特异性转移因子对人胃癌细胞RNA合成及H—ras癌基因表达的影响

七十年代以来,转移因子(Transfer factor,简称TF)作为一种细胞免疫调节剂应用于多种恶性肿瘤的临床辅助治疗,取得了一定的疗效。有文献报道,TF对小鼠H_(22)腹水癌细胞具有一定抑制作用,提示TF对肿瘤细胞很可能还具有直接效应。但由于腹水中细胞成分复杂,这种抑制作用尚不能完全确认为对肿瘤的直接效应.因此进一步观察TF对肿瘤细胞的直接效应并探讨其机制,对阐明TF的     

人肿瘤坏死因子α单链抗体的原核表达和活性分析

目的　在大肠杆菌中表达抗人 TNF-α单链抗体 (Sc Fv) ,并分析它的结合活性和中和活性 .方法　在获得抗人 TNF-αE6 Sc Fv的基础上 ,用热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中表达 E6 Sc Fv蛋白 .EL ISA测定抗体的结合活性 ,实时 BIA技术确定亲和常数 ,L 92 9细胞毒试验分析其中和活性 .结果　克隆了抗人 TNF-α E6 Sc Fv基因的热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中 ,经42℃热诱导 ,得到了相对分子质量 (Mr)约为 2 70 0 0的重组蛋白质 ,表达量占菌体总蛋白的 18% .对在大肠杆菌中表达的E6 Sc Fv进行了复性和亲和层析纯化 ,并进一步证…     

诱导条件对TNF—α ScFv在原核系统中表达量的影响

目的：探讨诱导时间对目的蛋白表达量的影响。为大量获得抗ＴＮＦ－α单链抗体提供实验依据。方法：将Ｅ６ＳｃＦｖ基因分别克隆入表达载体ｐＥＴ１５ｂ－Ｅｔａｇ和ｐＢＶ２２０中,构建重组质表达质粒ｐＥＴＥ６ＳｃＦｖ和ｐＢＶＥ６ＳｃＦｖ。在化学诱志和温度诱导两种条件下,于诱导后相同时间点等量取菌体,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对各时间点表达产物扫描定量。     

应用胞内染色技术分析抗TNF-α单链抗体的活性

本文用TPA和LPS刺激培养的HL6 0细胞作为靶的 ,通过胞内染色技术和流式细胞仪分析了抗TNF α单链抗体 (ScFv)的活性。结果表明 ,抗TNF αScFv和其亲本单克隆抗体 (mAb)与TNF α竞争作用显示平均荧光强度 (MFC)为 2 2 7% ,而mAb与TNF α结合显示MFC为 6 9 5 % ,抗TNF αScFv E tag与TNF α结合显示MFC为 48 8% ,空白和阴性对照的MFC分别为1 1%和 2 5 %。相对于mAb ,ScFv的抑制率是 78 37% ,抗原相对结合力是 6 8 17%。本文的结果说明抗TNF αScFv具有与其亲本单抗相同表位的结合活性 ,也为定量和直观测定ScFv的活性提供了实验依据。     

人肿瘤坏死因子α单链抗体的原核表达和活性分析

目的 在大肠杆菌中表达抗入ＴＮＦ－α单链抗体（ＳｃＦｖ）,并分析它的结合活性和中和活性。方法 在获得抗人ＴＮＦ－αＥＳｃＦｖ基因的基础上,用热诱导载体ｐＢＶ２２０在大肠杆菌中表达Ｅ６ＳｃＦｖ蛋白。ＥＬＩＳＡ测定抗体的结合活性,实时ＢＩＡ技术确定亲和常数。Ｌ９２９细胞毒试验分析其中和活性。结果 克隆了抗人ＴＮＦ－αＥ６ＳｃＦｖ基因的热诱导载体ｐＢＶ２２０在大肠杆菌中,经４２℃热诱导,得到了相对分子质     

Expression of GST-IL-1 fusion gene

ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＳＴ－ＩＬ－１ｆｕｓｉｏｎｇｅｎｅＣｈｅｎＭｅｉｈｏｎｇ（陈梅红）；ＷａｎｇＺｉｌｉｎｇ（王字玲）；ＤｅｎｇＪｉａｎｂｅｉ（邓健蓓）；ＺｈａｏＺｈｏｎｇｌｉａｎｇ（赵忠良）；ＣｈｅｎＮａｎｃｈｕｎ（陈南春）；ＳｕＣｈｅｎｇｚ...     

c—Ha—ras和c—myc反义寡聚脱氧核苷酸对人胃癌细胞生长增殖…

作观察了人工合成的反义ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｒ，ＡＳＯ－ｍ）对两株胃癌细胞中Ｈａ－ｒａｓ癌基因表达和细胞生长增殖的影响，观察至ＡＳＯ－ｒ能显抑制ＭＧｃ－８０３细胞Ｐ２１蛋白合成（作用１２ｈ抑制率达４８．１０％，Ｐ＜０．０１），同时对其ＤＮＡ合成和细胞增殖也有较显的抑制作用（抑制率分别为７６．７９％，５５．６１％，Ｐ＜０．０５）。ＡＳＯ－ｒ对ＳＧｃ－７９０１细...     

Study of renaturation condition of anti-TNF-α recombinant antibodies

Recolnbinant Protein of antibody empressed in foreignhosts (generaly Eschewhia colt) may accumulate in insoluble fonnS--inclusion bodies, which has not any biological activity. In most cases, insoluble inclusion bodiestend to Predondnate at higher expression levels. Recentstudies have revealed that the refolding of protein as wellas dissolving inclusion bodies into functional Protein mayl)e associated with denatu~ and renatllrant. In this paperl we used two eXPression productS as objects, w…     

鼠抗人TNF-α单域抗体基因在大肠杆菌中的融合表达

ＲＴ－ＰＣＲ法获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α单克隆抗体Ｅ６轻,重链可变区基因序列,分别构建融合表达载体ｐＧＥ６ＶＨ和ｐＧＥ６ＶＬ,利用大肠杆框图 系统表达ＶＨ和ＶＬ单域抗体蛋白。方法：将ＲＴ－ＰＣＲ法获得的Ｅ６ＶＨ和Ｅ６ＶＬ基因分别克隆入融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ－１中,使它们受控于Ｐｔａｃ启动子,转化大肠杆菌ＤＨ５α,经异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导,１００ｇ／ＬＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测表达