二甲基塞来昔布通过活性氧诱导乳腺癌细胞凋亡

目的:探讨二甲基塞来昔布（2,5-dimethyl celecoxib,DMC）对乳腺癌细胞凋亡的作用。方法:用DMC处理人乳腺癌BT-20和MCF-7细胞,检测细胞生存率、细胞凋亡情况、细胞内ROS的产生;Caspase凋亡通路相关蛋白表达水平;预处理ROS抑制剂NAC、Caspase通路抑制剂Z-VAD-Fmk,检测细胞内Caspase凋亡通路蛋白表达水平。结果:DMC对BT-20和MCF-7细胞呈现浓度及时间依赖性杀伤作用,并可以明显增加细胞的凋亡,且呈现浓度依赖性趋势;DMC可以显著增加BT-20和MCF-7细胞内ROS的产生和凋亡相关蛋白cleaved caspase-7、9的表达水平;另一组实验证明,预处理NAC和Z-VAD-Fmk,可以明显降低cleaved caspase-7、9的表达水平,且抑制剂NAC组的效果大于Z-VAD-Fmk组。结论:DMC通过ROS途径诱导乳腺癌细胞发生凋亡。     

基于质谱技术的乳腺癌代谢组学研究进展Advances in the study of breast cancer metabolomics based on mass spectrometry

乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤,是女性死亡的主要原因。鉴于乳腺癌的高发病率和死亡率,迫切需要寻找生物标志物来识别高危人群,监测疾病进展,以及评估治疗反应。近年来,基于质谱技术的代谢组学快速发展,其能动态监测遗传信息的变化、生物的刺激或者病理生理的影响导致生物体系内的总体动态改变,基于该特征,给开发并实施更有效的乳腺癌预防、早期发现、诊断和治疗提供了新的可能。本文通过对质谱检测技术在乳腺癌代谢组学方面的应用研究进展进行了详尽归纳,希望为相关研究提供参考。     

生存素下调多药耐药蛋白增强人鼻咽癌细胞株对紫杉醇敏感性的研究

目的 研究生存素（Survivin）下调多药耐药蛋白（MRP）的表达与鼻咽癌紫杉醇（PTX）耐药性关系,探讨鼻咽癌PTX耐药的分子机制.方法 采用免疫组化检测Survivin和MRP在42例鼻咽癌PTX耐药患者与24例PTX非耐药患者中的表达;采用浓度递增法持续诱导建立鼻咽癌化疗耐药细胞株5-8F-PTX（＋）,绘制细胞生长曲线,测定细胞生长的倍增时间,检测肿瘤细胞的周期分布;采用siRNA技术干扰5-8F-PTX（＋）中Survivin的表达后,Western blot法检测Survivin和MRP表达变化,MTT检测不同抗肿瘤药物PTX、顺铂（cDDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、长春新碱（VCR）耐药敏感性的变化.结果 Survivin在鼻咽癌化疗耐药患者中阳性表达率为83.3％,明显高于非耐药患者（41.7％）,差异有高度统计学意义（P＜0.01）;MRP在鼻咽癌PTX耐药患者中表达阳性率为88.1％,明显高于非耐药患者（37.5％）,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.5-8F-PTX（＋）较5-8F的细胞生长速度明显减慢,5-8F-PTX（＋）细胞生长的倍增时间为21h,亲本5-8F细胞生长的倍增时间为15 h;5-8F-PTX（＋）的G2/M期细胞百分比[（23.1±1.3）％]显著高于亲本5-8F细胞[（13.5±0.9）％];Survivin和MRP在PTX耐药细胞株5-8F-PTX（＋）细胞株中的表达水平明显高于非耐药的5-8F,siRNA干扰5-8F-PTX（＋）中Survivin的表达后,Survivin和MRP表达明显下调,PTX、cDDP、5-FU、VCR耐在siRNA-5-8F-PTX（＋）中的IC50值不同程度地下降.结论 Survivin可通过下调MRP的表达增强鼻咽癌细胞对PTX的敏感性.     

骨恶性肿瘤组织中Claudin-1和Snail的表达及其临床病理意义

目的 检测骨恶性肿瘤组织中Chudin-1和Snail的表达水平,探讨其临床病理意义.方法 55例骨恶性肿瘤(骨肉瘤30例,软骨肉瘤15例,其他骨恶性肿瘤10例)手术切除标本脱钙后常规制石蜡包埋切片,采用EnVisionTM免疫组化法检测Claudin-1和Snail的表达.结果 骨软骨瘤Chudin-1表达阳性率明显地高于骨恶性肿瘤(80.0%、vs 47.3%,X2=7.53,P<0.01),但Snail表达阳性率则相反(20.0% vs 54.5%,X2=8.33,P<0.01);骨恶性肿瘤组织学分级Ⅰ级及无转移病例Chudin-1表达阳性率明显高于组织学分级Ⅱ级或Ⅲ级及转移病例(P<0.01),但Snail表达阳性率则相反;Chudin-1和Snail在骨恶性肿瘤中的表达不相关(X2=5.15,P<0.05).结论 Claudin-1和Snail异常可能与骨恶性肿瘤发生和进展有关.     

人巨细胞病毒感染上调血管平滑肌细胞TGF-β1和TGF-βR1的表达

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管平滑肌细胞(VSMC)TGF-β1及TGF-βR1表达的影响. 方法 采用蚀斑实验检测HCMV在体外培养的VSMC中复制增殖的动态变化;采用ELISA检测不同感染时段VSMC培养上清液中TGF-β1的水平;分别采用RT-PCR和Western blot技术分析不同感染时段VSMC TGF-βR1 mRNA和蛋白的表达水平. 结果 在感染后1 d,上清液中即可检测到病毒,在感染后5 d病毒滴度达高峰,直到感染后14 d仍维持在较高水平.在感染后1 d,TGF-β1及TGF-βR1 mRNA和蛋白的表达水平均明显升高,感染后5 d达高峰,直到感染后14 d仍维持在较高的水平,各时段与模仿感染的对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 HCMV能在体外培养的VSMC中复制增殖,并能上调TGF-β1和TGF-βR1的表达.     

急性髓系白血病GLIPR1基因甲基化及其表达

目的：检测GLIPR1基因在急性髓系白血病（AML)细胞株和AML患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子甲基化的关系。 方法：以5株白血病细胞株, 以及54例治疗前AML患者骨髓、48例急性淋巴细胞胞白血病（ALL）患者骨髓、40例慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓、35例对照骨髓和8例治疗后完全缓解AML患者骨髓为样本,采用RT-PCR检测GLIPR1 mRNA表达水平,采用甲基化特异PCR（MS-PCR）方法检测GLIPR1基因甲基化状态,并对GLIPR1 mRNA表达水平与其甲基化状态进行相关性分析。 结果：GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平低于CML急性变细胞株和ALL细胞株,而前者甲基化水平高于后者。5-aza-2dC处理细胞后,GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平明显上调,而在CML急性变细胞株和ALL细胞株中的表达水平上调不明显。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平（0.38±0.20）明显低于ALL骨髓（0.76±0.18）、CML骨髓（0.80±0.14）和对照骨髓（0.85±0.12）,在完全缓解AML骨髓中的表达水平明显高于治疗前AML骨髓（0.78±0.13 vs. 0.36±0.20）;而ALL和CML骨髓中的表达水平与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓的甲基化阳性率(81.5%)明显高于ALL骨髓（37.5%)、CML骨髓（27.5%)和对照骨髓（14.3%),在完全缓解AML骨髓中的甲基化阳性率明显低于治疗前骨髓(12.5% vs. 75.0%);而在ALL和CML骨髓中的甲基化阳性率与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平与其甲基化呈负相关。结论：GLIPR1基因在AML中表达下调或缺失及启动子甲基化可能是导致GLIPR1基因表达沉默的原因,GLIPR1基因表达和甲基化水平对判断AML患者的疗效有一定意义。     

二甲基塞来昔布抗肿瘤作用的研究进展

近年来，国内外大量文献报道，传统的非甾体抗炎药物塞来昔布可以通过COX-2依赖或非依赖机制在多种恶性肿瘤中发挥抗肿瘤作用。但是，塞来昔布通过抑制COX-2可以减少血管中前列环素的产生，从而导致血栓形成事件。而2，5-二甲基塞来昔布（DMC）作为塞来昔布的紧密衍生物，尽管缺乏COX-2抑制功能，显示出比塞来昔布高20%~50%的肿瘤抑制活性，并且可能避免心血管毒性，因此，可能更适合用于恶性肿瘤的治疗。其可以通过诱导内质网应激、抑制增殖、诱导细胞凋亡、影响细胞周期、抗血管生成以及增加药物敏感性等机制发挥肿瘤抑制活性。本文对二甲基塞来昔布抗肿瘤作用的研究进展进行了详尽综述，为相关研究提供参考。     

快速血糖仪与全自动生化仪比对试验及其质量管理研究

目的了解便携式血糖仪检测的质量,规范便携式血糖仪管理。方法对56台血糖仪进行重复性试验测试,并与OLYMPUS AU640全自动生化分析仪进行比对试验,对其结果进行分析与质量管理探讨。结果 56台血糖仪中,有9台对部分样本的重复性测试不合格,1台强生血糖仪检测4号样本（6.40 mmol/L）最大相差为12.03%,3台伯乐血糖仪检测6号样本（14.59 mmol/L）最大相差大于10%,5台伯乐血糖仪检测7号样本（9.06 mmol/L）最大相差大于10%;但56台血糖仪准确度检测都合格。结论 56台便携式血糖仪检测质量总体上是可靠的,完善的管理制度是保证血糖仪检验质量的重要措施。     

采用定量蛋白质组学技术筛选急性髓系白血病HL-60细胞的甲基化相关基因

目的：筛选人急性髓系白血病细胞株HL-60甲基化沉默基因,为揭示白血病发病机制及防治提供科学依据。方法：应用荧光差异双向凝胶电泳（two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis, F-2D-DIGE)分离甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-aza-2-dC)处理与未处理的HL-60细胞的总蛋白质,Decyder和PDquest图像分析软件识别差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定差异表达蛋白质。结果：建立了5-aza-2-dC 处理与未处理的HL-60 细胞蛋白质的F-2D-DIGE图谱,图像分析识别了53个差异表达的蛋白质点,质谱分析鉴定了35个差异表达的蛋白质,其中32个蛋白质在5-aza-2-dC 处理后的HL-60 细胞中表达上调,3个蛋白质表达下调。结论：35个差异表达蛋白可能与甲基化相关,为白血病表观遗传学研究提供了有价值的信息。     

产前诊断46,XN,der(21)t(20;21)(p11.1;p11.1)一例

孕妇女,32岁。自然流产3次,均发生于停经50天左右。现有一儿子,8岁,患唇腭裂、学习成绩差,拒绝行染色体检查。本次因孕10⁺⁵周行血清学产前筛查,其21-三体综合征风险值为1/86,来我院产前诊断中心就诊。夫妻表型正常,非近亲结婚,身体状态良好,无有毒有害物质接触史,否认家族性遗传病史。本研究经医院伦理委员会批准(2020055号)。