腺病毒介导的PTEN和p16基因对前列腺癌细胞系的作用

[目的]探讨腺病毒介导的PTEN和p16基因蛋白对抑制前列腺癌细胞增殖和调控其凋亡的作用.[方法]构建携带人PTEN和p16基因的腺病毒载体,转染体外培养的前列腺癌细胞系PC-3,采用RTPCR、Westem b1ot检测目的基因的表达.通过细胞生长试验、流式细胞仪检测PC-3转染前后细胞增殖和凋亡的变化.[结果]病毒滴度 Ad-PTEN为1.8×107 pfu/ml、Ad-p16为1.2×1010 pfu/ml,RT-PCR检测可见PTEN-mRNA(462bp)和p16-mRNA(520bp)表达,Western blot检测有PTEN蛋白(60KD)和p16蛋白(16KD)特异表达,并可明显抑制PC-3细胞的增殖,诱导其凋亡,联合基因治疗组与单基因组相比差异显著.[结论]PTEN和p16可明显的抑制前列腺癌细胞株PC 3的增殖,增加细胞的凋亡,转染携带PTEN和p16的重组腺病毒载体有望成为治疗前列腺癌的有效方法.     

累及泌尿系统的外周原始神经外胚层肿瘤

目的探讨累及泌尿系统的外周原始神经外胚层肿瘤(pPNET)的临床特点、免疫组化特点和诊断标准，提高pPNET的诊治水平。方法回顾分析7例累及泌尿系统的pPNET患者临床资料，其中6例行肿瘤根治性切除术，1例前列腺pPNET术中发现肿瘤已侵犯膀胱颈部和直肠前壁，仅行活检术。结果7例术后病理和免疫组化检查均诊断为pPNET。围手术期无患者死亡，7例患者随访4～26个月，平均12个月，1例术后5个月死于肿瘤远处转移和肾功能衰竭。结论泌尿系统pPNET是一种好发于年轻男性的恶性肿瘤，病变进展迅速，确诊依靠病理，预后较差，但发病早期根治性手术仍有较大的治疗意义。     

人类前列腺癌裸鼠原位移植模型的建立

目的　建立人类前列腺癌裸鼠原位肿瘤模型,为前列腺癌的研究提供有用的工具。　6方法　将 2×106 PC 3细胞注射于 10只BALB/c裸小鼠背部靠近腋窝处。8周后,取出背部肿瘤,剪成小块,种植于 20只裸鼠前列腺背侧叶被膜下,缝合包埋固定。9~12周后处死裸鼠,对前列腺和相关器官进行检测,确定肿瘤生长和转移情况。　结果　18只 (90% )裸鼠前列腺生长出肿瘤, 17只肿瘤直径>1. 5cm。12只因梗阻出现膀胱扩张和肾积水, 10只出现腹膜后主动脉旁淋巴结转移, 4只出现肺转移, 1只肝转移,无骨转移。病理切片可见大部分腺体被肿瘤细胞破坏,细胞胞核浓染,呈多形性,可见异常分裂相;转移淋巴结的皮质和髓质被肿瘤细胞占据。　结论　外科原位移植技术建立的前列腺癌模型,较好地保留了肿瘤细胞的生物学习性,生长快,局部侵犯范围较广,有较高的淋巴转移和肺转移率,是较理想的前列腺癌异种移植模型。     

睾丸扭转27例分析

对我院1995~2006年收治的睾丸扭转27例分析如下。1临床资料本组年龄9~33(平均17)岁。左侧18例,右侧9例,所有患者均无明显诱因,突发患侧睾丸疼痛,发病至就诊平均时间11h,其中6 h内就诊9例,12 h 5例,12 h以上13例。左侧18例,右侧9例。自发病至手术治疗时间最短者为3 h,最长者达68 h以上。所有患者均无明显诱因出现睾丸疼痛,其中伴腹股沟区疼痛9例;伴恶心、呕吐7例;体格检查均可见患侧阴囊肿胀,睾丸、附睾界限不清,睾丸肿大,触痛明显,精索增粗,P rehn征阳性,提睾肌反射消失。彩色多普勒血流成像可见患侧睾丸、附睾增大,血流减少或消失,内部回…     

裸鼠前列腺原位移植PC3肿瘤模型的建立

建立理想的动物模型是阐明前列腺癌的发病机制、肿瘤与宿主的关系、癌侵袭与转移的过程和治疗措施有效性的实验基础。为此,我们以有关研究为参考[1],将PC3细胞在免疫缺陷小鼠背部皮下形成肿瘤,进而采用外科原位移植技术将肿瘤组织块种植于裸鼠的前列腺背侧叶,建成前列腺原位肿瘤模型,旨在为进行前列腺癌的研究提供有用的工具。一、材料与方法1.材料:4～6周龄雄性BALB/C裸小鼠30只,20～22g,SPF级,由中科院上海实验动物中心提供。10只用于背部皮下种植,20只用于前列腺原位种植。人前列腺癌PC3细胞株,长海医院中心实验室冻存。2.皮下种植:…     

同种种苗异地栽培丹参质量比较研究

目的 对同种丹参种苗在不同地区栽培的丹参质量进行分析评价.方法 根据2015年版药典方法,采用高效液相色谱法(HPLC),对同种种苗异地栽培丹参的根、须根及地上部分茎、叶、花、花托6个部位的丹酚酸B、丹参酮类(丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮I)进行含量测定.结果 同种种苗的含山栽培丹参中两类成分含量均略高于太和栽培丹参,丹参酮类在不同部位分布的含量为根>须根>花托>茎>叶>花,丹酚酸B则为根>须根>花>茎>花托>叶,丹参不同部位含量有较大差异,其中根和须根的含量均高于药典标准.结论 异地栽培的丹参脂溶性成分差异有统计学意义,含山产栽培丹参优于太和产;异地栽培的丹参水溶性成分丹参含量无差异;该实验为指导优质产区种苗的扩大种植提供参考依据.     

不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响

目的 探究不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响,筛选丹参的发汗条件。方法 以发汗堆积量(A)、发汗环境温度(B)、发汗时间(C)3个条件因素水平,采用正交设计方法对同一批次丹参鲜品进行发汗处理,采用高效液相色谱法对发汗丹参中丹参酮类（丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ）的含量进行测定。结果 不同的发汗条件因素对发汗丹参中丹参酮类的含量有显著影响,不同发汗条件因素对丹参酮类的影响依次为发汗环境温度(B)、堆积量(A)、发汗时间(C)。结论 丹参酮类的含量受不同的发汗条件影响显著,为制定丹参药材产地初加工技术标准及其标准操作流程提供实验基础和参考依据。     

γ射线防治尿道狭窄与诱导成纤维细胞凋亡的关系

1998年 ,孙颖浩等[1] 采用尿道狭窄内切开或瘢痕电切术后尿道内γ射线放疗 (总剂量 10～ 15Gy)防治复发性尿道狭窄 ,疗效满意。为探讨γ射线在临床应用剂量范围内防治尿道狭窄的作用机制 ,我们研究了γ射线体外照射对尿道瘢痕成纤维细胞的杀伤效应。一、材料和方法1.成纤维细胞培养 :取手术切除的尿道增生性瘢痕组织 ,采用组织块贴壁法原代培养[2 ] 。细胞生长成片后传代培养。2 .实验分组 :取 8～ 10代指数生长期细胞进行实验。照射前 2 4h ,以红细胞计数法计数细胞 ,按 3× 10 6个 /瓶接种到 75ml培养瓶中。随机将各瓶细胞设置为未照射组…     

大鼠膀胱移行上皮细胞体外培养

采用Ⅳ型胶原酶消化大鼠膀胱粘膜上皮，可快速获得大量活性高的膀胱移行上皮细胞，细胞接种后1—2d贴壁生长，5—7d增殖明显，8—10d融合成片。培养的上皮细胞光镜下呈扁平多边形、单层排列：免疫组化显示95％以上的上皮细胞角蛋白抗体染色阳性；电镜下细胞表面可见大量微绒毛。大鼠膀胱移行上皮细胞的体外培养为细胞功能研究提供了有价值的模型。     

PTEN蛋白在前列腺癌中的表达及意义

目的 研究前列腺癌PTEN蛋白的表达及其与肿瘤转移、分级及分期的关系。方法 采用抗PTEN的多克隆抗体免疫组织化学技术染色法(Envision法)研究35例前列腺癌组织切片。结果 35例前列腺癌中有8例(22．9％)呈不同程度的阳性表达。转移者的PTEN表达率(5．9％)明显低于非转移者(38．9％，P＜0．01)；在A、B期的表达率明显高于C、D期(P＜0．05)；高、中分化组间表达率的差异虽无显著性，但高分化与低分化、中分化与低分化间PTEN阳性表达率的差异有显著性(P＜0．05)。PTEN蛋白在良性组织上皮细胞及肿瘤细胞胞质中表达，在胞核及基质中不表达，在癌旁增生组织上皮细胞中呈强弱不等的阳性表达。结论 PTEN可作为良好的前列腺癌进展的肿瘤标记物。