选择性5-HT1A受体拮抗剂WAY-100635抑制帕金森病模型大鼠腹内侧前额叶皮质的神经活动

目的腹内侧前额叶皮质在随意运动的起始和控制、情感以及认知中具有重要作用。然而,黑质-纹状体通路变性后腹内侧前额叶皮质的神经活动和5-HT_(1A)受体的作用仍不清楚。本研究观察了6-羟基多巴胺(6- hydroxydopamine,6-OHDA)损毁黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)后大鼠腹内侧前额叶皮质神经活动的变化和体循环给予选择性5-HT_(1A)受体拮抗剂WAY-100635后神经元活动的改变。方法采用在体玻璃微电极细胞外记录方法,记录正常大鼠和SNc单侧损毁大鼠的腹内侧前额叶皮质神经元的活动。结果6-OHDA损毁SNc大鼠的腹内侧前额叶皮质神经元放电频率显著增加,放电形式没有明显改变。体循环给予WAY-100635 (0.1 mg/kg,i.v.)不改变正常大鼠腹内侧前额叶皮质神经元的平均放电频率和放电形式,而显著降低了SNc损毁大鼠前额叶皮质神经元的平均放电频率。结论黑质-纹状体通路的变性可导致腹内侧前额叶皮质神经活动增强,5-HT_(1A)受体拮抗剂WAY-100635可以抑制这种活动增强,提示可能存在腹内侧前额叶皮质5-HT_(1A)受体功能失调。     

黑质致密部和内侧前脑束注射6-OHDA 制备的帕金森病大鼠模型纹状体中 DA 含量比较

目的：：比较黑质致密部(SNc)损毁和内侧前脑束(MFB)损毁2种方法制备的帕金森病(PD)大鼠模型对纹状体中多巴胺(DA)递质含量的影响。方法：将大鼠随机分为假手术组(n=12)、SNc 损毁组(n=15)和 MFB 损毁组(n=14)。采用高效液相色谱-电化学检测法,观察3组大鼠损毁侧纹状体中 DA的含量。结果：与假手术组相比较,SNc 损毁组(P <0.001)和 MFB 损毁组(P <0.001)大鼠纹状体中 DA含量均显著降低,与 SNc 损毁组相比较,MFB 损毁组大鼠纹状体中 DA 含量下降更为显著(P =0.005)。结论：MFB 损毁制备的 PD 大鼠模型对 DA 能神经元的损伤范围较 SNc 损毁有所扩大,为不同研究选择制备模型的方法提供一定的理论依据。     

血管活性肠肽对RAW264.7小鼠巨噬细胞TREM-1功能的影响

目的　观察血管活性肠肽(VIP)对RAW264.7小鼠巨噬细胞髓样细胞表达的触发受体-1（TREM-1）功能的影响。 方法　以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,细胞接种于培养板后采用TREM-1的单克隆激动抗体激活TREM-1,VIP预处理组采用10 nM的VIP进行干预。1 h后采用Western blot法检测胞内PLC-γ磷酸化改变,采用DCFH-DA荧光探针检测胞内活性氧簇（ROS）的含量;6 h后,采用real-time PCR法检测巨噬细胞TREM-1受体激活后下游靶基因肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的基因表达;12 h后,采用ELISA法检测细胞培养上清液TNF-α和MCP-1的蛋白含量。 结果　采用TREM-1单克隆激动抗体处理小鼠巨噬细胞后,可显著增高胞内PLC-γ磷酸化水平、ROS含量,以及TNF-α和MCP-1的mRNA与蛋白水平,而VIP预处理可明显抑制单克隆激动抗体所诱导的上述反应。 结论　VIP可抑制RAW264.7小鼠巨噬细胞TREM-1激活后诱导的功能改变,从而发挥抗氧化抗炎的作用。     

电损毁外侧缰核对帕金森病模型大鼠空间学习记忆功能的影响及其机制

观察电损毁外侧缰核（LHb）对帕金森病（PD）模型大鼠空间学习记忆功能的影响，阐明LHb在PD大鼠认知功能障碍中的作用及其相关机制。     

生理学实验教学开放与管理的探讨

生理学是一门实践性科学,是药理学、病理学等后续课程和临床各学科的基础。在教学中,实验教学突显出其重要性。分析了制约实验教学的问题,就如何实现系统的实验开放与系统管理进行了探讨。     

TNF-α在神经病理性疼痛模型大鼠脑组织中的表达和作用

目的:通过研究保留性神经损伤(SNI)模型大鼠脑组织中TNF-α的表达情况,从而探讨TNF-α在神经病理性疼痛维持中的中枢可能机制.方法:建立SNI大鼠模型,取脑组织进行连续冰冻切片,通过免疫组织化学技术观察TNF-α在不同脑区和核团的表达情况.结果:在SNI模型大鼠的红核区域和内侧纵束间质核部位,TNF-α阳性细胞数和平均灰度值明显高于对照组,P<0.05.结论:红核以及内侧纵束间质核在神经病理性疼痛的发生和维持以及调控过程中发挥重要作用,而TNF-α是其发挥痛觉调控的主要免疫分子之一.     

SPOC在生理学教学中的实践与探索

目的：探讨基于SPOC的混合式教学模式在生理学教学中的效果。方法：在我校2018级口腔医学专业生理学课程中实施基于SPOC的混合式教学,采用形成性评价的期末综合成绩与调查问卷评价教学效果。结果：SPOC混合式教学成绩显著高于传统教学成绩(P<0.05);问卷结果显示,80%以上的学生认为SPOC混合式教学模式对学习有帮助。结论：SPOC混合式教学模式提高了学生的自主学习能力,促进了生理学教学质量和教师综合能力的提升。     

外侧缰核中5-HT2C受体在帕金森病模型大鼠焦虑行为中的调节作用及其机制

目的: 探讨外侧缰核(LHb)中5-羟色胺2C(5-HT_2C)受体在调节帕金森病(PD)大鼠相关焦虑行为中的作用,阐明PD相关焦虑行为的神经机制。方法: 将126只大鼠随机分为假手术组(n=63)和黑质致密部(SNc)损毁组(n=63)。采用行为学方法观察2组大鼠在旷场实验中的中央区停留时间百分比、高架十字迷宫实验(EPM)中的开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比;采用高效液相色谱-电化学检测法观察大鼠边缘相关脑区中单胺类递质水平;采用组织学和免疫组织化学染色法确认套管位置及SNc损毁后多巴胺(DA)神经元的缺失程度。结果: 与假手术组比较,SNc损毁组大鼠中央区停留时间百分比(F_1,72=36.678,P<0.001)、开放臂进入次数百分比(F_1,72=59.077,P<0.001)和开放臂停留时间百分比(F_1,72=84.245,P<0.001)均明显降低,且内侧前额叶皮层(mPFC)(P<0.01)、杏仁核(P<0.01)和海马(P<0.05)中DA水平均明显下降;LHb中局部注射5-HT_2C受体激动剂Ro60-0175后,与未加入Ro60-0175时比较,2组大鼠中央区停留时间百分比(P<0.05或P<0.01)、开放臂进入次数百分比(P<0.05或P<0.01)和开放臂停留时间百分比(P<0.05或P<0.01)均明显降低;且mPFC、杏仁核和海马中3种单胺类递质DA、5-HT和去甲肾上腺素(NA)水平均不同程度下降。在mPFC,2组大鼠给予Ro60-0175后,3种递质水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);在杏仁核,给予Ro60-0175后,除5-HT水平无明显变化外,其余2种递质水平明显下降(P<0.05或P<0.01);在海马,给予Ro60-0175后,除假手术组大鼠NA水平无变化外,其余均明显下降(P<0.05或P<0.01)。组织学确认行为学实验中使用大鼠套管均位于LHb上方1mm;免疫组织化学检测,SNc损毁组大鼠损毁侧SNc中DA神经元完全缺失,且腹侧被盖区DA神经元较未损毁侧明显减少(P<0.001)。结论: LHb中5-HT_2C受体的激活可诱发或增强大鼠的焦虑行为,其机制与相关脑区中单胺类递质水平变化有关联。     

长链非编码RNA MIAT在非小细胞肺癌中的表达及功能研究

目的:研究长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达情况及其对NSCLC细胞功能的影响。方法:利用Gene Expression Omnibus(GEO)数据库提取GSE19804和GSE30219数据集的生物信息学资料和临床预后资料,分析MIAT在NSCLC组织和正常肺组织中的表达差异,以及MIAT表达水平与NSCLC患者生存期的关系;用q PCR检测25对NSCLC肿瘤组织和其癌旁组织,以及NSCLC细胞系A549、NCI-H266和NCI-H1299及人正常支气管上皮细胞系HBE中MIAT的表达情况;将MIAT si RNA(si-MIAT)和对照序列(si-NC)分别转染NSCLC细胞系A549,采用流式细胞术、CCK-8实验和细胞集落形成实验检测2组细胞的增殖情况,并且用q PCR和Western blot实验检测2组细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(CDKN1A)的表达情况。结果:GSE19804数据集分析显示MIAT在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织(P0.05),GSE30219数据集分析显示MIAT高表达患者的生存期显著短于低表达患者(P0.01)。此外,与癌旁正常组织和HBE细胞相比较,NSCLC组织和细胞系中MIAT的表达水平升高(P0.05);si-MIAT组A549细胞中MIAT表达水平明显低于si-NC组(P0.01),且细胞活力和细胞集落数均低于siNC组,差异均有统计学意义(P0.05);同时,相较于si-NC组,si-MIAT组cyclin D1的表达受到明显抑制(P0.05),而CDKN1A的表达明显升高(P0.05)。结论:NSCLC组织及细胞系中MIAT呈高表达,沉默MIAT表达可明显抑制NSCLC恶性增殖的表型。MIAT可作为NSCLC靶向治疗的潜在靶标。