急性白血病患者院内细菌L型感染的临床研究

目的 研究细菌Ｌ型在急性白血病医院感染中的作用。方法 ５０例急性白血病伴医院感染患者分别取血、痰、中段尿作普通细菌及细菌Ｌ型同步培养。结果 痰普通培养阳性率１２％，痰Ｌ型培养阳性率６％，中段尿普通培养阳性率４％，尿Ｌ型培养阳性率８％；血普通培养阳性率８％，血Ｌ型培养阳生率６％。结论 加做Ｌ型培养能提高急性白血病患者细菌感染的检出率。     

幽门螺杆菌结构性群体形成的研究

目的 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)由浮游状单细胞转变成结构性群体过程中蛋白质表达差异。方法 用超微结构形态观察及双向电泳技术比较浮游状幽门螺杆菌及其结构性群体全菌蛋白表达图谱的差异，将结构性群体形成过程中表达量显著增加的蛋白斑点，进行胶内酶切，肽混合物使用基质辅助激光解吸，电离飞行时间质谱仪进行质谱分析，获得4个明确的肽质量指纹谱，通过蛋白质数据库进行检索分析。结果 与结构性群体形成密切相关的蛋白质为鞭毛丝帽蛋白、2-磷酸甘油酸醋脱水酶、3，和邻苯二酚-2-丁酮4-磷酸盐合成酶和热休克蛋白33同类物。结论 上述蛋白的鉴定将有助于发现幽门螺杆菌新的致病因子以及抗菌靶位。     

嗜酸乳杆菌作用人巨噬细胞后对其抗宫颈癌细胞作用影响的研究

目的 诱导获得人外周血巨噬细胞(Mф),研究嗜酸乳杆菌作用Mф后对其抗肿瘤效应的影响及机制.方法 自正常人外周血分离获得单核细胞,体外rhGM-CSF诱导培养,观察细胞形态并检测其相关表型;利用MTT法检测所诱导Mф对宫颈癌细胞HeLa的直接抑瘤效应;ELISA法检测其培养上清中TNF-α及IL-12的含量.结果 诱导7 d的贴壁细胞具有典型的Mф形态,流式分析显示为分化成熟的Mф;体外细胞毒实验显示:嗜酸乳杆菌活菌状态和热灭活状态以10:1、1:1与Mф相互作用后能够显著增强Mф对HeLa细胞的杀伤作用(P<0.05).激活后的Mф在一定效靶比为10:1时其肿瘤抑制率最大,与LPS阳性对照相比,其抗瘤活性差异不存在显著性(P>0.05);经嗜酸乳杆菌活菌和热灭活菌作用的Mф能显著提高IL-12和TNF-α两种细胞因子的分泌量,而且存在剂量依赖性,与空白对照组比较差异存在显著性(P<0.05).结论 两种生物状态的嗜酸乳杆菌均能够增强人Mф抗宫颈癌细胞作用.     

应用随机扩增多态DNA技术鉴定淋球菌L型的临床意义

淋球菌在感染过程中 ,受体内外多种因素的影响易转变成 L型。稳定的 L型在体内不易回复成细菌型 ,且 L型缺壁后其许多生物学特性与原菌存在一定差异 ,因此用常规细菌鉴定方法对其菌种难以鉴定 ,从而影响了其临床针对性治疗。随机扩增多态 DNA(RAPD)技术是以多聚酶链反应 (PCR)为基础 ,利用随机引物和基因组 DNA模板 ,在较低温度下配对 ,延伸而获得产物。我们运用 RAPD-PCR技术将已知的淋球菌及其 L型进行同源性对比研究 ,旨在建立一种快速、特异、简便的细菌 L型鉴定方法。现报告如下。资料与方法 :1菌种 :淋球菌 L型为本院临床…     

乳酸杆菌与阴道微生态关系的研究进展

微生态是一门新兴的学科，近年来随着科技的迅猛发展，医学微生态已成为一门独立的边缘学科，并日益受到人们的重视。女性阴道从生理学角度上讲是一个闭合的体腔，其内包含着多种成分，也寄生着许多细菌。最近几年，人们研究了女性健康和病理状态下的阴道微生态，如细菌性阴道病、白色念珠菌性阴道病和滴虫性阴道炎等，     

原因不明发热患者L型细菌的血培养研究

对临床上４４例原因不明发热、青霉素治疗无效的患者进行了血普通培养和Ｌ型细菌培养。结果表明，普通培养细菌的阳性率为１８％，Ｌ型细菌培养阳性率为３６％（０．０２５＜Ｐ＜０．０５）。药敏试验结果表明，从同一患者血中分离培养出的细菌和Ｌ型细菌对药物的敏感性不同。因此，临床上对长期发热而青霉素治疗无效的患者，应及时做血普通培养和Ｌ型细菌培养并根据药敏结果综合用药     

HPV16 L1-E7蛋白疫苗诱导小鼠产生抗体及细胞免疫应答的研究

目的：探讨嵌合性病毒样颗粒HPV16 L1－E7蛋白疫苗接种于动物体内诱发体液和细胞免疫反应的能力。方法：以本室构建的HPV16 L1－E7嵌合蛋白疫苗腹腔注射免疫BALB／c小鼠，在初次免疫后，分别于第3，4，5周采血ELISA检测特异性抗体的产生。并耳皮下注射HPV16L1蛋白，检测特异性DHT反应，在末次免疫2周后，取小鼠脾细胞，用HPV 16 L1－E7蛋白刺激，检测T细胞增殖反应及血清IFN－γ水平。结果：HPV16 L1－E7蛋白疫苗免疫小鼠可有效产生HPV16 L1抗体及特异性DTH反应，加强免疫后，抗体水平升高，两者水平均高于对照组（P＜0．01），HPV16 L1－E7嵌合蛋白疫苗免疫后取小鼠脾细胞，在特异性HPV16 L1－E7蛋白抗原刺激下，特异性T淋巴细胞明显增殖，被免疫小鼠血清中出现高水平IFN－γ。结论：嵌合母亲产颗粒HPV16 L1－E7蛋白可诱导小鼠产生高滴度抗体，HPV16L1特异性TDH参与的超敏反应及细胞免疫应答的细胞因子，这为研究预防HPV感染和治疗HPV相关性肿瘤的疫苗提供了实验资料。     

HPV16L1-E7重组腺病毒载体疫苗免疫BALB/c小鼠的研究

目的:探讨人乳头瘤病毒16型L1-E7重组腺病毒载体疫苗的免疫效应。方法:①将rAd5HPV16L1-E7载体疫苗在293细胞中扩增后,以肌肉注射、腹腔注射、滴鼻和灌胃途径免疫小鼠,采用ELISA法测其血清IgG抗体水平;②制备脾细胞悬液,加入到96孔无菌培养板中,并分别加入rAd5HPV16L1-E7特异性蛋白和RPMI1640 10%胎牛血清,加入3H-TdR1μCi/孔,做T-细胞增殖实验;③取经过培养56h的培养液进行IFN-γ的测定。结果:不同途径免疫的BALB/c小鼠血清IgG抗体水平均高于对照组(P<0.05),但以肌注组产生抗体量最多,IFN-γ和T-细胞增殖亦高于对照组(P<0.05)。结论:rAd5HPV16L1-E7重组活病毒疫苗既能刺激T-细胞产生细胞介导的免疫应答,又能刺激B-细胞产生抗体介导的免疫应答,说明其具有很好的免疫原性。     

高三尖杉酯碱对HL60细胞凋亡的影响及机制的研究

目的:研究高三尖杉酯碱对HL60细胞凋亡的影响及其机制。方法:运用高三尖杉酯碱作用HL60细胞后撤药实验筛选其诱导HL60细胞凋亡启动时相,流式细胞和免疫组化技术检测高三尖杉酯碱诱导HL60细胞凋亡启动时相凋亡信号分子Bcl-2、Bax、Fas/FasL、caspase-3、ERK2和p38的表达状况。结果:在高三尖杉酯碱诱导HL60细胞凋亡启动时相,Bcl-2表达降低,Bax表达增高,Bcl-2/Bax比值降低,ERK2表达减低,p38表达增加,caspase-3表达增加,Fas/FasL分子的表达无显著变化。结论:Bcl-2、Bax、MAPK途径和caspase-3参与高三尖杉酯碱启动HL60细胞凋亡的信号转导。     

优化密码促进HPV 6b E7蛋白表达及DNA疫苗诱导的细胞免疫反应

目的：探讨优化密码对人乳头瘤病毒6b型（HPV 6b）基因表达及免疫原性的影响，为治疗性DNA疫苗的研究奠定基础。方法：设计合成含优化密码及pRB结合位点突变的HPV 6bE7(humE7）全长基因。测序验证无误后，定向克隆于pcDNA3的Kpn I和EcoR I位点，成功构建真核表达质粒pcDNA3-hu-mE7。体外转染COS－1细胞，免疫荧光检测其E7蛋白表达。C57BL／6小鼠胫前肌内接种裸DNA，观察其诱导的细胞免疫反应。结果：pcDNA3-hu-mE7在COS－1细胞获得明显表达，表达产物主要位于细胞核中。DNA免疫结果显示，与含有野生型E7基因的表达质粒pcDNA3-wtE7比较，pcDNA3-hu-mE7免疫小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ产生明显升高，CD8^ 和CD4^ 淋巴细胞活性增强。结论：优化密码能促进HPV 6b E7蛋白表达及DNA疫苗诱导的细胞免疫反应。