查,留取肺及肝组织检测Fkn的表达,并切取肺组织及血浆检测核因子-κB(NF-κB)及白细胞介素21(IL-21)水平变化。结果各组成功建模后,D组肺损伤病理评分[(12.25±1.52)分]明显高于A组[(2.05±1.00)分]、B组[(7.90±1.62)分]及C组[(8.25±1.55)分](P0.001),A组无明显病理改变。在各组肝、肺组织中Fkn的表达测定中,D组Fkn表达明显高于B组、C组及A组(P0.05)。血清中NF-κB、IL-21表达在A组[(11.67±2.11) ng/L,(633.30±42.03) ng/L]最低(P0.05),D组[(18.13±1.83) ng/L,(801.96±54.38) ng/L]明显高于B组[(14.72±2.56) ng/L,(712.67±53.63) ng/L]及C组[(15.23±2.26) ng/L,(713.59±61.60) ng/L](P0.05)。肺组织中NF-κB、IL-21表达A组[(14.48±2.07) ng/L,(590.89±55.38) ng/L]最低(P0.05),D组[(19.66±1.53) ng/L,(910.85±87.63) ng/L]明显高于B组[(16.65±1.75) ng/L,(696.23±51.91) ng/L]及C组[(17.02±1.47) ng/L,(697.22±41.24)ng/L](P0.05)。结论 Fkn在肝硬化大鼠全肝血流阻断致肺组织损伤时表达增加,且阻断时间超过30 min后更加明显。     

肿瘤血管生成拟态研究的希望与挑战

血液供应是肿瘤生长和转移的必要条件,已报道的肿瘤血液供应模式中,VM作为一种崭新的肿瘤微循环模式,参与多种恶性肿瘤的生长、侵袭和转移,是恶性肿瘤患者预后不良的一个独立的标志物。VM可能是一个潜在的肿瘤治疗新靶点,但其形成的分子机制仍不清楚,以下两个问题一直伴随着对 VM的研究：VM形成的具体机制、VM是如何影响肿瘤的生长、转移和浸润的。本文就近年来VM的研究进展做一综述,探讨当前研究中存在的问题,展望未来的发展方向。     

TK1在肺癌诊断和预后判断中的研究进展

肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一.随着各种新型化疗药物及分子靶向药物的出现,肺癌的治疗手段不断增多,但由于缺乏有效的早期诊断方法以及预后评估指标,无法制定个体化的治疗方案,其预后仍不理想.胸苷激酶(TK1)是一种新近发现的国际公认的细胞增殖特异性标记物,其与传统的肿瘤标志物及CT结合能有效评估肿瘤放化疗疗效及预后,有助于指导肿瘤患者个体化治疗方案的制定.本文通过查阅国内外最新相关文献,拟对TK1和传统检测指标在肺癌预后评估方面的研究进展做一综述.     

MIG7调节肝细胞癌中血管生成拟态的形成及其对肝癌转移潜能的影响

目的探讨肝细胞癌（HCC）中迁移诱导基因7（ MIG7）的表达与血管生成拟态（VM）形成的相关性,以及MIG7的表达与不同肝癌细胞株VM形成能力及转移潜能的关系。方法应用免疫组织化学方法分析配对的40例HCC原发灶及其转移灶标本中MIG7蛋白的表达和VM形成情况;应用三维培养技术培养不同转移潜能的人肝癌细胞株（高转移潜能肝癌细胞MHCC-97H、低转移潜能肝癌细胞MHCC-97L和非转移肝癌细胞Huh-7）及人正常肝细胞L-02,分别检测VM形成情况; 应用RT-PCR技术检测不同转移潜能肝癌细胞中 MIG7 mRNA的水平;应用Western blot技术检测不同转移潜能肝癌细胞株中MIG7蛋白表达水平。结果①40例配对的HCC原发灶和相应转移灶中,MIG7蛋白的表达与VM形成呈正相关（ rs=0.595,PMIG7 mRNA和蛋白表达及VM的形成能力均大于低转移潜能肝癌细胞株MHCC-97L及非转移肝癌细胞株Huh-7。人正常肝细胞L-02未见VM形成。结论MIG7高表达的肝癌组织中VM形成能力强,MIG7通过调节VM的形成影响HCC的侵袭转移,MIG7是抑制HCC侵袭转移的潜在靶点。     

MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体的构建及包装细胞株的建立

目的:构建迁移诱导基因（migration inducing gene 7,MIG7）的逆转录病毒表达载体并测序,初步建立其包装细胞株。方法:根据MIG7已知序列设计合成所需脱氧寡核苷酸序列,并与线性RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体连接。PCR扩增热转化后的连接产物,检测和挑取阳性克隆和阳性菌落,提取质粒后测序,与Gen-Bank中特异性MIG7-shRNA基因序列对比。包装并获取MIG7-shRNA重组逆转录病毒,qRT-PCR测定MIG7-shRNA重组逆转录病毒滴度并转染MHCC-97H细胞株。结果:构建的MIG7-shRNA表达载体与设计的完全一致,成功获得MIG7-shRNA逆转录病毒表达载体质粒CTC698-1-1和CTC698-2N-1转染的PT67细胞克隆株,pSIREN-M1病毒和pSIREN-MN病毒颗粒数约为1.0×108v.p/ml,能高效转染MHCC-97H细胞株。结论:成功构建了MIG7的逆转录病毒表达载体并建立其包装细胞株。     

射频消融联合放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌疗效及安全性分析

目的：评估术中冷循环射频消融联合放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌的疗效和安全性,以及对患者生存质量的影响。方法：对28例不可切除的局部进展期胰头癌患者行术中冷循环射频消融联合放化疗治疗,观察患者手术前后肿瘤标志物 CA19－9水平、影像学变化及术后并发症和生存率。结果：本组患者无手术死亡,术后联合放化疗患者均耐受良好。所有患者 CA19－9水平明显下降,术后30天、90天彩超和CT 在原发病灶未发现肿瘤进展。85．71％（24／28）并发少量胰瘘,分别经引流后愈合,平均引流时间为15天。全组28例随访率为100％,随访时间最长18个月,存活12个月以上23例,最长者已达18个月。其中6个月无进展生存20例,12个月无进展生存13例。结论：开腹下冷循环射频消融联合同期放化疗治疗不可切除的局部进展期胰头癌安全有效,术后患者无进展生存期及生存质量明显提高。     

兔抗人MIG7多克隆抗体的制备和纯化

目的:构建、表达迁移诱导蛋白7(migration-inducing protein 7,MIG7),制备该融合蛋白的兔多克隆抗体,纯化并鉴定该多克隆抗体.方法:设计并合成MIG7蛋白特异性多肽片段,合成的MIG7多肽与马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,构建半抗原-载体偶联物.以MIG7特异性多肽-KLH为抗原免疫大白兔,制备抗MIG7多克隆抗体.40%硫酸铵沉淀、甘氨酸溶液洗脱纯化抗体,Dot blot检测抗体血清效价.免疫组化与qRT-PCR验证MIG7抗体.结果:免疫组织化学染色与qRT-PCR检测结果一致,证明该抗体可特异性结合MIG蛋白,获得MIG7多克隆抗体.结论:本研究成功制备并纯化了特异性较高的抗MIG7多克隆抗体,为进一步研究MIG7在血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成和肝癌侵袭转移中的机制奠定了基础.