黑质致密部和内侧前脑束注射6-OHDA 制备的帕金森病大鼠模型纹状体中 DA 含量比较

目的：：比较黑质致密部(SNc)损毁和内侧前脑束(MFB)损毁2种方法制备的帕金森病(PD)大鼠模型对纹状体中多巴胺(DA)递质含量的影响。方法：将大鼠随机分为假手术组(n=12)、SNc 损毁组(n=15)和 MFB 损毁组(n=14)。采用高效液相色谱-电化学检测法,观察3组大鼠损毁侧纹状体中 DA的含量。结果：与假手术组相比较,SNc 损毁组(P <0.001)和 MFB 损毁组(P <0.001)大鼠纹状体中 DA含量均显著降低,与 SNc 损毁组相比较,MFB 损毁组大鼠纹状体中 DA 含量下降更为显著(P =0.005)。结论：MFB 损毁制备的 PD 大鼠模型对 DA 能神经元的损伤范围较 SNc 损毁有所扩大,为不同研究选择制备模型的方法提供一定的理论依据。     

氯胺酮对烧伤早期小鼠肝应激相关蛋白IFIT1和JAB1表达的影响

目的:观察小鼠应激相关蛋白IFIT1(Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1)和JAB1(c-Jun activation domain-binding protein1)在肝脏的表达的细胞定位及氯胺酮对烧伤后早期肝脏IFIT1和JAB1表达的影响,初步探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制.方法:将15只健康C57/129小鼠随机分为3组(n=5),正常对照组、烧伤组、烧伤+氯胺酮组.采用TBSA 15-20%Ⅲ度小鼠烧伤模型;氯胺酮10 mg/ks,肌肉注射,烧伤15 min给予.分别于烧伤后4 h脱臼处死,取肝.采用免疫印迹法(Westem blot)观察各组肝IFIT1和JAB1的表达情况.取正常对照组肝组织作病理切片,行免疫组织化学方法对IFIT1和JAB1的表达做细胞定位.结果:烧伤组IFIT1表达较正常对照组显著增高(P<0.01).烧伤组JAB1表达较正常对照组显著降低(P<0.01):氯胺酮治疗组IFIT1表达较正常对照组、烧伤对照组显著降低(P<0.01),氯胺酮治疗组JAB1表达较正常对照组显著降低(P<0.05)、较烧伤组显著升高(P<0.05).免疫组织化学方法显示,IFIT1在肝细胞胞浆表达为阳性,JAB1在肝细胞胞浆和胞核均表达为阳性.结论:烧伤早期小鼠肝组织IFIT1表达增高而JAB1表达降低.氯胺酮可降低烧伤早期小鼠肝组织IFIT1的高表达,增高JAB1表达;氯胺酮可通过调控严重烧伤应激中IFIT1和JAB1的表达而在全身炎性反应综合症(Systemic inflamma-tory response syndrome SIRS)中发挥作用.     

异丙酚对严重烫伤早期大鼠肝NF-KB、CD14表达及凋亡的影响

目的:观察异丙酚对严重烫伤早期大鼠肝脏核因子(NF-κB)、白细胞分化抗原(CD14)表达及凋亡的影响.方法:40只SD大鼠随机分为对照组和异丙酚保护组,每组20只.采用大鼠30％体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤模型.分别于烫伤前(0 h)、烫伤后6、12、24 h分离大鼠肝脏,免疫组织化学法检测肝脏NF-κB、CD14蛋白表达;末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡数.结果:NF-κB在烫伤后6h即达到高峰,12和24 h始终维持在较高水平,组内差异显著(P＜0.05);CD14在烫伤后6h开始升高,12h达到高峰,24 h仍高于0h,组内差异显著(P＜0.05);肝细胞凋亡数6h开始升高,24 h达到高峰,组内差异显著(P＜0.05).烫伤0h,2组NF-κB、CD14蛋白表达比较无显著差异(P＞0.05);烫伤6、12和24 h,异丙酚保护组低于对照组,组间差异显著(P＜0.05).0和6h肝细胞凋亡数,组间比较无显著差异(P＞0.05),异丙酚保护组12和24 h较对照组显著降低(P＜0.05).结论:异丙酚可以显著降低严重烫伤早期大鼠肝细胞NF-κB、CD14蛋白表达并降低肝细胞凋亡数,对严重烫伤早期肝细胞损伤有保护作用.     

生理学实验视听结合式教学法的探索与实践

实验教学是生理学教学的重要环节,视听结合是将传统教学与多媒体技术有机结合进行教学的模式.这种方法的实施在于如何调动学生的学习主动性和学习兴趣,培养学生团队合作能力、创新思维能力、实际操作能力,以提高生理学实验教学效果.     

小鼠IFIT1多克隆抗体的制备

目的 获取小鼠IFIT1(Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1 )特异性多克隆抗体.方法 扩增培养高效表达IFIT1的重组子pMAL-C2X-IFIT1,超声破碎后的细胞上清过Amylose Pre-packed column亲和层析柱,将所得纯化的融合蛋白MBP-IFIT1作为抗原,添加福氏佐机剂后免疫兔,收集抗血清,用Western blot和ELISA方法测定抗血清特异性反应和效价.结果 纯化的MBP-IFIT1可诱导兔产生特异性免疫应答,所得抗体能够特异性识别融合蛋白中的IFIT1,ELISA结果显示其效价为1∶12 800.结论 MBP-IFIT1具有良好的抗原性,以该融合蛋白为抗原免疫兔成功制备出IFIT1特异性多克隆抗体.     

严重烧伤小鼠肝细胞IFIT1 表达与凋亡的关系

目的：探讨严重烧伤急性应激期干扰素诱导含TPR基序的蛋白1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1,IFIT1)表达与肝细胞凋亡的关系。方法：健康C57/129小鼠25只,随机分成5组,每组5只：正常对照(0 h) 组、烧伤后1,6,12和24 h组。制作烧伤组大鼠20%总体表面积(total body surface area,TBSA)III度烧伤模型。取肝组 织,Western印迹观察IFIT1表达;免疫组织化学检测caspase-3和caspase-8表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口 末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果：IFIT1烧伤后 1 h开始增高,6 h最高,12 h开始降低,24 h降至最低,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);caspase-3和caspase-8烧伤 后随时间逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);TUNEL 法显示烧伤后肝细胞凋亡1 h与0 h比较差异无统计 学意义(P>0.05),6 h至24 h呈逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论：严重烧伤后IFIT1表达增高可促 使肝细胞凋亡的增强。     

宫腔镜手术两种静脉麻醉方法的研究

目的:比较丙泊酚复合芬太尼和丙泊酚复合瑞芬太尼两种麻醉方法用于宫腔镜手术的安全性和有效性.方法:选取ASA Ⅰ级～Ⅱ级、无禁忌证、自愿接受宫腔镜手术的患者60 例,随机分为丙泊酚+芬太尼组(PF组)和丙泊酚+瑞芬太尼组(PR组)两组,每组各30例 . 观察麻醉前、麻醉起效、扩宫颈、术中、术毕清醒各时点的HR、MAP、RR、SpO2变化,并记录起效时间、恢复时间、准确定向恢复时间、术中体动(程度和次数)、术后镇痛效果、呼吸抑制、术后并发症发生情况.结果: 麻醉起效后两组HR、MAP、RR、SPO2均显著下降,术毕逐渐恢复到术前水平,两组间无显著差异;PR组麻醉起效时间、恢复时间及准确定向恢复时间均显著短于PF组(P＜0.01);PR组丙泊酚总用量、术中体动、麻醉不满意发生率、术后嗜唾发生率均显著低于PF组(P＜0.05);PR组苏醒后5 min的VRS评级和术后宫缩痛发生率显著高于PF组(P＜0.05).结论:宫腔镜手术中,丙泊酚复合瑞芬太尼在麻醉效果和降低不良反应发生方面优于丙泊酚复合芬太尼,是一种安全优良宫腔镜手术麻醉方法.     

底丘脑核中MPEP对治疗早期帕金森病模型大鼠运动行为的影响

目的：：探讨底丘脑核(STN)中代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)拮抗剂 MPEP 对部分损毁的帕金森病(PD)模型大鼠运动行为的影响及神经保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组(n=12)、损毁+生理盐水组(n=12)、损毁+MPEP 组(n=12)。采用行为学和神经化学检测方法,观察3组大鼠在旷场实验中的自发运动能力和斜板实验中的停留角度,以及纹状体中多巴胺(DA)含量。结果：与假手术组大鼠相比较,损毁+生理盐水组大鼠的水平运动能力(P<0.001)、垂直运动能力(P<0.001)和斜板停留角度(P<0.001)均明显降低,而损毁+MPEP组大鼠均恢复至假手术组水平(P>0.05)。神经化学检测结果显示,与假手术组大鼠相比较,损毁+生理盐水组大鼠纹状体DA含量降低了56.3%(P<0.001),而损毁+MPEP组大鼠与假手术组大鼠无明显差异(P>0.05),且与损毁+生理盐水组比较明显升高(P<0.001)。结论：慢性STN局部应用MPEP对早期PD模型大鼠的运动行为和神经元具有保护作用。     

颈交感神经阻滞对烧伤早期小鼠肝脏干扰素诱导蛋白IFIT1表达的影响

目的检测干扰素诱导蛋白IFIT1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1)在小鼠各器官组织的表达状况,并在此基础上探讨颈交感神经阻滞(SB)对烧伤后早期小鼠肝脏IFIT1表达的影响。方法雄性C57/129小鼠50只,分为对照组和SB治疗组,TBSA15%～20%Ⅲ度小鼠烧伤模型,分别于烧伤前、烧伤后1、6、12h和24h取肝组织,采用免疫印迹法(Western blot)观察IFIT1的蛋白表达情况,同时提取正常小鼠心、肝、脾、肺、肾、小肠、淋巴细胞和骨骼肌组织RNA,以RT-PCR检测IFIT1表达情况。结果RT-PCR结果显示IFIT1在正常小鼠各组织均有表达,但组织间的表达量存在差异。Western blot结果表明对照组烧伤后肝组织IFIT1表达显著增高(P<0.01),烧伤后SB治疗组IFIT1表达量较对照组相应时相点降低非常显著(P<0.01)。结论IFIT1在小鼠体内广泛表达。SB对严重创伤的治疗作用可能是通过抑制肝内IFIT1表达来实现的。