ABO反定型试剂红细胞的质量控制

已知血型的试剂红细胞是ABO血型的血清学鉴定中检测抗体必不可少的试剂。为了提高ABO血型检定结果的准确性，解决自制试剂红细胞无标准和无质控的问题，本研究组建立了ABO反定型试剂红细胞的质控方法，进行了试剂红细胞的特异性和亲和性检测、振荡检测、流式细胞术和原子显微镜观察。通过筛选建立了质控参考品，并在此基础上确定质量检定标准及质控方法，同时对制备的3批次试剂红细胞进行了评价。研究结果表明：制备的反定型试剂红细胞既能保证质量和性能的稳定，又能最大限度地降低批次间的差异。结论：制备的AB0反定型试剂红细胞解决了自制红细胞的质控问题，并能提高血型检定结果的准确性。     

自体成肌细胞修复周围神经缺损

目的:观察自体成肌细胞在神经再生室中的作用,探讨其作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法:实验于2002-08/2003-08在北京军事医学科学院基础医学研究所九室完成。①成年Wistar大鼠30只,采用随机数字法分成成肌细胞组、细胞外基质凝胶组和生理盐水组,每组10只。②切除大鼠右坐骨神经6mm,断端分别套入硅胶管,使神经两断端在硅胶管内相距13mm。③成肌细胞组:快速分离骨骼肌成肌细胞,差速贴壁法纯化、增殖,按1×109L-1细胞浓度与细胞外基质凝胶混合,植入神经再生室内;细胞外基质凝胶组:神经再生室内植入细胞外基质凝胶;生理盐水组:神经再生室内植入生理盐水。④术后4,8,12周进行大鼠坐骨神经功能指数测定;术后12周进行大体观察、电生理检测、腓肠肌湿重、神经组织学及超微结构观察。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①结蛋白免疫组织化学:阳性细胞平均达98.01%。②大体观察:术后12周,成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均可见再生神经,外形似正常神经,直径较正常的神经干细,成肌细胞组略粗于细胞外基质凝胶组。生理盐水组导管内无再生神经通过间隙。③坐骨神经功能指数:术后8,12周,成肌细胞组显著高于细胞外基质凝胶组(8周:-71.788±3.569,-76.986±2.266;12周:-61.847±2.914,-69.527±1.765;P均<0.01)。④电生理检查:术后12周,成肌细胞组的运动神经传导速度及波幅明显高于细胞外基质凝胶组,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组腓肠肌肌电图呈部分失神经电位表现,生理盐水组则为完全失神经电位。⑤腓肠肌湿重恢复率:成肌细胞组明显好于细胞外基质凝胶组和生理盐水组。⑥组织学检查:术后12周,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组的再生神经纤维排列整齐、密集,神经导管交界处无瘢痕,成肌细胞组的再生神经纤维多且直径较粗大,排列更为规则。⑦透射电镜观察:成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均见再生的有髓神经纤维。⑧再生神经纤维图像分析:术后12周,在有髓神经纤维密度、神经纤维有效面积、有髓神经纤维数量、直径及髓鞘厚度等指标上成肌细胞组均优于细胞外基质凝胶组。结论:自体成肌细胞能够促进周围神经再生,可以作为种子细胞应用于外周神经组织工程。     

微波辐射致组织器官的病理改变及保护药物的研究进展

微波是介于无线电波与红外线之间的高频电磁波,频率3×10^8～3×10^11 Hz,根据波长不同可分为毫米波、厘米波和分米波.目前,微波已被广泛应用到通讯、探测、工业、医疗以及军事等各个方面.微波在给人类带来极大益处的同时,也对周围环境产生了不可避免的影响.微波对生物体的致伤作用,更是引起了人们的广泛关注,对于微波损伤的防治工作也逐渐成为科学研究的重点.     

急性高原低氧对于大鼠血红蛋白和血浆miR－144表达影响的研究

目的探讨急性高原低氧对于大鼠血红蛋白和血浆miR－144表达的影响。 方法应用低压氧舱构建高原低氧大鼠模型,分为高原低氧暴露3、7、14、28 d实验组以及常压常氧对照组。检测各组大鼠血常规和血浆miR－144表达情况。 结果与对照组比较,低压低氧组大鼠血浆miR－144、红细胞计数、血红蛋白含量均随高原低氧时间延长而显著升高(P<0.05)。Spearman相关性分析提示血浆miR－144与红细胞计数、血红蛋白含量呈正相关。 结论急性高原低氧可使大鼠血红蛋白和血浆miR－144表达升高。血浆miR－144可能参与调控高原低氧相关的红系变化。     

过滤染色法检查精子浓度的方法学研究

目的:开发一种快速精子浓度检测方法,并评价其可行性。方法:根据精子可被亚甲兰溶液染成蓝色,其颜色深浅与精子数量呈正相关原理,以经显微镜计数确认浓度的精子(2000万个/ml)为标准样本,加入亚甲蓝溶液染色,过滤,根据结果颜色,应用现代印刷技术制备出标准色标。以颜色深浅检验标本中精子浓度,对方法中涉及的过滤膜、染色液、染色时间、标准色标等关键参数进行确认,评价试剂盒检测结果。结果:通过对3000份成年男性精液样品检测结果表明,该试剂盒方法的灵敏度、特异性和准确性均在95%以上。结论:本方法所制试剂盒能够实现快速自检,适合医院检查前初步诊断,时间短,操作简单。     

阿的平对微波辐射小鼠海马损伤的保护作用

目的探讨预先给予阿的平（quinacrine）对微波辐射致小鼠脑损伤的保护作用。方法小鼠随机分为4组,即正常组、辐射对照组、阿的平低剂量组（12.6 mg/kg）、阿的平高剂量组（50.4 mg/kg）。接受辐射动物于照射后即刻（0 d）,1,2,7 d后完成检测,正常组动物在辐射实验后7 d后完成检测。微波辐照后,于不同时间点提取小鼠的脑组织蛋白,检测脑组织中HSP70蛋白表达变化。结果脑组织蛋白表达检测显示,微波辐射后1 d,辐射对照组小鼠脑中HSP70蛋白的表达开始升高,直至7 d。阿的平两个剂量组0,1,7 d给药组与辐射对照组相比明显上调,高剂量组尤甚。辐射对照组小鼠大脑海马的病理切片显示细胞水肿、血管扩张肿胀、间质充血等损伤,并出现海马沟回组织松散、细胞核皱缩、细胞水肿、空泡现象。预先灌胃给予小鼠阿的平后,小鼠脑组织的病理损伤有所减轻,状况有所改善。结论阿的平的这些保护机制可能与其上调HSP70蛋白表达发挥抗炎和抗凋亡作用,降低微波辐照引起的组织、细胞炎症反应和凋亡、坏死有关。     

沙纳唑对体外培养的小鼠骨髓粒系造血祖细胞的放射增敏作用

目的:本实验旨在研究沙纳唑以及合并γ射线照射对体外培养小鼠骨髓粒系造血祖细胞(CFU-GM)集落形成的影响,分析沙纳唑是否对其有放射增敏作用.方法:从小鼠骨髓分离CFU-CM,在37℃、5%CO2条件下培养,当细胞进入呈指数生长期,分别在培养液中加入一系列浓度纱纳唑(0,1,5,12.5,25,50,100,200,400,800μg/ml)进行孵育,接受60Coγ射线照射(剂量为0,0.5,1,2,3,4Gy),观察细胞集落形成比.为评价沙纳唑对CFU-GM的放射增敏性,将CFU-GM接受沙纳唑和γ射线照射(2Gy)处理以及两者合并处来评价沙纳唑对CFU-GM的放射增敏作用.结果:(1)沙纳唑对体外CFU-GM集落形成明显细胞抑制作用,且随剂量增加作用增大.沙纳唑在低剂量(低于20μg/ml)对CFU-GM集落形成抑制作用呈线性关系(r=0.9987,p<0.01)分别为50和120μg/ml.(2)放射照射对CFU-GM也有明显抑制作用,饱和剂量和Do值分别是2.0和0.72Gy.(3)用沙纳唑联合放射照射处理CFU-GM后,对CFU-GM的抑制作用比单一处理都要强,但经统计学分析沙纳唑与放射照射之间无协同作用.结论:纱纳唑对体外培养小鼠骨髓系造血祖细胞有细胞毒性作用,但在低于IC20剂量下复合放射照射对CFU-GM集落形成无放射增敏作用.     

一种电镜下观察贴壁培养细胞原位形态的新方法

使用丹麦Nunc公司的96孔可拆卸酶联板(拆卸为8条，每条12孔)．订购货号437915．因为该酶联板不是无菌级的，不能直接应用于细胞培养．又不能耐受高压灭菌，故采用高剂量放射线(如放射性钴源)照射灭菌．随后按照无菌级别处理，接种细胞。     

胶质细胞衍生神经营养因子生物学作用和应用前景

胶质细胞衍生神经营养因子（ＧＤＮＦ）是转化生长因子β（ＴＧＦβ）超家族的同型糖蛋白二聚体，可能属于一个新的亚族。人和鼠ＧＤＮＦ分子有９３％～９５％的同源性，人ＧＤＮＦ基因定位于５号染色体短臂上。在人和鼠的许多中枢和外周组织都有ＧＤＮＦｍＲＮＡ的表...     

热应激对大鼠纹状体多巴胺介导的磷脂酰肌醇信号系统的影响

目的探讨热应激对纹状体多巴胺(DA)介导的磷脂酰肌醇(PI)信号转导系统的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组和热应激组,大鼠在加热小仓中受热,达到设定肛温(Tr)时即刻取出。取纹状体,分别用荧光分光光度法、酸碱滴定法、高压液相法和Fura-2／AM荧光标记法测DA含量、PLA,活性、PI含量和[Ca^2 ]i。结果41．0℃Tr以上时,随Tr升高DA含量有持续增高趋势,并在43．0℃Tr时,比对照显著增加;在41．0℃Tr时,PLA,活性较对照显著增强,热应激组PI含量显著低于对照;在42．0℃Tr时,[Ca^2 ]i比对照显著增高,热应激前1h给予D2R拮抗剂氯氮平,则可减弱热应激引起的[Ca^2 ]i的升高,并延长肛温到达42．0℃的时间。结论热应激可能激动了DA介导的PI信号转导系统,[Ca^2 ]i升高可能经D2R介导,用D2R拮抗剂,可以提高机体耐热性。